摘要: 【目的】本研究旨在探究酰基辅酶A结合蛋白（ACBP）和胺类信号分子5-羟色胺（5-HT）对意大利蜜蜂上颚腺分泌10-羟基-2癸烯酸（10-HDA）的影响。【方法】以饲喂非特异性dsRNA和糖水为对照，通过饲喂acbp特异性的双链RNA(dsRNA)敲低工蜂acbp的表达；对以上处理组和对照组分别进行上颚腺腺体形态观察，转录组测序和筛选差异基因（P-adjust<0.05）；对差异基因进行GO和KEGG富集分析；结合脂肪酸代谢和色氨酸代谢的关键基因表达检测结果以及上颚腺10-HDA含量的检测结果，系统研究ACBP和5-HT对工蜂上颚腺10-HDA合成的影响。【结果】acbp敲低导致上颚腺10-HDA含量显著下降约20%；转录组学比较分析结果发现488个差异基因，主要参与脂肪酸降解、PPAR信号通路和多种氨基酸代谢通路。有趣的是，色氨酸代谢通路的amd,aldh等差异基因的变化可能导致5-HT的积累。然后通过外源5-HT饲喂哺育蜂，发现上颚腺的10-HDA的产量显著下降约30%。外源5-HT引起上颚腺的5-HT1、5-HT2α、5-HT2β受体编码基因上调表达，并显著抑制编码脂肪酸跨膜运输蛋白的线粒体cpt2和过氧化物酶体abcd3的表达。【结论】ACBP主要通过脂肪酸降解和氨基酸代谢两方面影响上颚腺不饱和脂肪酸的合成，并与色胺类信号分子5-HT的正常代谢有关；5-HT抑制上颚腺合成10-HDA，并且显著影响细胞内肉碱棕榈酰转移酶（CPTs）。

摘要: 【目的】本研究对东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的γ-微管蛋白（γ-tubulin）基因γ-tubulin进行表达验证，明确γ-tubulin的分子特性，并对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的γ-tubulin蛋白进行保守基序和系统进化分析，以期丰富东方蜜蜂微孢子虫的γ-tubulin信息，并为深入开展γ-tubulin的功能研究提供基础。【方法】通过PCR验证γ-tubulin的表达。通过Expasy网站上的相关软件预测和分析γ-tubulin的理化性质、信号肽、磷酸化位点、二级结构和三级结构。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种γ-tubulin的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的γ-tubulin进行氨基酸序列多重比对，并采用邻接法构建基于γ-tubulin的系统进化树。【结果】γ-tubulin在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实表达。γ-tubulin编码433个氨基酸，分子量约为49.11 kD，分子式为C_(2186)H_(3422)N_(582)O_(663)S_(20)，脂溶系数为86.65，等电点为5.75;γ-tubulin包含29个丝氨酸酸化位点，5个酪氨酸酸化位点及14个苏氨酸磷酸化位点，包含191个α-螺旋，66条延长链，17个β-转角及159个无规则卷曲。另外，γ-tubulin同时定位于细胞核、细胞质和线粒体。东方蜜蜂微孢子虫与蜜蜂微孢子虫Nosema apis等9个物种的γ-tubulin均含有5个相同的保守基序。系统进化分析结果显示，东方蜜蜂微孢子虫与蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫Nosema bombycis、兔脑炎微孢子虫Encephalitozoon cuniculi、海伦脑炎微孢子虫Encephalitozoon hellem、角膜条孢虫Vittaforma corneae的γ-tubulin蛋白聚为一个大支，而小孢根霉Rhizopus microsporus与奇孢根霉Rhizopus azygosporus的γ-tubulin聚为另一个大支；东方蜜蜂微孢子虫及其姐妹种蜜蜂微孢子虫的γ-tubulin进化距离最近。【结论】证实了东方蜜蜂微孢子虫孢子中γ-tubulin的真实表达，明确了γ-tubulin的分子特性，并揭示东方蜜蜂微孢子虫与蜜蜂微孢子虫的γ-tubulin蛋白亲缘关系最近，γ-tubulin蛋白在东方蜜蜂微孢子虫、蜜蜂微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、海伦脑炎微孢子虫及角膜条孢虫中具有较高的保守性。

