摘要: 将人胚食管胃移植于裸鼠皮下,期望建立一个研究食管胃部疾病的实验模型,人胚食管全层和粘膜层移植皮下均可成活(16/16),且均呈囊状生长,通过14个月的观察,从光镜、电镜、免疫组化、组织化学染色等方面分析,人胚食管在裸鼠体内的发育基本上与正常发育类似,且保持正常食管的基本组织结构和功能。人胚胃体部、窦部全层及体部粘膜皮下移植均没有成活(0/10),但窦部粘膜全部成活(12/12),移植片状粘膜也呈囊状生长。通过14个月的连续观察,基本保持窦部粘膜的组织结构和功能,通过腺体和CEA的变化,说明胚胃发育趋向成熟。研究中还探索了体外培养后再行移植,发现食管粘膜和窦部粘膜均可成活,且组织结构和功能与直接移植没有明显区别,为实验提供了方便。此外,为了达到长期移植的目的,而不受裸鼠寿命的限制,进行了移植物裸鼠间再移植,也可成活,且保持结构功能不变。

摘要: 移植前组织培养能延长移植物在终宿主体内的存活时间,目前较普遍的是采用组织液培养,但这种培养方法有许多缺点:培养环境难以稳定,培养液易受污染,移植物易交性坏死,因此,有必要寻找一更可靠的培养方法。裸鼠是一种无胸腺鼠,没有T淋巴细胞,对异种移植物不排斥,近年广泛地被用于肿瘤学及免疫学研究,但应用于器官移植尚不多见。 Sollinger等人发现成人甲状旁腺(PTG)在裸鼠体内培养120天,PTG结构完好,但作为较理想的供体胎儿PTG能否在裸鼠体内存活尚无人知。本实验将胎儿PTG 23块分别在裸鼠肾包膜下培养10—30天,通过光镜及电镜观察,发现PTG结构完整,无变性坏死,无淋巴细胞浸润。应用裸鼠体内培养14天的胎儿PTG行临床移植治疗甲状旁腺功能低下症三例,移植疗效良好,证明经裸鼠体内培养14天的胎儿PTG仍可发挥较好的功能。另外,发现一例甲状旁腺瘤在裸鼠体内培养42天,其结构完整,无淋巴细胞浸润,与培养前的新鲜组织无明显差别。我们认为裸鼠可作为PTG移植物的一种理想培养工具,为移植体内培养开辟了一个可靠的新途径。

摘要: 裸鼠因胸腺先天发育不良、T细胞免疫功能缺损而成为移植异种肿瘤的理想动物模型。然而,裸鼠c型RNA病毒有被移植瘤活化的可能,国外已发现了几十例。从1981年起,我们对10余株长期传代的裸鼠移植瘤模型进行了比较系统的电镜检测,先后在大鼠BERH-2肝癌移植瘤（RL-1）、人肺鳞癌移植瘤（LSX-83）以及人肝癌移植瘤（LTNM₄）三株裸鼠模型中检出c型RNA病毒,进而对它们的活化,侵染机理进行了探讨,现报告如下。一般认为,裸鼠内源性c型RNA病毒在活化初期仅在包围移植瘤的基质中显现,而后2—3代,才侵染进入移植瘤的结缔组织、瘤细胞的间隙及其胞浆内。我们在RL-1中所见基本与之相符,但c型病毒的侵染范围似更大——瘤细胞的核周隙萌生芽孢以及毛细血管腔出现病毒颗粒,以往未见有报道。LTNM₄株的瘤细胞质膜上病毒芽孢多见,但胞浆内却查无病毒颗粒;LSX-83株从40代起,连续l5代c型病毒仅局限于瘤细胞的间隙。上述种种,提示裸鼠c型RNA病毒活化侵染过程的复杂性。 c型RNA病毒对移植瘤的侵染导致移植瘤生物学特性的改变。RL-1被侵染后,瘤细胞的间隙和内质网小池出现异常致密的有形物质;移植瘤生长缓慢;瘤组织回种大鼠皮下不能成活,而传代早期能生长。对LSX-83的侵染影响表现为移植瘤呈分化升级的趋向;瘤细胞核仁出现典型的核仁微分离。LTNM₄株的主要改变是暗细胞消失;线粒体内嵴有较多囊泡。长期传代的裸鼠异种移植瘤,其形态学特征会出现某些变化,但较c型病毒的侵染影响则小得多。内源性,c型病毒的基因组通常整合于宿主的染色体中,其潘化、侵染的机理同前尚不太清楚。订人认为,功能性肿瘤产生的蛋白质类活性物质可能对c型病毒有较强的诱导作用。RL-1与LTNM。株均乃高AFP含量的移植肝癌,c型病毒的激活可能与AFP有夫。至于淆化的e型病毒较长时期滞留在LSX-83瘤细咆的间隙,推测LSX-83瘤细胞表面可能缺乏c型病毒受体抑或具有某种抵御机制。三株裸鼠异种侈植瘤中查见c型病毒均在连续传代40代后。对于长期传代裸鼠肿瘤模型的病毒检测是鉴定模型质量的必要手段。

