摘要: 【目的】miRNA在昆虫的生长、发育和代谢等诸多生物学进程中发挥关键调控作用。本研究对ace-miR-3759-y进行表达和序列验证，并通过过表达与敲降ace-miR-3759-y探究其对中华蜜蜂Apis cerana cerana幼虫靶基因表达及重量的影响，以期为ace-miR-3759-y调控幼虫发育的分子机理研究提供依据。【方法】通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证ace-miR-3759-y的表达和序列。通过饲喂模拟物(Mimic)和抑制物(Inhibitor)对中华蜜蜂幼虫血淋巴中的ace-miR-3759-y进行过表达和敲降。利用RT-qPCR检测ace-miR-3759-y的过表达和敲降效果及靶基因相对表达量。利用电子天平对幼虫进行称重。【结果】ace-miR-3759-y在中华蜜蜂幼虫肠道和血淋巴中真实存在和表达。相较于Mimic-NC组，ace-miR-3759-y在Mimic-ace-miR-3759-y组4日龄和5日龄幼虫血淋巴中显著上调（P<0.05），在6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）。相较于Inhibitor-NC组，Inhibitor-ace-miR-3759-y组4、5和6日龄幼虫血淋巴中均显著下调表达（P<0.05）。过表达ace-miR-3759-y后，CIC在4、5和6日龄幼虫血淋巴中的表达量均显著下调（P<0.05）;CKI在4日龄和5日龄幼虫血淋巴中的表达量显著下调（P<0.05），在6日龄幼虫血淋巴中下调表达但组间差异不显著（P>0.05）。敲降ace-miR-3759-y后，CIC在5日龄幼虫血淋巴中显著上调表达（P<0.05），在4日龄和6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）;CKI在4日龄幼虫血淋巴中显著上调表达（P<0.05），在5日龄和6日龄幼虫血淋巴中上调表达但组间差异不显著（P>0.05）。此外，与Mimic-NC组相比，Mimic-miR-3759-y组的6日龄幼虫的体重下降，但组间差异不显著（P>0.05）；与Inhibitor-NC组相比，Inhibitor-miR-3759-y组的6日龄幼虫体重上升，但组间差异不显著（P>0.05）。【结论】通过饲喂Mimic和Inhibitor的方法在中华蜜蜂幼虫血淋巴中实现了ace-miR-3759-y的有效过表达及敲降，ace-miR-3759-y负调控CIC和CKI的表达，ace-miR-3759-y对幼虫体重无显著影响。

摘要: 【目的】为探讨东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae感染蜜蜂后的形态学影响、各组织的感染情况及对中肠组织蛋白质的影响，初步探索蜜蜂自身免疫应答调控。【方法】分别提取中华蜜蜂/意大利蜜蜂实验组与对照组的蜜蜂中肠组织总蛋白，通过SDS-PAGE电泳技术筛选差异蛋白条带，LC-MS/MS质谱分析技术鉴定差异蛋白质，利用半定量和荧光定量RT-PCR技术验证筛选出的差异蛋白质。【结果】蜜蜂受东方蜜蜂微孢子虫感染后，中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera Ligustica的体重均未出现显著性差异，而二者受感染的中肠组织形态变化均较为明显。其次，对意大利蜜蜂而言，被筛选出的两条较明显的中肠差异表达蛋白质条带经质谱分析共鉴定到35个候选蛋白质。筛选出的两条中华蜜蜂中肠差异蛋白条带经质谱分析技术共鉴定到11个候选蛋白质。经验证，在感染N.ceranae后的第4天，筛选出的意大利蜜蜂精氨酸激酶（AK）和甘油三磷酸脱氢酶（GPDH）及中华蜜蜂硫氧还原蛋白还原酶（TrxR）及精氨酸激酶（AK）的蛋白表达量分别是对照组的2.02倍、2.21倍、1.72倍和1.88倍，均呈现上调表达，与蛋白质差异表达趋势一致。【结论】在东方蜜蜂微孢子虫感染意大利蜜蜂或中华蜜蜂后，筛选获得差异表达的蛋白质条带并进行鉴定。其中与蜜蜂中肠组织基本代谢、免疫应答、氧化应激与能量代谢相关蛋白质（如意大利蜜蜂的AK和GPDH、中华蜜蜂的AK和TrxR）的表达量被显著上调，暗示这些差异蛋白可能参与了蜜蜂中肠组织的免疫防御。本研究为深入探讨蜜蜂中肠对蜜蜂微孢子虫的免疫与代谢应答方式提供了丰富的数据基础。

