摘要: 本文初步探究不同浓度家蝇幼虫抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖的影响。采用诱导、研磨、离心、C18固相萃取等方法制备家蝇幼虫抗菌肽混合物,然后处理传代期的FBL-3细胞,调整浓度为2.25×106/m L并通过尾静脉注射C57BL/6小鼠,建立红白血病动物模型。待肿瘤生长较大时,处死并剥离肿瘤,再通过研磨、裂红液裂解、获取原代肿瘤细胞并培养。将抗菌肽混合物调整为不同浓度作用于传代期的FBL-3原代细胞,之后经倒置显微镜观察照相,台盼蓝染色试验计算死亡率、CCK-8试剂盒做细胞毒性检测。结果显示抗菌肽混合物浓度为250～350μg/m L作用FBL-3原代细胞时,细胞碎片大量增多,死亡率增高,细胞毒性变大。初步证明了抗菌肽混合物在250～350μg/m L抑制细胞增殖效果明显,在300μg/m L浓度下抑制作用最强,本研究结果可作为动物模型体内实验的参考。

摘要: 将家蝇三龄幼虫抗菌肽粗提物利用反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)进行分离纯化,得到8种与对照组有差异的蛋白分别命名为I1、I2、I3、I4、G1、G2、G3、G4组。通过CCK-8试剂盒检测发现,其中有4种蛋白及粗提物(E0组)对sup-b15细胞有增殖抑制作用,生存率均值分别为I1:0.714、I2:0.785、I4:0.641、G2:0.686、E0:0.561。采用流式细胞仪检测其诱导凋亡的效果,其凋亡率均值分别为I1:16.73、I2:9.79、I4:18.60、G2:11.85、E0:35.94。对比发现,粗提物(E0)对sup-b15细胞的抑制率明显高于纯化物,证明粗提物较纯化物对肿瘤细胞抑杀作用更为明显,间接的说明各种纯化蛋白之间具有某些协同作用。

摘要: 选取成蝇较易出现的公园和居民区环境类型,采用腐鱼笼诱法分别于2002与2013年对上海中心城区世博建设前后蝇类群落构成和季节消长状况进行监测并对比分析。结果显示,与2002年相比,2013年居民区环境蝇密度显著下降,捕获的蝇种类总数稍有上升;最优势蝇种由2002年的丝光绿蝇转变为2013年的大头金蝇(当年构成比分别为46.06%和20.50%),亮绿蝇、元厕蝇的密度及构成比较2002年显著上升。2002与2013年成蝇高峰分别均出现于6月份,2013年夏季气温高热造成7月份出现一个波动较大的低谷;丝光绿蝇在不同年代的季节分布差异较明显,其他蝇种分布趋势前后较吻合。据此推论上海城区蝇类侵害以丽蝇科为主,不同监测环境差异较大;城区卫生环境的改善对减少住区蝇滋生起了重要作用,但人口密度高、部分老城区环境复杂、各行业所产生垃圾较多而容易造成蝇类滋生侵害的状况依然存在,蝇类防控措施应针对金蝇和绿蝇等优势蝇种开展,防控工作任重而道远。

摘要: 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法,分析家蝇抗菌肽defensin对人肝癌细胞HepG2体外生长增殖与凋亡的影响,用倒置光学显微镜检测defensin对人肝癌细胞HepG2和人正常心肌细胞H9C2生长增殖情况的影响,并采用流式细胞术检测defensin对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响。结果显示,家蝇抗菌肽defensin对人肝癌细胞HepG2的生长有抑制作用,对人正常心肌细胞H9C2无抑制作用。通过显微镜观察HepG2细胞凋亡的形态变化,MTT检测发现defensin对肿瘤细胞的增殖抑制率呈剂量反应关系和时间反应关系。defensin能诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡,并且影响人肝癌细胞HepG2的细胞周期。家蝇抗菌肽defensin对人肝癌细胞HepG2具有增殖抑制作用及凋亡作用,对正常人心肌细胞H9C2基本无抑制作用。

摘要: 乙酰胆碱酯酶(AchE)是有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的主要作用靶标,该酶氨基酸残基的替换可以降低AchE对这两类杀虫剂的敏感性,从而使昆虫表现出对这两类杀虫剂的抗性。至今在抗性家蝇AchE中鉴定出多个不同位点的点突变,以G262A/V和F327Y突变最为普遍。262和327两位点上的氨基酸残基靠近AchE的活性位点三联体,G262A/V和F327Y替换可以通过改变起催化作用的丝氨酸的定位或通过降低酰基-结合袋的空间来改变酶的活性,在抗性进化过程中起着重要的作用。家蝇AchE点突变的效用是累加,多突变组合往往导致更高水平且更广谱的抗性。从不同抗性家蝇种群中检测出相同的AchE遗传突变,表明这一抗性进化机制的保守性;多种抗性等位基因共存于家蝇种群中,反映了杀虫剂使用的多重性。家蝇乙酰胆碱酯酶抗性等位基因种类分布因地区而不同,但也有重叠。家蝇种群表现出抗性等位基因的演替,推测是杀虫药剂的轮替使用的结果。