摘要: 【目的】本研究对前期鉴定所获得的5个微小RNA(microRNA, miRNA)进行表达和序列验证，检测其在褐飞虱Nilaparvata lugens不同发育阶段和成虫组织中的表达模式，旨在为探究miRNA调控褐飞虱生长发育和繁殖的作用机制提供理论和实验依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR对褐飞虱5个miRNA(miR-1a-3p, miR-71-3p, miR-184-3p, miR-190-5p和miR-281-5p)进行表达验证。结合Sanger测序验证5个miRNA。利用qRT-PCR检测这5个miRNA在褐飞虱不同发育阶段(卵、 1-5龄若虫和雌雄成虫)、 1-5日龄雌成虫和雌成虫组织(头、胸、腹、足、翅、中肠、马氏管和卵巢)中的表达量。通过注射miRNA类似物agomir和抑制剂antagomir对褐飞虱雌成虫这5个miRNA分别进行过表达和抑制分析。【结果】Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果显示miR-1a-3p, miR-71-3p, miR-184-3p, miR-190-5p和miR-281-5p在褐飞虱体内真实存在和表达。发育表达谱分析发现，miR-1a-3p和miR-71-3p在褐飞虱整个发育阶段均有不同程度的表达，且分别在雄成虫和2龄若虫中高表达；miR-184-3p和miR-281-5p在褐飞虱雌雄成虫中表达量最高，在卵和若虫中表达量较低，且在卵和若虫间的表达量无显著差异；miR-190-5p在卵中表达量显著高于其他发育阶段的。miR-1a-3p的表达量在雌成虫4日龄时显著降低；miR-71-3p和miR-184-3p的表达量在雌成虫3日龄时达到最高；miR-190-5p和miR-281-5p在雌成虫1日龄时的表达量较高，在2-4日龄时的表达量显著下降。组织表达谱分析发现，miR-1a-3p在足部和卵巢中显著高表达；miR-71-3p主要在雌成虫卵巢特异性地高表达；miR-184-3p在中肠中表达量最高，其次是在卵巢中的表达量；miR-190-5p和miR-281-5p均在翅中表达量最高，其次是在头和胸中(miR-190-5p)以及中肠和卵巢中(miR-281-5p)。注射miRNA类似物后，5个miRNA的表达量均比阴性对照显著上调；注射miRNA抑制剂后，除miR-281-5p表达量比阴性对照显著上调外，其余4个miRNA的表达量均比阴性对照显著下调。【结论】这5个miRNA可能在褐飞虱生长发育和繁殖中起调控作用，研究结果为后续开展褐飞虱miRNA功能研究提供了基因参考和基础前提。

摘要: 【目的】载脂蛋白(apolipoprotein, apoLp)在动物实现其各项生理功能中发挥着重要作用，但如何影响稻飞虱生长发育等尚未见报道。本研究旨在明确载脂蛋白apoLp在褐飞虱Nilaparvata lugens取食、存活和繁殖中的作用。【方法】基于褐飞虱基因组获得载脂蛋白编码基因NlapoLp全长开放阅读框(ORF)序列，并分析其蛋白序列；使用邻接法将NlapoLp与其他昆虫物种的同源序列进行聚类分析；利用RT-qPCR检测NlapoLp在褐飞虱不同发育阶段(卵、1-5龄若虫以及刚羽化的短翅型雌雄成虫)、短翅型雌成虫不同组织(去除唾液腺的头部、唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢)中的表达量；通过对褐飞虱3龄若虫显微注射dsNlapoLp进行RNAi,利用RT-qPCR检测RNAi后NlapoLp的表达量，之后调查不同发育阶段虫体RNAi后褐飞虱在寄主水稻上的单雌蜜露分泌量、若虫存活率和单雌产卵量。【结果】序列特征分析发现NlapoLp有1个信号肽及5个保守结构域，但无跨膜结构域。系统进化树显示褐飞虱NlapoLp与灰飞虱Laodelphax striatellus LsapoLp和白背飞虱Sogatella furcifera SfapoLp的进化关系最近，然后与其他半翅目昆虫紫苑叶蝉Macrosteles quadrilineatus、烟粉虱Bemisia tabaci和茶翅蝽Halyomorpha halys的apoLp聚为一支，表现出较近的亲缘关系。RT-qPCR结果显示，NlapoLp在褐飞虱各个发育阶段均表达，在短翅型雌成虫中的表达量较高；在短翅型雌成虫中肠、脂肪体和唾液腺中高表达，在其他组织中低表达。对褐飞虱显微注射dsNlapoLp可以显著降低NlapoLp的表达，经RNAi后褐飞虱在寄主水稻上的单雌蜜露分泌量、若虫存活率和单雌产卵量均比对照组(注射dsGFP)的显著降低。【结论】载脂蛋白基因NlapoLp在褐飞虱各发育阶段和短翅型雌成虫各组织均表达，经RNAi沉默NlapoLp可显著影响褐飞虱的正常的取食、生长发育和繁殖。研究结果为深入探究载脂蛋白在昆虫致害水稻中的作用机制奠定了基础，并提供了害虫高效防控的关键靶标。

