摘要: 阿尔茨海默病是一种常见的神经退行性疾病，临床主要表现为进行性记忆能力丧失和整体认知能力下降。两种典型的病理特征为在脑内检测到的老年斑和神经纤维缠结，分别由大量沉淀的淀粉样蛋白肽和过度磷酸化的Tau蛋白组成。除此之外还有神经炎性反应以及神经元广泛丢失等其他病理特征。在过去的几十年间虽然人们已经对阿尔茨海默病进行了大量的研究，但是其病因和发病机制仍不明确，至今也没有理想的治疗药物和根治方法。本综述介绍在临床前研究中使用的各种转基因动物模型的各自特点，及其目前在临床前研究中的应用情况，为未来的实验研究提供理论依据。

摘要: 目的 比较和探讨6月龄和12月龄的APP/PS1双转基因模型小鼠嗅球组织病理形态、超微结构特征、空间记忆能力的变化以及美金刚干预的作用。方法 将SPF级3月龄雄性APP/PS1小鼠按随机数字表法分为6月龄、12月龄的模型组（分别为命名为6-APP/PS1组、12-APP/PS1组）和盐酸美金刚（memantine hydrochloride,MEM）干预组（分别命名为6-MEM组、12-MEM组，MEM剂量均为2.60 mg/kg/d），每组10只。另设同龄C57BL/6小鼠作为空白对照组。MEM连续（分别自3月龄和9月龄）灌胃3个月，非MEM处理小鼠接受等容积纯净水灌胃。于6月龄和12月龄时进行Morris水迷宫实验检测，固定取材进行HE染色后光学显微镜下观察嗅球病理组织形态，超薄切片染色后透射电子显微镜下观察嗅球超微结构。结果 水迷宫结果显示，与同龄的空白对照组比较，6-APP/PS1组和12-APP/PS1组小鼠的穿台次数、穿梭目标象限的时间及路程明显降低（均P<0.05），且12-APP/PS1组比6-APP/PS1组的降低程度更明显（均P<0.05）；与同龄的模型组比较，6-MEM组和12-MEM组的穿台次数、目标象限停留时间及路程显著提高（均P<0.05）。组织病理学观察发现，与同龄的空白对照组比较，6-APP/PS1组小鼠嗅球的神经细胞无明显萎缩变形且僧帽细胞数量显著减少（P<0.05）,12-APP/PS1组小鼠嗅球的神经细胞萎缩变形且球周细胞、僧帽细胞数量显著减少（均P<0.05）；与同龄模型组比较，6-MEM组球周细胞无显著增多但僧帽细胞数量显著增多（P<0.05）,12-MEM组球周细胞、僧帽细胞数量有增加趋势但差异无统计学意义（均P>0.05）。超微结构观察显示，与同龄的空白对照组比较，6-APP/PS1组突触结构出现肿胀，突触后致密物厚度及非对称性突触数量减少；12-APP/PS1组突触结构肿胀，非对称性突触及突触后致密物厚度无法观测。与同龄模型组比较，6-MEM组突触肿胀改善明显，突触后致密物厚度及非对称性突触数量增加；12-MEM组突触肿胀改善不明显，突触后致密物及非对称性突触无法观测。结论 随月龄增加，不同时程的APP/PS1小鼠出现了阿尔茨海默病相关的行为学改变，同时伴随嗅球病理及突触特征的显著变化。MEM干预不仅改善空间记忆能力，还可增加6-APP/PS1小鼠嗅球的僧帽细胞数量，减轻突触结构损伤，早期干预的改善效果显著。

摘要: 目的比较细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)转基因小鼠研制中的几个关键因素如实验小鼠遗传背景、BAC质粒注射浓度、BAC质粒片段大小和BAC注射液存放时间等,优化BAC转基因小鼠研制技术。方法采用相同的BAC DNA制备方法,分别选取C57BL/6J(B6)和FVB/N两种实验小鼠,用质量浓度分别为0.75、1.0、1.5和2.0 ng/μL的BAC注射液进行胚胎显微注射,分析不同BAC DNA片段大小和BAC载体DNA制备后至注射前的时间长度,比较小鼠出生率、转基因小鼠阳性率。结果用FVB/N为背景的转基因小鼠阳性率较用C57BL/6J高(P<0.05)。4个BAC质粒注射质量浓度对应的C57BL/6J和FVB/N仔鼠出生率由高到低排序依次为0.75 ng/μL组>1.5 ng/μL组>1.0 ng/μL组>2.0 ng/μL组。4个BAC质粒质量浓度注射时,C57BL/6J转基因小鼠阳性率由高到低排序依次为1.5 ng/μL>1.0 ng/μL>2.0 ng/μL=0.75 ng/μL,FVB/N转基因小鼠阳性率由高到低排序依次为1.5 ng/μL>1.0 ng/μL>2.0 ng/μL>0.75 ng/μL。当BAC片段大小为197 kb时,仔鼠出生率最高,为(22.49±9.41)%;片段大小为99 kb时仔鼠出生率最低,为(13.61±15.65)%;当BAC片段为197 kb时,转基因小鼠阳性率最高,为(13.56±12.88)%,极显著高于114 kb(P<0.01),显著高于99 kb(P<0.05)。BAC注射液的存放时间与转基因小鼠阳性率并不呈线性关系。结论相较于C57BL/6J,FVB/N背景更适于BAC转基因小鼠的研制。BAC注射液质量浓度为1.5 ng/μL时,阳性转基因小鼠的制备效率最高。BAC片段大小并非阳性转基因小鼠的限制因素。BAC载体DNA制备后1周内完成注射的效果最佳。

摘要: 选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒,3批活疫苗样品(WHO/Ⅲ参考制品,93/363和3J两批猴体神经毒力实验不合格的疫苗)和1株标准强毒株(Leon),脊髓内注入携带有人细胞脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠(PVRTg21)。临床观察和组织病理学检查表明,Leon病毒的毒力极强,20log10TCID50可使100%小鼠麻痹和死亡。WHO/Ⅲ疫苗参考制品毒力最弱,55log10TCID50才能使817%小鼠麻痹和517%小鼠死亡。另两个疫苗样品的毒力都高于参考制品。各项观察指标随毒力不同而有明显差别,和猴体神经毒力实验结果一致。证明PVRTg21小鼠可用作评价脊髓灰质炎活疫苗毒力试验的动物模型,也可用于病毒学和流行病学研究。

摘要: 生殖系嵌合体的获得是实现ES细胞介导的转基因途径的决定步骤,而嵌合体的制作及生殖系嵌合体的获得则是判定ES细胞系是否具有配子分化能力的有效方法。利用一株表达绿色荧光蛋白的杂种ES细胞系制备出嵌合体小鼠,共获得9只表达绿色荧光蛋白的嵌合体小鼠,其中有8只雄性, 1只雌性,目前均发育成健康成年小鼠。流式细胞检测显示了绿色荧光蛋白在嵌合鼠以下器官的表达情况:心(77.96±15.78) %、脾(84.06±3.60) %、肾(42.49±19.79) %、骨髓(52.02±18.78) %。昆明雌鼠与雄性嵌合鼠杂交1代(F1)毛色表型分析显示该株ES细胞具有生殖系嵌合能力。