摘要: 【目的】明确不同冷藏时间对褐带卷蛾茧蜂Bracon adoxophyesi Minamikawa存活、寄生和繁殖的影响，为褐带卷蛾茧蜂的低温保存技术提供理论依据。【方法】在10℃条件下，测定不同冷藏时间（30、45、60、75、90和105 d）对褐带卷蛾茧蜂的存活、寄生、产卵和子代发育的影响。【结果】褐带卷蛾茧蜂成蜂冷藏30 d和45 d时存活率分别为97.35%和82.07%，且两者之间差异不显著；随着冷藏时间的延长，褐带卷蛾茧蜂成蜂的存活率呈降低的趋势，冷藏75 d时，寄生蜂存活率仅为46.77%；褐带卷蛾茧蜂冷藏30-75d后对雌蜂刺死寄主（大蜡螟）数量无显著差异，刺死率平均为79.00%-92.00%，与对照（刺死率99.00%）相比差异不显著；冷藏显著降低褐带卷蛾茧蜂对寄主的寄生率，冷藏30 d后褐带卷蛾茧蜂对寄主的寄生率为25.00%，而对照的寄生率为44.00%；冷藏可提高寄生蜂的产卵量，冷藏30 d时褐带卷蛾茧蜂的产卵总量最高，为78.60粒，其次为冷藏60 d和45 d，产卵量分别为71.33和70.00粒，均显著高于对照（47.80粒）；褐带卷蛾茧蜂冷藏后对其子代的卵孵化、幼虫化蛹和成虫羽化未产生明显的影响，但降低子代性比（♀︰♂）。【结论】褐带卷蛾茧蜂在冷藏30-60 d下对其刺死寄主无影响，产卵量较对照高，建议褐带卷蛾茧蜂的冷藏时间在60 d以内。

摘要: 【目的】明确山东茶园新发现天敌巩特桨角蚜小蜂Eretmocerus gunturiensis对茶树黑刺粉虱Aleurocanthus spiuiferus的寄生特性，为茶园害虫新型绿色防控产品研发提供依据。【方法】采用扫网法和黄板法调查桨角蚜小蜂的发生动态，利用超景深电子显微镜观察巩特桨角蚜小蜂的形态特征和测量被寄生后伪蛹大小，采用分冠层取样法调查巩特桨角蚜小蜂对黑刺粉虱的寄生特性。【结果】巩特桨角蚜小蜂在自然界中以幼虫寄生黑刺粉虱2龄和3龄若虫，雌蜂产卵于黑刺粉虱若虫腹部腹面与叶片之间，产卵过程大约持续2 min。成虫羽化时，用口器咬破黑刺粉虱伪蛹后端的壳，破口处近圆形不整齐。巩特桨角蚜小蜂的寄生影响黑刺粉虱伪蛹的大小，被寄生黑刺粉虱伪蛹的长度和宽度均显著短于未被寄生的伪蛹（P<0.05）。在不同的茶丛位置，巩特桨角蚜小蜂寄生黑刺粉虱的寄生率存在差异，茶丛中部叶片桨角蚜小蜂的寄生率显著高于茶丛上部和下部。【结论】山东茶园新发现的天敌巩特桨角蚜小蜂对黑刺粉虱具有良好的防控潜能。

摘要: 【目的】 昆虫的线粒体基因组为重建系统发育关系和分子进化提供了大量的数据。为揭示寄生蜂类昆虫线粒体全基因组序列的主要结构特征，探究其系统发育相关信息，为寄生蜂的进化和分子标记研究提供参考。【方法】 本文对NCBI上已公布的20种寄生蜂的完整线粒体基因组结果进行生物信息分析，并使用贝叶斯法（BI）和最大似然法（ML）分析其系统发育关系。【结果】 寄生蜂线粒体基因组存在部分tRNA的缺失或重复。除ND6和COX1外的蛋白质编码基因（PCGs）起始密码子均为标准起始密码子，仅ND2和ND4L的终止密码子是标准终止密码子。PCGs的进化速率为：Nad3>ATP8>Nad4>Nad4L>cytb>ATP6> COX2>Nad1>Nad5>Nad2>Nad6>COX3>COX1。寄生蜂的变异性较大，13种PCGs基因及2种rRNA的的变异性均超过95%。各科的系统发育关系可能是：（（茧蜂科+姬蜂科）+（（（（金小蜂科+姬小蜂科）+赤眼蜂科）+跳小蜂科）+缨小蜂科）+土蜂科）+（蚁蜂科+青蜂科）。【结论】 本研究基于寄生蜂线粒体全基因组进行分析，寄生蜂的进化速率较快，系统发育关系与形态学结果具有一致性。