摘要: 建立了一株裸鼠淋巴道转移的LMLM瘤系,通过体外培养,建立了稳定的、可长期传代的LMLM癌细胞株,经染色体核型、LDH同功酶染色和Southern blotting分析,确定了LMLM癌的小鼠来源,并通过一系列抗体免疫病理鉴定,进一步确定LMLM是上皮组织来源的小鼠自发性肿瘤。裸鼠自发性皮下肿瘤,经体内皮下接种传代,取转移灶瘤块进行原代培养,得到稳定的可传代的细胞株,形态小而圆,大小一致,贴壁生长,每周传两代,群体细胞倍增时间48小时,经数月的体外传代培养,细胞形态及传代特性无明显变异。体外培养的LMLM癌细胞按常规方法制备染色体标本,可见典型的小鼠“V”形染色体,染色体数范围为36—59,平均数为40.76,有52％细胞染色体数为40条。LMLM癌原位灶及腋下淋巴结转移灶的LDH同功酶电泳行为完全相同,证实淋巴结转移癌细胞确实来源于原位肿瘤的转移,以小鼠肾脏的LDH同功酶谱作为对照,LMLM癌以LDHs为主,而与人小细胞肺癌NCI-H₁28的比较,二者LDH的电泳行为完全不同,推论LMLM癌和H₁28是两种来源无关的癌系。进一步用Soushern blotting方法鉴别LMLM癌的种系来源,人小细胞肺癌H₁28在放射自显影中和人DNA探针呈强阳性杂交,并不受小鼠DNA预杂交影响,而LMLM原位灶和转移灶均不能和人DNA探针杂交。用人DNA预杂交,小鼠肺DNA作为探针,LMLM原位灶和转移灶呈强杂交,人H₁28不能与之杂交,这从DNA水平证明,LMLM是小鼠来源的肿瘤。用一系列抗T、B淋巴细胞抗体,抗上皮细胞标志物抗体,抗间叶组织标志物抗体及抗神经内分泌标志物抗体进行免疫组化综合比较分析,结果为LMLM与抗淋巴细胞抗体、抗神经内分泌标志物抗体和抗间叶组织标志物抗体均呈阴性反应,而与部分抗上皮细胞标志物抗体EMA,Keratin反应阳性,故可排除淋巴系统肿瘤可能,不支持小细胞肺癌类的神经内分泌肿瘤,而是一种上皮来源的肿瘤。本实验通过染色体核型、LDH同功酶谱分析及Southern blotting杂交都较肯定地鉴别了LMLM癌的种系来源,并相互验证了实验结果的可靠性,并通过免疫组化鉴定提示该癌为上皮组织来源,LMLM癌的建立和鉴定为肿瘤转移机制研究和肿瘤转移的诊断、治疗提供了一个较好的动物肿瘤转移模型。

摘要: 作者从一窝白色ＩＣＲ远交系小鼠仔鼠群中发现突变裸鼠，采用回交一互交（ｂａｃｋ－ｉｎｔｅｒｃｒｏｓｓ）导入法，将“ｎｕ”基因保留下来，随后用隔离器饲养的ＩＣＲ小鼠为代乳鼠，通过剖腹取胎净化该种群，微生物学检查其主要项目达到ＳＰＦ级标准。术后动物饲养于洁净层流架中，￣（６０）Ｃｏ灭菌饲料，酸化水、鼠盒、垫料均高压灭菌，以纯合雄鼠（ｎｕ／ｎｕ）与杂合雌鼠（ｎｕ／＋）１：１非近亲繁殖，扩大了种群，定名ＩＣＲ／ＰＭＵ－ｎｕ裸鼠。与此同时，对突变裸鼠进行了免疫生物学检查，剖检１０余只不同鼠龄裸鼠，未见胸腺。观察７只突变棵鼠胸腺、脾及淋巴结的淋巴细胞转化实验，计算刺激指数，胸腺０．７１±０．５０、脾１．６０±０．６４、淋巴结０．８５±０．１３，三项均为ＳＩ＜２，证明裸鼠缺少Ｔ细胞，对刀豆素（ＣｏｎＡ）不起反应，而Ｂ淋巴细胞膜表面兔疫球蛋白（Ｓｍｌｇ￣＋）检查，与对照组无显著差异，显示Ｂ细胞正常。ＩＣＲ／ＰＭＵ－ｎｕ裸鼠用于动物实验，取得如下结果：裸鼠皮下肿瘤异种移植的成瘤结果与成瘤率分别为：人膀胱癌８／１０（８０％）、人胃癌２／２（１００％）、人结肠粘液腺癌２／２（１００％）、人肺巨细胞癌２／２（１００％）、人前列腺癌２