摘要: 【目的】东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染蜜蜂导致微孢子虫病，但侵染机制未明。本研究拟在前期工作基础上，验证nce-miR-15325的相对表达量及序列信息，并进一步检测nce-miR-15325及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apismelliferaligustica工蜂过程的相对表达量，为进一步探究nce-miR-15325调控侵染的功能和机制提供依据。【方法】利用Stem-loopRT-PCR和Sanger测序对nce-miR-15325进行相对表达量及序列信息验证。利用相关生物信息学软件对nce-miR-15325的靶基因进行信息预测及分析。通过RT-qPCR检测nce-miR-15325及其靶基因的相对表达量。【结果】鉴定到在东方蜜蜂微孢子虫孢子中nce-miR-15325真实存在并表达。预测到nce-miR-15325的11个靶基因，其中分别有3、4、7和4个靶基因可注释到KEGG、GO、Nr和Swissprot数据库。与接种后1 d相比，nce-miR-15325在2 dpi(day post inoculation, dpi)的表达量变化不显著，而在4、6和8 dpi时，相对表达量均显著下调（P<0.05），总体表达趋势呈下调。相较于1 dpi，靶基因NCSS在2、4、6和8 dpi的表达量均显著下调（P<0.05）；类似的，靶基因DTⅢ在2、4、6和8dpi的表达量均显著下调（P<0.05），总体上表现出下降的表达趋势。【结论】证实了东方蜜蜂微孢子虫孢子中nce-miR-15325存在和表达的真实性，明确了在东方蜜蜂微孢子虫侵染过程的nce-miR-15325及其靶基因的动态表达模式，揭示nce-miR-15325通过正调控NCSS和DTⅢ表达潜在调节侵染过程。

摘要: 【目的】中华蜜蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）和东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae都是严重威胁蜜蜂健康的重要病原，本研究旨在探究2种病原顺序感染对中华蜜蜂Apiscerana cerana存活率、营养代谢和免疫的影响。【方法】设置中华蜜蜂取食正常食物、先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫和先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV3个处理，利用PCR检测中华蜜蜂在取食第2天和第4天后体内病原增殖情况；通过RT-qPCR检测中华蜜蜂感染病原后第2天和第4天后体内CSBV数量以及营养代谢基因（ilp1、ilp2、hexamerin70b和hexamerin70c）和免疫应答基因（toll、relish、jra、apidaecin、abaecin、defensin、hymenoptaecin和JAK）的表达情况。【结果】先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂体内孢子量高于先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组，而先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂体内CSBV拷贝数显著高于先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组。先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂营养代谢基因ilp1、ilp2、hexamerin70c和hexamerin70b的表达水平随感染时间延长逐渐呈现下调，而先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组中显著上调。先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组中华蜜峰免疫基因toll和relish表达量呈现先增加后下降，而jra、JAK、apidaecin、abaecin、defensin和hymenoptaecin的表达量显著增加，而先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组中8个免疫基因的表达量均显著增加。【结论】在顺序感染过程中，东方蜜蜂微孢子虫的感染抑制CSBV的增殖，而CSBV的感染则有助于东方蜜蜂微孢子虫的增殖。先喂食CSBV比先喂食东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂营养和生长发育的影响更显著，且更易引起宿主的免疫防御，表明CSBV与东方蜜蜂微孢子虫顺序感染中蜂后引起的免疫应答及营养代谢更为复杂。

摘要: 【目的】复眼作为大多数昆虫最重要的视觉器官，其小眼数量和体积大小一定程度上反映了昆虫视觉能力的强弱。视蛋白作为视觉感知中的功能性分子，在光信号转导过程中具有重要作用，基因的表达受到外源和内源等多种因素的影响。本研究旨在探讨蜂王和工蜂复眼形态发育及视蛋白基因的时间表达模式。【方法】选取3群群势相当的意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica蜂群进行人工育王，采集蜂王与工蜂蛹期各日龄蜂蛹及新蜂样品，采用扫描电镜技术观察蜂王和工蜂复眼的外部形态结构，利用Image J软件测量复眼短长轴、面积、小眼个数、小眼面积和小眼直径；采用实时定量PCR技术检测蜂王和工蜂蛹期紫外光视蛋白基因（UV-sensitiveopsin,UVop）、绿光视蛋白基因（Greenopsin,Lop1）和蓝光视蛋白基因（Blue-sensitive opsin,BLop）3种视蛋白基因的mRNA表达水平。【结果】蜂王和工蜂均是在蛹期末龄（出房前）分化出小眼；出房后，蜂王和工蜂复眼面积均变小（P＜0.001），蜂王复眼短轴（P＜0.05）、面积（P＜0.001）、小眼个数（P＜0.001）均显著小于工蜂，但蜂王单个小眼面积（P＜0.001）、小眼直径（P＜0.001）显著大于工蜂。蜂王和工蜂3种视蛋白基因的m RNA表达水平出房后比出房前显著增加（P＜0.05）；在蜂蛹前期，UVop的mRNA表达水平高于Lop1和BLop的表达水平，蜂王视蛋白基因UVop已经表达工蜂在蛹中后期才表达；在化蛹中后期Lop1mRNA表达水平显著增加并超过UVop和BLop的表达，成为表达量最高的视蛋白。【结论】蜂王小眼个数低于工蜂，推测工蜂视觉能力优于蜂王。蜂王和工蜂视蛋白表达模式存在级型特异性，主要表现在蛹期UVop的mRNA表达水平上。视蛋白的表达模式与体内视觉细胞的发育存在一定的联系，研究结果可为进一步探索意大利蜜蜂蜂王与工蜂的复眼发育规律和感光系统的规律提供一定的理论基础。