摘要: 【目的】为了弄清从云南省昆明市寻甸县大河桥农场田间自然罹病的小阔胫绒金龟Maladera ovatula (Fairmaire)幼虫僵虫上分离纯化获得的1株绿僵菌Metarhizium sp.(编号MAXD170705)的种类及其培养条件,为蛴螬生防制剂开发提供依据。【方法】室内通过菌株的分离与纯化,并根据形态特征及ITS-5.8SDNA基因序列,对该菌株种类进行鉴定,同时采用正交旋转组合试验设计,测定该菌株在不同培养基上于不同温度、光照、pH值条件下的菌落生长速度及产孢特性。【结果】经形态学与分子鉴定,确定菌株MAXD170705为金龟子绿僵菌Metarhiziumanisopliae,该金龟子绿僵菌MAXD170705菌株在SMAY、PDA和SDAY 3种培养基上均能生长,但在SDAY培养基上孢子萌发率以及菌落生长、产孢时间与产孢量均优于其他2种培养基。在(25±1)℃、16 L︰8 D和pH=7.0条件下MAXD170705菌株生长最快,菌落直径日增量为0.38 cm/d;菌落直径最大,第8天达2.73 cm;产孢时间最早,从第3天开始产孢,并且产孢量最高,达6.68×106孢子/cm2。【结论】营养成分对菌株发育过程中具有重要作用,只有丰富而且恰当的营养条件才有利于不同来源的绿僵菌菌丝生长以及产孢。除此之外,外界环境条件也是影响其生长发育的重要因素。综合以上结果,利用pH=7.0的SDAY培养基,于25℃、光照16L︰8D为金龟子绿僵菌MAXD170705的最适培养条件。

摘要: 【目的】植食性金龟子是我国的重要农林害虫,探索一种快速而准确地鉴别植食性金龟子的新方法,为将此法推及至其他鞘翅目昆虫的识别来建立研究基础。【方法】利用近红外光谱法对金龟子进行鉴别,提出了用支持向量机(Support vector machine,SVM)算法对15种植食性金龟子近红外光谱图(数据)进行分析,经过噪声波段去除后,用平滑求导与标准化法对的光谱进行预处理,选取金龟子标本150个,针对不同分类阶元和分类单元将66%样本谱图作为校正集,用SVM建立鉴别模型并对模型进行自身检验,用剩余样本图谱作为预测集对这些模型进行验证。【结果】模型的自身检验显示在金龟科4个亚科的鉴别模型中,鳃金龟亚科正确识别率为86%,其他样本的识别准确率均大于95%,在亚科不同属和属下不同种的鉴别模型中,除疏纹星花金Protaetia cathaica(Bates)外,其他样本的识别准确率均为100%;模型的预测集验证结果显示,在不同分类阶元和分类单元的鉴别模型中,由于云斑鳃金龟Polyphylla laticollis Lewis样本较少未能正确识别,其他样本的识别准确率均为100%。整体试验结果较为理想,说明模型性能较好。【结论】基于已定金龟子建立的模型能够很好地鉴别大部分样本,采用近红外光谱扫描技术结合支持向量机得到的植食性金龟子鉴别模型具有很强的推广能力。

摘要: 【目的】明确对蔗根土天牛Dorysthenes granulosus具有良好杀虫活性的金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae JC002菌株生长和产孢所需要的最适营养条件和环境条件。【方法】通过单因素试验,测试了不同培养基、碳源、氮源、温度、pH及紫外线照射不同时间对JC002菌株生长和产孢的影响。【结果】JC002菌株培养基的最佳配方是葡萄糖30 g、蛋白胨15 g、马铃薯200 g、琼脂20 g、水1 000 mL;蔗糖、NaNO3是菌落生长及产孢的最适碳源和氮源;菌株培养的最适温度为25℃,培养基的最适pH值为7.0;紫外光对菌株的生长速率无显著影响,但对产孢量有较大的抑制作用,紫外光照射时间越长,产孢越少。【结论】本研究为JC002菌株的大量培养及其孢子制剂的大量生产和有效利用奠定基础。

摘要: 利用两类不同的引物,即通用引物(L1490,H2198)与特异引物(Pat,Jerry)分别对4种常见金龟子线粒体细胞色素C氧化酶I(COⅠ)基因片段序列进行扩增和测序,获得长度为689 bp与775 bp的序列。对测序结果进行遗传距离分析,并构建了4种金龟子系统进化树。结果表明,特异引物扩增序列的遗传距离在种内稳定性与种间的差异性都明显优于通用引物扩增序列,利用特异引物扩增序列所构建的系统进化树最符合实际情况,因此利用特异引物扩增序列更能够准确的对金龟子进行分类。

摘要: 利用大蜡螟Galleria mellonella L.诱菌法对转Cry1Ac抗虫棉GK-12及其亲本棉花SM-3的根系区域土壤的虫生真菌种类和数量进行监测,评价转Cry1Ac基因对棉田土壤虫生真菌的影响。实验结果显示:检测到的虫生真菌种类,在转基因棉GK-12及其亲本棉SM-3之间无显著差异,均为球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae);在棉花开花初期、盛花期、结铃期或吐絮期,土壤虫生真菌数量在抗虫棉GK-12和亲本SM-3之间存在显著的差异,其他生育期无显著差异;在距棉花主根不同距离(5 cm15 cm25 cm)的区域,土壤虫生真菌数量和种类在抗虫棉GK-12和亲本SM-3之间无显著差异。