摘要: 本实验旨在探究普安银鲫(Carassius auratus gibelio)卵黄囊仔鱼发育过程中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)及肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPTⅠ)活性变化及葡萄糖和维生素C溶液分别浸泡对它们的影响。采用酶学方法测定分析了普安银鲫内源营养期、混合营养期和外源营养期ACC、FAS及CPTⅠ的活性变化特点。在卵黄囊仔鱼发育中,对照组与维生素C组中ACC和FAS活性呈上升趋势,CPTⅠ活性呈"下降-上升"变化趋势,而葡萄糖组ACC、FAS及CPTⅠ活性均呈上升趋势,且3种酶的活性均显著高于对照组(P<0.05)。维生素C组ACC活性在内源营养期显著高于对照组,FAS活性在混合营养期和外源营养期显著高于对照组,CPTⅠ活性在内源营养期和外源营养期显著高于对照组(P<0.05)。研究表明适宜水平的葡萄糖、维生素C能促进普安银鲫卵黄囊仔鱼发育中ACC、FAS和CPTⅠ的合成与分泌而形成新的代谢水平,以维持仔鱼体中脂质代谢的动态平衡。

摘要: 在28℃水温下,采用特制的鱼类游泳行为测定装置,研究体重(125.94±13.87)g的红鳍银鲫(Barbodes schwanenfeldi)幼鱼在0.0m/s(对照组)和0.1m/s、0.3m/s、0.5m/s3种流速下的游泳行为。结果表明,从0.00.3m/s,红鳍银鲫幼鱼平均趋流率和摆尾频率均随着流速的增加而增大,而0.5m/s组在90min内随时间延长而下降。红鳍银鲫游泳状态明显受到所处流速的影响,在静水对照组以"逆流前进"和"顺流而下"为主,两者共占总观察时间的98%以上;各流速组均以逆流静止为主,且随着流速的增大,逆流静止所占时间比例从45.8%增加至81.3%,而逆流前进所占时间比例由24.1%减至5%以下;逆流后退所占时间比例以0.1m/s组最大,为16.4%;顺流而下的比例随着流速增大先减小后增大,3个流速组依次为13.7%、2.1%和10.9%。红鳍银鲫幼鱼的游泳速度(V)和摆尾频率(TBF)在逆流前进及逆流静止两种游泳状态下呈线性正相关,而在逆流后退和顺流而下两种状态下两者没有显著相关。

摘要: 本实验旨在探究普安银鲫(Carassius auratus gibelio)早期发育过程中氧化损伤程度和总抗氧化能力的变化,及添加维生素C(Vc)后对它们的影响。采用生化方法测定了普安银鲫早期发育过程中丙二醛(MDA)含量、蛋白质羰基(PCA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)的活性和总抗氧化能力(T-AOC)。(1)30 mg/L的Vc溶液中仔鱼孵化率和成活率最高,分别高出对照组(Vc浓度为0 mg/L)16.2%和17.8%;(2)普安银鲫早期发育过程中丙二醛、蛋白质羰基含量及乳酸脱氢酶活性均呈"升高-降低"的趋势,均在原肠中期达到最高,总抗氧化能力逐渐增加;(3)30 mg/L的Vc组中丙二醛、蛋白质羰基含量及乳酸脱氢酶的活性显著低于对照组(P<0.05),总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05)。结果表明,(1)普安银鲫胚胎期受到的氧化损伤比胚后严重;(2)适宜浓度的维生素C能提高胚胎及仔鱼的抗氧化能力,有效降低胚胎及仔鱼受到的氧化损伤,提高其孵化率及存活率。

摘要: 用抑制性差减杂交结合SMARTcDNA合成和RACE PCR技术克隆到雌核发育银鲫 (Carassiusauratusgibelio)肌酸激酶M 3 CK基因的全长cDNA。银鲫M 3 CKcDNA全长 15 5 1bp ,编码 380个氨基酸 ,与普通鲤鱼(Cyprinuscarpio)M3 CK的氨基酸序列同源性高达 95 %。种系分析表明 ,银鲫M3 CK与其它脊椎动物的肌肉型肌酸激酶聚为较近的一支 ,与鲤鱼的M 3 CK聚在一起 ,与脑特异型肌酸激酶及线粒体型肌酸激酶分歧较大。虚拟Northern杂交显示银鲫M 3 CK基因在胚胎发育中差异表达。RT PCR表明 ,银鲫M3 CK基因在成熟卵母细胞和胚胎发育早期可检测到少量的转录产物 ,在胚胎发育期间从肌肉效应期开始转录 ,并一直持续表达。组织RT PCR表明 ,银鲫M 3 CK基因只在心脏和肌肉表达 。

摘要: 种系细胞始自胚胎发育早期,是动物生殖及生殖工程的基础。为研究鱼类的种系细胞提供标记分子,我们克隆并鉴定了银鲫的vasacDNA即Cagvasa。CagvasacDNA全长2771碱基(nt),编码的蛋白为银鲫Vasa即CagVasa,全长701个氨基酸(aa)。CagVasa蛋白与已知Vasa蛋白的结构特征一致:在N端有14个RGG重复序列,在C端Vasa所特有的8个功能域俱全。银鲫Vasa与鲤鱼、斑马鱼、陆生脊椎动物和果蝇的Vasa蛋白分别有95%,89%,61%-66%和50%的同源性。卵巢切片的RNA原位杂交揭示,Cagvasa限于种系细胞,且表达水平呈现出低-高-低的动态变化:即两头低(卵原细胞跟Ⅳ期成熟卵子),中间高(Ⅱ-Ⅲ期卵子)。为分析鱼类种系细胞提供手段,我们用310aa的N端序列产生细菌的重组蛋白来免疫大白兔,获得了抗Vasa的多克隆抗体αVasa。Western免疫印迹表明,αVasa特异性地识别一个鱼类性腺的蛋白,该蛋白的分子量为75kD,仅见于银鲫的性腺和卵子。卵巢切片的组织免疫荧光共聚焦显微分析表明,抗体αVasa只对种系细胞染色:卵原细胞着色最深,卵母细胞和早期的卵子都浓染,成熟卵则浅染。类似情况亦见之于精子发生早期阶段的雄性种系细胞。卵巢和精巢的体细胞则不着色。因此,Cagvasa编码的当是Vasa同源蛋白,为银鲫种系细胞的第一个标记分子。我们的研究表明,抗体αVasa染色灵敏度高,特异性好,当是鉴别银鲫及其它鲤科鱼类的种系细胞的有效手段