摘要:

摘要: 我国最新《城市供水水质标准》(2005年6月)提出了关于隐孢子虫和贾第鞭毛虫的控制指标,但其推荐检测方法还没有产生.本文针对美国EPA1623检测方法中的3个关键步骤,在浓缩、分离和染色等过程中进行了相应的改进或替代,并对各种备选的方案进行了探讨和比较分析.结果表明,微孔滤膜过滤→乙酸乙酯福尔马林分离→改良抗酸+铁苏木联合染色具有较好的敏感性,操作简单且成本较低,适宜作为国内普通自来水厂的初级检测方法.图2表4参20

摘要: 建立蓝氏贾第鞭毛虫感染动物模型 ,用PCR技术对感染动物粪内该虫tim基因进行检测 ,探讨蓝氏贾第鞭毛虫基因检测方法。用人源蓝氏贾第鞭毛虫河北株 (CD)和江苏株 (XZ)的包囊分别接种两组C5 7BL 6N小鼠 ,于接种后第 6天、1 0天和 1 4天收集粪便标本 ,采用酚 氯仿法提取总DNA。将提取液分别按 1 0 0 、 1 0 - 1 、 1 0 - 2 和 1 0 - 3稀释并纯化。根据该虫磷酸丙糖异构酶 (Triosephosphateisomerase,tim)基因合成 1对特异性引物 ,采用PCR技术分别扩增各个稀释度的样本。结果贾第虫阳性样本均被扩增出相应基因的 1条 683bp长的片段 ,纯化后的各个稀释度样本的PCR检测阳性率随稀释倍数的增加而增高。本研究结果为贾第虫感染基因检测方法的进一步研究提供了实验资料。

摘要: 采用聚合酶链反应 (PCR)对蓝氏贾第鞭毛虫 (Giardialamblia)的磷酸丙糖异构酶 (triosephosphateisomerase ,缩写为tim)基因进行特异性扩增 ,结果扩增出 1条 6 83bp的DNA片段。此方法的特异性可高达10 0 % ,而其它DNA样本 ,如日本血吸虫 (Schistosomajaponicum)、刚地弓形虫 (Toxoplasmagondii)、微小隐孢子虫 (Cryptosporidiumparvum)、溶组织内阿米巴 (Entamoebahistolytica)、旋毛虫 (Trichinellaspiralis)和阴道毛滴虫 (Trichomonasvaginalis) ,以及人体血细胞等均未出现扩增反应。本法的敏感性也很高 ,可检测到0 4pg贾第虫包囊的DNA。 13株来自不同地理位置和 或宿主的贾第虫DNA样本在PCR中均各产生 1条长为 6 83bp的目的片段。上述结果表明本实验建立的检测贾第虫的PCR方法有效

摘要: 从羊、牛和人各自分离出的贾第虫株都具有一个大的膜蛋白。用生物素和放射性碘标记后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示此膜蛋白分子量的大小，在不同种群之间有着明显的差异。［３５Ｓ］半胱氨酸代谢标记及电泳分析表明每个克隆化虫株都有一个主要蛋白，此蛋白的大小与表面标记技术展示的表面蛋白相似。贾第虫株富含半胱氨酸表面蛋白（ＣＲＩＳＰｓ）具有变异能力。虫株在连续体外克隆化培养几代后，在克隆化的群体中自发的出现了一些新的ＣＲＩＳＰｓ，用抗Ｏ２－４Ａ１虫株表面抗原的特异性抗血清对此虫株进行攻毒反应，结果发现在Ｏ２－４Ａ１的培养液中，这一克隆却存活下来。对重新克隆存活下来的滋养体进行半胱氨酸代谢标记，发现大量新的变异子，而不同克隆的ＣＲＩＳＰ其分子量存在着明显的差异。本文研究提示来自不同宿主的贾第虫株都存在着富含半胱氨酸表面蛋白（ＣＲＩＳＰ）。ＣＲＩＳＰｓ的变异不仅限于从人分离的贾第虫株，而在各类贾第虫株之间是一种普遍现象。