摘要: 【目的】miRNA在昆虫的生长、发育和代谢等诸多生物学进程中发挥关键调控作用。本研究对ace-miR-3759-y进行表达和序列验证，并通过过表达与敲降ace-miR-3759-y探究其对中华蜜蜂Apis cerana cerana幼虫靶基因表达及重量的影响，以期为ace-miR-3759-y调控幼虫发育的分子机理研究提供依据。【方法】通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证ace-miR-3759-y的表达和序列。通过饲喂模拟物(Mimic)和抑制物(Inhibitor)对中华蜜蜂幼虫血淋巴中的ace-miR-3759-y进行过表达和敲降。利用RT-qPCR检测ace-miR-3759-y的过表达和敲降效果及靶基因相对表达量。利用电子天平对幼虫进行称重。【结果】ace-miR-3759-y在中华蜜蜂幼虫肠道和血淋巴中真实存在和表达。相较于Mimic-NC组，ace-miR-3759-y在Mimic-ace-miR-3759-y组4日龄和5日龄幼虫血淋巴中显著上调（P<0.05），在6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）。相较于Inhibitor-NC组，Inhibitor-ace-miR-3759-y组4、5和6日龄幼虫血淋巴中均显著下调表达（P<0.05）。过表达ace-miR-3759-y后，CIC在4、5和6日龄幼虫血淋巴中的表达量均显著下调（P<0.05）;CKI在4日龄和5日龄幼虫血淋巴中的表达量显著下调（P<0.05），在6日龄幼虫血淋巴中下调表达但组间差异不显著（P>0.05）。敲降ace-miR-3759-y后，CIC在5日龄幼虫血淋巴中显著上调表达（P<0.05），在4日龄和6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）;CKI在4日龄幼虫血淋巴中显著上调表达（P<0.05），在5日龄和6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）。此外，与Mimic-NC组相比，Mimic-miR-3759-y组的6日龄幼虫的体重下降，但组间差异不显著（P>0.05）；与Inhibitor-NC组相比，Inhibitor-miR-3759-y组的6日龄幼虫体重上升，但组间差异不显著（P>0.05）。【结论】通过饲喂Mimic和Inhibitor的方法在中华蜜蜂幼虫血淋巴中实现了ace-miR-3759-y的有效过表达及敲降，ace-miR-3759-y负调控CIC和CKI的表达，ace-miR-3759-y对幼虫体重无显著影响。

摘要: 【目的】为探讨东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae感染蜜蜂后的形态学影响、各组织的感染情况及对中肠组织蛋白质的影响，初步探索蜜蜂自身免疫应答调控。【方法】分别提取中华蜜蜂/意大利蜜蜂实验组与对照组的蜜蜂中肠组织总蛋白，通过SDS-PAGE电泳技术筛选差异蛋白条带，LC-MS/MS质谱分析技术鉴定差异蛋白质，利用半定量和荧光定量RT-PCR技术验证筛选出的差异蛋白质。【结果】蜜蜂受东方蜜蜂微孢子虫感染后，中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera Ligustica的体重均未出现显著性差异，而二者受感染的中肠组织形态变化均较为明显。其次，对意大利蜜蜂而言，被筛选出的两条较明显的中肠差异表达蛋白质条带经质谱分析共鉴定到35个候选蛋白质。筛选出的两条中华蜜蜂中肠差异蛋白条带经质谱分析技术共鉴定到11个候选蛋白质。经验证，在感染N.ceranae后的第4天，筛选出的意大利蜜蜂精氨酸激酶（AK）和甘油三磷酸脱氢酶（GPDH）及中华蜜蜂硫氧还原蛋白还原酶（TrxR）及精氨酸激酶（AK）的蛋白表达量分别是对照组的2.02倍、2.21倍、1.72倍和1.88倍，均呈现上调表达，与蛋白质差异表达趋势一致。【结论】在东方蜜蜂微孢子虫感染意大利蜜蜂或中华蜜蜂后，筛选获得差异表达的蛋白质条带并进行鉴定。其中与蜜蜂中肠组织基本代谢、免疫应答、氧化应激与能量代谢相关蛋白质（如意大利蜜蜂的AK和GPDH、中华蜜蜂的AK和TrxR）的表达量被显著上调，暗示这些差异蛋白可能参与了蜜蜂中肠组织的免疫防御。本研究为深入探讨蜜蜂中肠对蜜蜂微孢子虫的免疫与代谢应答方式提供了丰富的数据基础。

