摘要: 【目的】本研究旨在明确一种中国本土蛹寄生蜂广大腿小蜂Brachymeria lasus对重要入侵害虫美国白蛾Hyphantria cunea的生物防治潜力。【方法】在实验室条件下，测定不同温度（20,25和30℃）下广大腿小蜂对美国白蛾蛹的寄生功能反应，并评估固定空间（474 cm³）内不同寄生蜂密度（1～5头/罐）下的种内干扰效应。【结果】在20,25和30℃下，广大腿小蜂对美国白蛾蛹的寄生功能反应均符合HollingⅡ型模型，单雌日均寄生量随寄主密度的增加而显著上升。25℃是广大腿小蜂寄生能力最强的温度，当寄主密度为30头/罐时，单雌日均寄生量为16.90头。模型参数分析表明，25℃下的广大腿小蜂单雌日理论寄生量和寄生效能（瞬时攻击率a′/处理时间T_h）均为最高（分别为45.2489头和42.2127）,30℃下次之（分别为24.0385头和25.2404）,20℃下最低（分别为17.9856头和24.4856）。寻找效应分析显示，各温度下广大腿小蜂寻找效应均随寄主密度的增加而降低，表现出典型的逆密度依赖性。在干扰效应实验中，随着寄生蜂密度从1头/罐增加至5头/罐，总寄生量由15.40头显著增至58.90头，且单头蜂寄生量及单头蜂寄生率未见显著差异，表明在实验所设置的寄生蜂密度范围内不存在明显的种内干扰。【结论】在测试的3个温度中，25℃是广大腿小蜂发挥最佳寄生效能的最适温度，且该蜂在小空间内表现出较弱的干扰效应，因此建议将25℃作为广大腿小蜂室内规模化繁育的最佳温度参数。鉴于其在室内小环境干扰效应不明显，在林间生物防治应用中，支持采取“淹没式释放”策略，通过增加释放密度来从根本上提升对高密度美国白蛾种群的压制效果。

摘要: 【目的】本研究旨在解析西方蜜蜂Apis mellifera的ame-miR-927-b及其靶基因Tetraspanin2A（Tsp2A）在西方蜜蜂工蜂幼虫肠道应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染过程中的表达模式，并揭示ame-miR-927-b的调控作用。【方法】西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫饲喂含1×10⁶孢子/mL蜜蜂球囊菌的饲料，通过Stem-loop RT-PCR验证西方蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中ame-miR-927-b的表达；采用RT-qPCR检测ame-miR-927-b在接种和未接种蜜蜂球囊菌的西方蜜蜂工蜂4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量。利用生物信息学预测ame-miR-927-b的靶基因并进行数据库注释，解析靶基因Tsp2A编码蛋白的理化性质、分子特征和系统进化。采用RT-qPCR检测Tsp2A在上述西方蜜蜂工蜂4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量。西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫饲喂Agomir或Antagomir,利用RT-qPCR检测过表达或敲降ame-miR-927-b后工蜂6日龄幼虫肠道中的Tsp2A的表达量。【结果】西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后，ame-miR-927-b在西方蜜蜂6日龄幼虫肠道中表达。与未接种蜜蜂球囊菌的对照组相比，西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫蜜蜂球囊菌接种后，ame-miR-927-b的表达量在4,5和6日龄工蜂幼虫肠道中均显著下调。预测ame-miR-927-b靶向30个基因，可注释到16个功能条目和94条通路，靶基因Tsp2A编码蛋白的分子式为C₁₂₇₁H₁₉₈₃N₃₀₃O₃₃₃S₁₆,相对分子量约为27.35 kD,理论等电点为6.71,含有4个跨膜结构域，但不含典型信号肽，Tsp2A主要定位于细胞质；西方蜜蜂与东方蜜蜂Apis cerana的Tsp2A在系统进化树上聚为一支。西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后，在4和6日龄工蜂幼虫肠道中Tsp2A的表达量与未接种蜜蜂球囊菌的对照组的相比显著上调，在5日龄幼虫肠道中比对照组的上调。与阴性对照（饲喂Agomir-NC）比，3日龄工蜂幼虫饲喂Agomir后，6日龄工蜂幼虫肠道中ame-miR-927-b的表达量显著上调，Tsp2A的表达量极显著下调；与阴性对照（饲喂Antagomir-NC）比，3日龄工蜂幼虫饲喂Antagomir后，6日龄幼虫肠道中ame-miR-927-b的表达量极显著下调，Tsp2A的表达量极显著上调。【结论】蜜蜂球囊菌侵染影响西方蜜蜂工蜂幼虫肠道中ame-miR-927-b的表达。ame-miR-927-b的靶基因Tsp2A编码蛋白是一种潜在的疏水性、跨膜和胞内蛋白；西方蜜蜂和东方蜜蜂的Tsp2A同源性最高。ame-miR-927-b负调控Tsp2A的表达进而参与对蜜蜂球囊菌的侵染应答。

