摘要: 脂肪体是昆虫体内的一种多功能器官，近似于脊椎动物的肝脏，分布于昆虫腹部、胸部甚至头部腔体中，以腹部脂肪体最为发达。蜜蜂脂肪体有外周脂肪体和围脏脂肪体两种类型，由营养细胞、尿酸盐细胞和绛色细胞组成。同其他昆虫中类似，脂肪体在蜜蜂的生命活动中扮演着重要的角色，其形态和功能随发育阶段、季节和劳动分工的变化而变化。脂肪体结构相对简单，但生理功能非常复杂。脂肪体最主要的功能是能量物质的储存和代谢，其不仅是蜜蜂营养物质(即脂质、碳水化合物和蛋白质)的中央储存库，而且是营养代谢的中间站，具有多种能量和物质相互转换的酶系，承担代谢水的供应并合成嘌呤和嘧啶及许多重要的蛋白质。同时，脂肪体是昆虫发育和行为调控过程中各种激素和营养信号的交换中心，脂肪体激素和营养信号参与调控蜜蜂脂肪体发育、营养物质代谢、生殖及劳动分工。脂肪体兼具能量储存和释放、生物合成和分解、营养感知调节、代谢信号整合、内分泌调节、免疫和解毒、磁场感受、提高抗寒能力、保护体腔内器官等多种功能。鉴于脂肪体的重要作用，蜜蜂脂肪体形态和功能的研究成果可以对昆虫营养信号通路的解析、蜂产品高产良种的选育和蜜蜂病害防治的研究提供参考和思路。

摘要: 【目的】本研究旨在明确ace-miR-3720在中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫肠道发育中的功能，并为进一步探究ace-miR-3720调控肠道发育的分子机理提供理论和实验依据。【方法】根据ace-miR-3720的核苷酸序列设计合成相应的模拟物mimic-miR-3720和抑制物inhibitor-miR-3720,通过饲喂中华蜜蜂工蜂幼虫对ace-miR-3720分别进行过表达和敲减。采用RT-qPCR检测过表达和敲减ace-miR-3720后4-6日龄幼虫肠道内ace-miR-3720及其靶基因CKⅠ,MAPK1和βGBP1的相对表达量；使用分析天平称重过表达和敲减ace-miR-3720后的幼虫肠道重量。【结果】相较于无义模拟物(nonsense mimic, mimic-NC)组，mimic-miR-3720组中ace-miR-3720表达量在中华蜜蜂4和5日龄幼虫肠道中均极显著上调，在6日龄幼虫肠道中显著上调；相较于无义抑制物(nonsense inhibitor, inhibitor-NC)组，inhibitor-miR-3720组中ace-miR-3720表达量在4日龄幼虫肠道中极显著下调，在5和6日龄幼虫肠道中显著下调。ace-miR-3720与基因CKⅠ,MAPK1和βGBP1之间存在潜在靶向关系。与mimic-NC组相比，mimic-miR-3720组中CKⅠ表达量在4和5日龄幼虫肠道中皆极显著下调，在6日龄幼虫肠道中显著下调；MAPK1表达量在4日龄幼虫肠道中显著下调，在5和6日龄幼虫肠道中均极显著下调；βGBP1表达量在4日龄幼虫肠道中显著下调，在5和6日龄幼虫肠道中均极显著下调；此外，4和5日龄幼虫肠道重量均极显著降低，6日龄幼虫肠道重量显著降低。与inhibitor-NC组相比，inhibitor-miR-3720组中CKⅠ表达量在4-6日龄幼虫肠道中皆极显著上调；MAPK1表达量在4日龄幼虫肠道中显著上调，在5和6日龄幼虫肠道中极显著上调；βGBP1表达量在4和6日龄幼虫肠道中显著上调，在5日龄幼虫肠道中极显著上调；此外，4和6日龄幼虫肠道重量显著升高，5日龄幼虫肠道重量极显著升高。【结论】ace-miR-3720在中华蜜蜂工蜂幼虫肠道内真实存在；通过饲喂模拟物和抑制物可对中华蜜蜂工蜂幼虫肠道内分别实现miRNA的有效过表达和敲减；ace-miR-3720可能通过调控CKⅠ,MAPK1和βGBP1的表达影响中华蜜蜂工蜂幼虫肠道重量并参与幼虫肠道发育。

