摘要: 为了分离鉴定暗黑鳃金龟的性信息素成分并对其功能进行验证,本研究对比摸索了3种触角的处理方法,并进行同一浓度(30 ng·μL(-1))二元混合物、不同配比的触角EAG测试。结果包括:建立了一种鳃叶状触角的触角电位(EAG)测定方法,即将暗黑鳃金龟Holotrichia parallela触角的各鳃叶用针分离开后进行测定,这种方法测得的触角电位反应值较高。雄虫触角对L-异亮氨酸甲酯和(R)-(-)-芳樟醇为7:1的二元混合物的反应值最高,和暗黑鳃金龟雌虫性信息素25个腺体提取液的EAG反应相当;对同一配比(7:1)不同剂量刺激液的EAC测试表明,雄虫对浓度为30 ng·μL(-1)的二元混合物刺激液的反应值最高。嗅觉反应结果进一步证实,试虫对L-异亮氨酸甲酯和(R)-(-)-芳樟醇7:1的选择最高,选择系数达93.3%。研究结果为利用性信息素防治暗黑鳃金龟技术的开发提供了基础。

摘要: 利用扫描电镜和透射电镜对苹毛丽金龟Proagopertha lucidula(Faldermann)雌雄成虫触角嗅感器超微结构特征进行研究。结果表明:嗅感器集中于触角鳃片上,分布在触角鳃片表皮内陷形成的凹腔里,有5种感器,以板状感器为主,以外还有锥状感器、腔状感器、腔锥状感器和毛状感器。板状感器根据盘体形状的不同可分为4种类型,锥状感器根据锥体形状的差异可分为2种类型,腔锥状感器根据形状分为2种类型。嗅感器表皮有微孔和孔道微管。嗅感器内神经元的数目并不一致,12个不等。雄虫鳃片嗅感器总数显著多于雌性,是雌虫嗅感器总数1.8倍。其中雄性锥状感器的数目是雌性2倍,雌虫腔锥状感器数量是雄虫的4倍,雄虫板状感器数量是雌虫的2倍,雌雄腔状感器的数目无显著性差异。

摘要: 6本文以华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita中肠为材料,依据Stratagene公司文库构建试剂盒方法,构建其中肠cDNA表达文库,该文库滴度为1.9×106pfu/mL,重组率为99.97%。依据现代免疫学原理,利用棉铃虫Helicoverpaarmigera围食膜蛋白多克隆抗体筛选文库,得到两个编码华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的cDNA克隆Ho-Peritrophin1与Ho-Peritrophin2,其cDNA长分别为2385bp和1633bp,在polyA末端上游各有3个多聚腺苷酸信号序列AATAAA,最长开放阅读框(ORF)分别编码729个和477个氨基酸,与粉纹夜蛾Trichoplusia niCBP2(chitin bindingprotein2)的相似性最高,分别为21.9%和19.1%。结构域分析表明,Ho-Peritrophin1与Ho-Peritrophin2分别具有9个和6个几丁质结合功能域,只含有较少的O-糖基化位点,不含有类粘蛋白结构域。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶对两种蛋白的作用位点主要位于几丁质结合功能域(chitin binding domain,CBD)内部,而因受几丁质结合功能域保护,这两种蛋白能够抵抗这些蛋白酶的降解。与正常CBD比较,这两种蛋白C端的CBD只含有4个Cys,只在第1与第3、第4与第5个Cys之间形成两对二硫键,缺少由第2与第6个Cys形成的二硫键。推测其N端还应包括信号肽序列和几丁质结合功能域的未知序列。

摘要: 研究了丽金龟科(Rutelidae)铜绿丽金龟Anomala corpulenta和黄褐丽金龟A.exoleta幼虫感染苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis HBF-1菌株后的病症,并采用组织切片的方法研究了感染HBF-1菌株后中肠的组织病理变化。结果表明:丽金龟科幼虫感染HBF-1菌株后,初期幼虫无明显感病症状,随着感染时间的延长,逐渐出现反应迟钝、麻痹、丧失条件反射能力等症状,最终虫体变黑、伸直或是收缩,直至死亡,时间稍长便会呈腐稠状。在相差显微镜下观察中肠组织切片发现,感染3d时,肠壁细胞出现变形及空洞;7d时,细胞破坏更加严重,甚至无法辨认细胞形状;10d时,肠壁细胞开始脱离底膜;新鲜死虫,肠壁细胞连同细胞内含物全部脱离,仅留底膜。

摘要: 松墨天牛Monochamus alternatus Hope是重大森林植物检疫性病害———松材线虫病的主要媒介昆虫。采用跗节接种法测定金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae MaYTTR-04菌株对松墨天牛成虫的致病力。结果表明:在恒温条件下,松墨天牛第6天开始死亡,第18天21天为死亡高峰期,每头成虫接种孢子量为2.3×106±0.2×106时成虫的死亡率第18天达85%,第21天达95%;时间效应指标值LT50为14.7天。室内自然变温条件下,松墨天牛第3天出现死亡,第15天21天为死亡高峰期,每头成虫接种孢子量为2.3×106±0.2×106时的死亡率在第15天达85%,第21天达100%;时间效应指标值LT50为12.9天。林间套笼21天后,菌液处理的成虫平均死亡率为60%,僵虫率为48.9%;而通过无纺布菌条的成虫死亡率为86.7%,僵虫率为75.6%。表明MaYTTR-04菌株对松墨天牛成虫有强的致病力,且在较高变温环境温度下致病力更强。结果说明该菌株可作为生产性菌株应用于林间防治松墨天牛。