摘要: 【目的】为了探究蜜蜂信息素对中华蜜蜂Apis cerana cerana的生产及繁殖性能的影响。【方法】以蜂蜡为载体，选择4种蜂王上颚腺信息素（9-ODA:9-HDA:HOB:HVA）与蜜蜂幼虫饥饿信息素（β-罗勒烯）按照一定比例组配了4种强蜂素挂片（T1-1组、T1-2组、T2-1组、T2-2组），同时设置一个纯蜂蜡挂片作为空白对照组（CK组）。将2种组配强蜂素（T1-1、T1-2）分别置于特殊密闭容器瓶中，15、30和45 d后用捕集针抽取密闭容器瓶气体，利用气相-质谱联用系统测定2种组配强蜂素（T1-1、T1-2）中β-罗勒烯挥发含量。并系统研究了4种组配强蜂素对无王群急造王台以及对有王群的蜂蜜产量、群势和封盖子数影响。【结果】在15、30和45 d时，2种组配强蜂素中β-罗勒烯挥发量差异不显著（P> 0.05），即2种组配强蜂素中β-罗勒烯都能稳定释放；与对照组相比，T1-2组封盖王台出现时间显著延迟（P<0.05），推迟时间2.17d，但4个实验组间出现封盖王台出现时间差异不显著（P>0.05）;T1-1组蜂蜜产量和封盖子数显著高于对照组（P <0.05），蜂蜜产量和封盖子数量分别30.18%和30.00%;T1-2组蜂群群势显著强于对照组（P <0.05），提高群势25.15%;4个实验组间蜂蜜产量、封盖子数和蜂群群势都差异不显著（P> 0.05）。【结论】不同组配的蜜蜂信息素对中华蜜蜂生产及繁殖性能都有积极作用，为进一步在养蜂生产中推广蜜蜂信息素产品提供了理论支撑。

摘要: 【目的】杀虫剂甲氰菊酯广泛应用于农业生产中，但有关该杀虫剂对蜜蜂健康影响的研究较少。本研究旨在探究甲氰菊酯对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica生存、取食、免疫和解毒相关基因表达以及肠道菌群的影响。【方法】利用亚致死浓度的甲氰菊酯饲喂意大利蜜蜂7 d后，统计各组意大利蜜蜂的生存率和取食量；采用荧光定量PCR技术检测蜜蜂解毒和免疫相关基因表达的变化；利用16SrDNA测序技术检测蜜蜂肠道菌群组成结构的变化。【结果】甲氰菊酯能显著降低蜜蜂的生存率和糖水取食量（P<0.05）；甲氰菊酯显著抑制了蜜蜂Hymenoptaecin、Apidaecin和Cyp9q1的表达（P<0.05）,5 mg/L剂量的甲氰菊酯显著诱导了Defensin的上调表达（P<0.05）。与对照相比，5 mg/L和1 mg/L剂量的甲氰菊酯对Abaecin表达的影响虽无显著性差异，但是5 mg/L处理组Abaecin的表达水平显著高于1 mg/L处理组的（P<0.05）；甲氰菊酯对意大利蜜蜂肠道菌群的Alpha多样性和Beta多样性无显著影响，但对特定肠道菌的丰度造成了影响。【结论】甲氰菊酯的曝露可能对意大利蜜蜂的免疫、解毒系统以及肠道菌群的组成产生了一定的影响。

摘要: 狄斯瓦螨Varroa destructor是严重危害西方蜜蜂Apis mellifera的主要寄生螨之一，由于杀螨剂长期大量、单一和连续使用，狄斯瓦螨对杀螨剂的抗性发展日趋严重，探明狄斯瓦螨抗性机制对于治理狄斯瓦螨具有重要意义。狄斯瓦螨抗性形成受遗传因素、人为操作因素及其他生态因素的影响，其抗性机制与化学杀螨剂的种类有关，目前研究较多的是靶标不敏感性机制和解毒代谢增强机制，对拟除虫菊酯类杀螨剂抗性机制研究较为透彻，而对有机磷类和甲咪类杀螨剂抗性机制研究有限。本文基于文献，阐述了狄斯瓦螨对拟除虫菊酯类、有机磷类和甲咪类杀螨剂抗性机制的最新研究进展，讨论了抗性治理的最新研究成果及该领域未来的研究方向，以期为狄斯瓦螨有效治理、杀螨剂的安全有效使用及新型杀螨剂开发等研究提供参考。