摘要: 【目的】本研究旨在通过饲喂ame-miR-79的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道内的ame-miR-79分别进行过表达和敲减，探究ame-miR-79对幼虫肠道内靶基因表达的调控作用。【方法】通过分子克隆与Sanger测序验证意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内ame-miR-79的序列真实性。通过饲喂mimic-miR-79和inhibitor-miR-79对意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道内的ame-miR-79分别进行过表达和敲减。采用相关生物信息学软件进行ame-miR-79的靶基因预测与分析。通过RT-qPCR检测ame-miR-79的过表达和敲减效果及过表达和敲减ame-miR-79后靶基因的相对表达量。【结果】ame-miR-79在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内真实存在。与无义模拟物(nonsense mimic, mimic-NC)组相比，mimic-miR-79组的4-6日龄幼虫肠道内ame-miR-79的表达量皆极显著上调；与无义抑制物(nonsense inhibitor, inhibitor-NC)组相比，inhibitor-miR-79组的4和5日龄幼虫肠道内ame-miR-79的表达量显著下调，6日龄幼虫肠道内ame-miR-79的表达量极显著下调。ame-miR-79共靶向303个基因，涉及27个GO条目和179条KEGG通路。相较于mimic-NC组，靶基因细胞色素P450基因CYP450在mimic-miR-79组的4和5日龄幼虫肠道内均极显著下调表达，而在6日龄幼虫肠道内上调表达；靶基因fringe糖基化转移酶(fringe glycosyltransferase, FG)基因在4日龄幼虫肠道内下调表达，在5日龄幼虫肠道内显著下调表达，而在6日龄幼虫肠道内上调表达。相较于inhibitor-NC组，CYP450在inhibitor-miR-79组的4日龄幼虫肠道内极显著上调表达，在6日龄幼虫肠道内上调表达，而在5日龄幼虫肠道内下调表达；FG的表达水平在4日龄幼虫肠道内显著上调，在5和6日龄幼虫肠道内极显著上调。【结论】ame-miR-79在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内真实存在；通过饲喂模拟物和抑制物能分别实现意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内ame-miR-79的有效过表达和敲减；ame-miR-79负调控意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内CYP450和FG的表达。

摘要: 【目的】本研究旨在筛选西方蜜蜂Apis mellifera采集蜂上颚腺中高表达基因，为进一步筛选和研究蜜蜂采集行为相关基因提供依据。【方法】基于前期测序的西方蜜蜂5种不同职能工蜂(3日龄工蜂、10日龄哺育蜂、10日龄采集蜂、21日龄哺育蜂和21日龄采集蜂)上颚腺转录组数据，筛选采集蜂上颚腺的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),并对这些DEGs进行GO和KEGG分析；qRT-PCR检测随机选取的8个DEGs在10日龄哺育蜂和10日龄采集蜂上颚腺以及两个关键DEGs(Δ-1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因Amp5cs和细胞色素P450 9e2基因CYP9Q3)在工蜂不同发育时期和采集蜂各组织中的表达量。【结果】筛选到22个DEGs在21日龄采集蜂上颚腺中的表达量显著高于在3日龄工蜂、10日龄哺育蜂和21日龄哺育蜂上颚腺中的表达量，同时在10日龄采集蜂上颚腺中的表达量也显著高于在10日龄哺育蜂上颚腺中的表达量。GO和KEGG富集分析显示这些DEGs主要富集在胆固醇代谢、半乳糖代谢、淀粉和蔗糖代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、细胞凋亡-果蝇、氨基酸生物合成等方面。qRT-PCR结果表明，8个DEGs (LOC100576395,LOC411983,LOC410235,LOC725581,LOC410527,LOC406131,LOC408453和LOC410253)的表达模式与转录组数据的表达模式一致；2个关键DEGs Amp5cs和CYP9Q3在工蜂各发育阶段均有表达，且在采集蜂中表达量最高；Amp5cs在采集蜂腹、胸、上颚腺和触角中高量表达，P450 9e2在采集蜂触角和足中表达量显著高于在其他组织中的。【结论】本研究在减小日龄因素干扰下筛选了西方蜜蜂采集蜂上颚腺中22个高表达的DEGs,这些DEGs可能主要参与采集蜂上颚腺生理发育以及能量供应、外源性物质解毒、花蜜转化等代谢通路，进而影响蜜蜂的采集行为。这些结果为西方蜜蜂上颚腺的功能研究提供理论参考，同时也为采集力强的新品种培育奠定了基础。

摘要: 【目的】本研究旨在分析西方蜜蜂Apis mellifera工蜂蛹中期可能存在的低温应对机制以及低温对中期蛹发育的不利影响。【方法】对西方蜜蜂工蜂8 d封盖子进行低温(20℃)处理96 h(T),以未经低温胁迫的8 d封盖子为对照(CK),通过转录组测序(RNA-seq)并筛选差异基因(differentially expressed genes, DEGs);对DEGs进行GO分类和KEGG通路分析。利用RT-qPCR对随机选取的5个DEGs的表达量进行验证。【结果】西方蜜蜂8 d封盖子低温(20℃)胁迫96 h的DEGs有1 101个；GO分类发现DEGs富集数最多的条目为代谢过程(142个DEGs)和细胞过程(142个DEGs),其次是结合(131个DEGs),催化活性(120个DEGs)和单有机体过程(118个DEGs);KEGG通路分析结果显示，DEGs显著富集于与氧化损伤密切相关的过氧化物酶体通路、D-谷氨酰胺代谢通路、D-谷氨酸代谢通路和谷胱甘肽代谢通路；此外，与激素调控相关的昆虫激素代谢通路、mTOR信号通路和FOXO信号通路上也有DEGs显著富集。随机挑选的5个DEGs的RNA-Seq与RT-qPCR结果一致。【结论】本研究发现低温状态下西方蜜蜂中期蛹主要通过体内激素调控发育进程，使其减速或停止发育以应对低温；低温通过影响其抗氧化酶表达量进而可能积累氧化损伤，从而对羽化后蜜蜂产生影响。本研究结果有助于理解发育阶段温度生态幅狭窄的昆虫对于低温的应对机制及低温对其的不利影响。