摘要: 【目的】本研究旨在丰富西方蜜蜂Apis mellifera过氧化物还原酶5（peroxiredoxin-5） AmPRX5的理化性质和分子特征信息，检测AmPRX5的表达模式，并探究AmPRX5在蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染后对西方蜜蜂的抗氧化应激作用，为进一步开展AmPRX5功能和作用机制研究提供科学依据。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmPRX5的CDS;使用相关软件预测AmPRX5的理化性质和分子特征，构建蛋白互作网络，并进行保守基序、结构域和系统进化分析。采用RT-qPCR检测AmPRX5在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段（卵、 3和5日龄幼虫、 1和2日龄预蛹、 1日龄蛹以及1, 2, 6, 8和12日龄成虫）和工蜂成虫不同组织（脑、咽下腺、中肠、触角、毒腺、表皮和脂肪体）及3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量；利用分光光度法检测蜜蜂球囊菌接种3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的过氧化氢（H₂O₂）含量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmPRX5的CDS,长558 bp。AmPRX5的分子式为C₉₀₄H₁₄₄₅N₂₄₁O₂₆₄S₈,分子量约为20.17 kD,等电点为8.99,平均亲水系数为-0.013。AmPRX5含有19个磷酸化位点，但不含典型的信号肽和跨膜结构域。AmPRX5的二级结构包含88个无规卷曲、 59个α-螺旋和38条延伸链。AmPRX5与硫氧还蛋白还原酶等10个蛋白构成1个互作网络。西方蜜蜂和其他9种蜂的PRX5均包含1个相同的PRX5结构域和6个保守基序。西方蜜蜂与东方蜜蜂A.cerana的PRX5同源性最高。AmPRX5在1日龄蛹中的表达量最高且显著高于卵、 3日龄幼虫、 5日龄幼虫、 1日龄预蛹和2日龄预蛹中的表达量；AmPRX5在12日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1, 2, 6和8日龄成虫体内的表达量；AmPRX5在成虫触角中的表达量最高且显著高于中肠、脂肪体、表皮、毒腺和脑中的表达量。与未接种对照组比较，西方蜜蜂3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后AmPRX5的表达量在4日龄幼虫肠道中上调但无显著差异，在5日龄幼虫肠道中极显著上调，在6日龄幼虫肠道中显著上调；H₂O₂的含量在接种蜜蜂球囊菌后4和5日龄幼虫肠道中均极显著上升，在6日龄幼虫肠道中显著升高。【结论】AmPRX5是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白；AmPRX5在西方蜜蜂不同发育阶段和不同组织中动态差异表达；AmPRX5可能通过影响H₂O₂含量参与幼虫对蜜蜂球囊菌侵染的应答。

摘要: 【目的】联苯菊酯广泛应用于蜜源作物害虫防治中，可能会对蜜蜂健康造成危害。本文主要探究了亚致死浓度联苯菊酯对西方蜜蜂Apis mellifera生存、取食、免疫解毒相关基因表达及肠道菌群的影响。【方法】利用5 mg/L和0.5 mg/L的联苯菊酯对西方蜜蜂处理7 d，统计各组蜜蜂的生存率和取食量；利用qPCR技术检测蜜蜂中肠中免疫和解毒基因表达变化；采用16S rDNA测序技术检测蜜蜂肠道菌群丰度、结构变化。【结果】结果显示：（1） 5 mg/L联苯菊酯能够显著降低蜜蜂的生存率和花粉取食量（P<0.05），而对含联苯菊酯的糖水取食量没有显著影响；（2）5 mg/L联苯菊酯显著抑制蜜蜂中肠中CYP6AS3和CYP6AS10基因的表达（P<0.05），而诱导Abaecin、Apidaecin、Defensin、Hymenoptaecin基因上调表达（P<0.05）;0.5 mg/L联苯菊酯显著抑制蜜蜂中肠中Lysozyme、CYP6AS10基因的表达（P<0.05），而诱导Apidaecin、Defensin基因上调表达（P<0.05）;(3)联苯菊酯处理改变了蜜蜂肠道菌群的多样性，并影响特定肠道菌的丰度。【结论】结果表明联苯菊酯暴露不仅损害西方蜜蜂的生存和取食，并对其中肠的免疫解毒系统以及肠道稳态造成影响。