摘要: 【目的】探究褐飞虱Nilaparvata lugens和白背飞虱Sogatella furcifera的种间互作是否会导致其共生细菌的变化。【方法】分别对褐飞虱和白背飞虱进行单独饲养或混合饲养，并基于16S rRNA基因测序，分析不同饲养褐飞虱和白背飞虱种群共生细菌的多样性。【结果】混合饲养的与单独饲养的相比，褐飞虱和白背飞虱的共生菌群落结构均发生明显变化且具有趋同现象；混合饲养的褐飞虱共生细菌多样性比单独饲养的显著增加；褐飞虱中的133个扩增子序列变异(amplicon sequence variants, ASVs)和白背飞虱中的143个ASVs被定义为潜在的水平转移物种。【结论】褐飞虱和白背飞虱的种间互作改变了其共生细菌群落，研究结果为深入研究基于共生细菌的稻飞虱种间互作提供了新视角。

摘要: 昆虫翅多型作为生物可塑性发育的典型代表，是昆虫对复杂多变环境适应进化的结果。褐飞虱Nilaparvata lugens是一种典型的翅多型昆虫，若虫可发育成短翅型或长翅型成虫，后者的远距离迁飞特性造成褐飞虱在亚洲稻区大面积为害。20世纪60年代以来，前人针对褐飞虱翅多型的发生机理进行了大量研究，发现种群密度、寄主植物质量、温度和光周期等诸多环境因子以及保幼激素均能够影响翅型比例。近20年来，得益于基因组学、 RNAi和基因编辑等生物技术的发展，褐飞虱翅型分化的分子机制研究取得了突破性进展，发现了褐飞虱翅型分化的开关基因FoxO,沉默或敲除FoxO会导致飞虱发育为长翅型；而胰岛素信号通路能够磷酸化FoxO抑制其进入细胞核，从而参与翅型分化调控；锌指转录因子Zfh1能够以启动子结合的方式调节FoxO的转录，与胰岛素信号通路平行调控翅型分化；另一个锌指转录因子Rotund能够与FoxO互作共同调控褐飞虱翅多型。此外，性别决定基因Transformer-2和c-Jun氨基末端激酶通路等也能够影响翅型分化，表明褐飞虱的翅型分化存在多样化的分子调控机制。鉴于半翅目不同亚目间的翅多型机制均有所不同，对褐飞虱翅型分化机制的解析远不足以阐明半翅目乃至整个昆虫纲的翅多型机制，但其研究成果能够引领未来对昆虫翅多型机制的探索研究，并加深人们对昆虫翅及组织可塑性发育与进化的理解。

摘要: 【目的】评估甲维盐和阿维菌素两种药剂对褐飞虱Nilaparvata lugens繁殖力及其寄生性天敌稻虱缨小蜂Anagrus nilaparvatae的影响，探明两种药剂引起褐飞虱田间再猖獗的原因。【方法】田间调查了使用5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（甲维盐）微乳剂（microemulsion, ME）(用量225 mL/hm²)和5%阿维菌素悬浮剂（suspension concentrate, SC）(用量240 mL/hm²)后对田间褐飞虱虫口密度和稻虱缨小蜂成蜂寄生率的影响；室内试验采用稻茎浸渍法测定甲维盐和阿维菌素对褐飞虱4龄若虫的毒力以及不同浓度(LC₁₅, LC₃₀, LC₅₀和LC₇₅)甲维盐和阿维菌素对褐飞虱繁殖力及稻虱缨小蜂成蜂存活和寄生能力的影响，同时采用玻璃管药膜法测定了这两种药剂对稻虱缨小蜂成蜂的毒力，评价了其风险级别。【结果】田间调查结果显示，施用5%甲维盐ME或5%阿维菌素SC显著增加了田间褐飞虱虫口密度，显著降低了稻虱缨小蜂成蜂田间寄生率。室内生物测定结果显示甲维盐和阿维菌素对褐飞虱4龄若虫的LC₅₀值分别为1.20和2.03 mg/L,各浓度(LC₁₅～LC₇₅)甲维盐和中低致死浓度(LC₁₅～LC₅₀)阿维菌素处理后的褐飞虱成虫单雌产卵量均显著高于对照。甲维盐和阿维菌素对稻虱缨小蜂成蜂的LC₅₀值分别为0.0145和0.0205 mg/L,田间用量的安全系数分别为4.52×10^-4～9.05×10^-4和8.52×10^-4～14.22×10^-4,均为极高风险性药剂。【结论】甲维盐和阿维菌素会引起田间褐飞虱的再猖獗，主要有两方面的原因，一是刺激褐飞虱雌成虫产卵，二是作为稻虱缨小蜂的高风险药剂，极大地削弱了该蜂对褐飞虱的控害作用。因此，应减少两种药剂在稻田的使用，避免导致褐飞虱的再猖獗。