摘要: 【目的】探究星豹蛛Pardosa astrigera羧酸酯酶基因PaCarE1-4是否与其代谢溴氰菊酯有关。【方法】采用RT-PCR技术克隆星豹蛛4个羧酸酯酶基因PaCarE1-4 cDNA序列，通过生物信息学软件分析其序列特性。采用RT-qPCR技术测定这4个羧酸酯酶基因在星豹蛛雌雄成蛛不同组织(头胸部、腹部和足)以及在不同浓度(LC_(10)=5.151 mg/L; LC_(30)=8.619 mg/L; LC_(50)=12.311 mg/L)溴氰菊酯胁迫12 h和LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫2, 4, 8, 12, 24和48 h雄成蛛中的相对表达水平。【结果】克隆获得星豹蛛羧酸酯酶基因PaCarE1-4(GenBank登录号分别为MZ643212, MZ643214, MZ643215和MZ643216)的全长cDNA序列，开放阅读框(ORF)分别长1 653, 1 803, 1 827和1 818 bp,分别编码550, 600, 608和605个氨基酸。组织表达谱结果表明，PaCarE1和PaCarE2在星豹蛛雌雄成蛛腹部中的表达量最高，且在雄成蛛腹部中的表达量高于雌成蛛中的；PaCarE3和PaCarE4在雌雄成蛛头胸部中的表达量最高，且PaCarE3在雌成蛛头胸部中的表达量高于雄成蛛中的，PaCarE4在雄成蛛头胸部中的表达量高于雌成蛛中的。LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫12 h诱导了星豹蛛雄成蛛中PaCarE1的表达，LC_(10)和LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫12 h诱导了PaCarE2的表达。LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫不同时间后，与对照组(丙酮处理组)相比，星豹蛛雄成蛛中PaCarE4的表达量与对照组均无显著差异，而PaCarE1的表达量在处理后2, 8和12 h,PaCarE2的表达量在处理后12 h,以及PaCarE3的表达量在处理后24 h显著上调。【结论】羧酸酯酶基因PaCarE1,PaCarE2和PaCarE3可以被溴氰菊酯诱导表达，表明其可能参与星豹蛛对溴氰菊酯的代谢过程。本研究结果有助于了解星豹蛛对外源物质的代谢机理，为这一捕食性天敌的保护提供了新思路。

摘要: 利用压电体声波阻抗分析法实时动态监测了拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata中肠蛋白消化酶对酪蛋白的酶促水解过程及不同浓度梯度(0.008%、0.016%、0.024%和0.032%)的甲胺磷农药对酶活性的影响,并用紫外分光光度法进行了验证。结果表明,合适低剂量(0.008%)的甲胺磷农药可显著地增强拟环纹豹蛛蛋白消化酶的活性,较高剂量(0.032%)的农药却显著抑制蛋白消化酶的活性,且水解过程稳态频移值可准确地反映酶活性与农药浓度的关系。本工作为研究低剂量农药增强蜘蛛控虫力的机理及酶活性的快速检测提供了一种可行的新方法。

摘要: 利用紫外分光光度法,对化学防治田(化防田)和生物防治田(生防田)中的拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata体内乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)的分布及其活性进行了比较研究。结果表明,生防田拟环纹豹蛛身体各分部的AChE活性[包括头胸部1.251nmol/(mg.min)、腹部0.467nmol/(mg.min)和附肢0.760nmol/(mg.min)]均高于化防田蜘蛛[包括头胸部0.895nmol/(mg.min)、腹部0.445nmol/(mg.min)和附肢0.724nmol/(mg.min)],而生防田豹蛛的CarE活性[包括头胸部0.122nmol/(mg.min)、腹部0.593nmol/(mg.min)和附肢0.073nmol/(mg.min)]均低于化防田蜘蛛[包括头胸部0.158nmol/(mg.min)、腹部0.708nmol/(mg.min)和附肢0.115nmol/(mg.min)],说明化防田拟环纹豹蛛产生了一定程度的抗药性。拟环纹豹蛛体内的AChE主要集中在头胸部,CarE主要集中在腹部,这种分布特征是与其抗药性机制相适应的,并对其抗药性机制的形成做出了初步解释。这些结果也提示,拟环纹豹蛛对甲胺磷等农药的抗性不能在短期内形成,必须经历水稻→害虫→蜘蛛的较长的适应演化过程。

摘要: 在室内研究了低剂量农药作用下拟环纹豹蛛对褐飞虱的功能反应及搜寻行为。结果表明,拟环纹豹蛛对褐飞虱的功能反应均符合HollingⅡ模型,且在最适的低剂量农药(V药∶V水为2∶5000甲胺磷,12∶5000杀虫双和1∶20烯丙菊酯)刺激下,蜘蛛捕食褐飞虱的数量是最多的,蜘蛛用于对1头褐飞虱进行制服和取食等活动所需的时间(处理猎物时间,Th)短,仅分别为未经农药处理的蜘蛛所需时间的0.45、0.32和0.35倍;而施用较高剂量8∶5000的甲胺磷、28∶5000的杀虫双和6∶20的烯丙菊酯的蜘蛛,处理猎物时间长得多,依次是经最适低剂量3种农药作用的蜘蛛所用时间的9.70、13.60和13.62倍。拟环纹豹蛛在稻株上的搜寻行为属非随机搜索型,在相同的低剂量农药作用下,蜘蛛的搜寻效应随飞虱密度的增加而下降;但在相同的猎物密度下,蜘蛛的搜寻效应与使用的农药浓度有密切的关系,在上述最适低剂量农药作用下,豹蛛对猎物的寻找效应最佳,其在稻株上的总滞留时间依次是未施药情形的1.56、1.49、1.48倍,总搜寻距离依次是未施药情形的1.36、1.42、1.39倍。据此,进一步证实了低剂量农药增强了稻田蜘蛛的控虫效能和对害虫的相对活力。

摘要: 为查明拟环纹豹蛛Pardosa pseudoannulata不同地理种群的遗传多样性机制,应用AFLP技术对6个拟环纹豹蛛地理种群的遗传多样性进行了研究分析。8对引物组合扩增出1038个AFLP条带,其中多态性条带占86.622%,全部个体显示了各自独特的AFLP图谱。AFLP标记的遗传多样性分析结果表明:拟环纹豹蛛无论在物种水平(P=86.62%,H=0.2622,I=0.3101),还是在种群水平(P=73.0%,H=0.2155,I=0.2554)都表现出较高的遗传多样性。其中湖南长沙雷锋镇种群内遗传变异最大,云南高黎贡山福贡种群内遗传变异最小,华南北部(湖南、湖北、江西)地区拟环纹豹蛛遗传多样性明显高于华南南部(云南、海南)种群。据种群变异来源分析,有35.77%的遗传变异来自种群间,64.23%的变异来源于种群内(Nm=0.898),不同地理种群显示出一定的遗传分化。分析认为海拔是影响拟环纹豹蛛遗传分化的重要因素,这为进一步明确我国稻田狼蛛优势种群在农药胁迫下的遗传适应性机制提供了实验依据。