摘要: 【目的】蜕皮激素受体(ecdysone receptor, EcR)在昆虫的发育和代谢等生理过程中具有重要功能。本研究旨在解析西方蜜蜂Apis mellifera EcR蛋白AmEcR的理化性质、分子特性、保守结构域和系统进化，并探究AmEcR在工蜂幼虫发育阶段的作用，以期丰富对AmEcR在幼期发育中的功能的认识。【方法】利用生物信息学软件分析西方蜜蜂AmEcR蛋白的分子特性和保守基序，并构建西方蜜蜂及其他8个近缘物种EcR蛋白系统进化树；利用RT-qPCR检测AmEcR在西方蜜蜂工蜂4和6日龄幼虫、2日龄预蛹以及1, 3, 5, 7和9日龄蛹中的表达量；利用RNAi抑制西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫AmEcR的表达，通过酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测4-6日龄工蜂幼虫的蜕皮激素(ecdysone)滴度和体重，并利用RT-qPCR检测4-6日龄工蜂幼虫肠道中蜕皮激素信号通路下游基因AmEcR,AmUsp和AmHex70b的表达量。【结果】西方蜜蜂AmEcR蛋白(GenBank登录号：NM＿001098215.2)含有629个氨基酸，预测分子量约为66.78 kD,脂溶系数为66.09,等电点为6.31,亲水系数为-0.481;AmEcR含有两个跨膜结构域，但不含信号肽，主要定位于细胞核。AmEcR的三级结构与模板A0A7M7H321.1.A之间的同源性为99.84%。在AmEcR蛋白中鉴定到NR＿DBD＿EcR和NR＿LBD＿EcR保守结构域；西方蜜蜂与黑大蜜蜂A.laboriosa和东方蜜蜂A.cerana的EcR蛋白聚为一大支，亲缘关系较近。AmEcR在工蜂4日龄幼虫和2日龄预蛹期的表达量较高，明显高于在蛹期的表达量。与对照组相比，RNAi抑制AmEcR的表达后，蜕皮激素滴度在工蜂4-6日龄幼虫中均极显著降低，AmUsp和AmHex70b的表达量也降低，工蜂4和6日龄幼虫体重显著降低。【结论】干扰AmEcR的表达导致西方蜜蜂工蜂幼虫蜕皮激素滴度下降，蜕皮激素信号通路受抑制，最终影响工蜂幼虫体重。

摘要: 蜜蜂作为社会性昆虫的典型代表，其工蜂的觅食行为是一个高度复杂且受精密调控的过程，对于蜂群的生存与繁衍至关重要。本文综合近年来关于蜜蜂觅食行为研究的文献，从单胺类递质、神经肽、抑制性神经递质及胆碱能系统4个方面，分析其在不同生理状态和行为类型中的调控作用。现有证据表明，蜜蜂觅食行为受到多类神经调质共同构成的网络调控。其中，章鱼胺和多巴胺作为核心单胺类神经递质，参与奖赏价值编码、动机驱动及行为转变；5-羟色胺(serotonin, 5-HT)、速激肽相关肽(tachykinin-related peptide, TRP)和γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid, GABA)更多参与行为阈值调节、行为控制及神经回路稳定；sNPF等神经肽主要反映个体营养与能量状态，并调控感官知觉和食物摄入；乙酰胆碱则在嗅觉与视觉信息传递、学习记忆中起作用。综上所述，蜜蜂觅食行为并非由单一信号分子控制，而是依赖不同类型神经信号分子在生理状态、感觉处理与行为决策等层面的协同作用。未来研究需在多信号分子的互作机制、外周营养信号向中枢神经系统的传递路径以及神经回路水平开展研究。这将有利于深入理解社会性昆虫觅食行为调控机制，并为蜜蜂健康评估与保护提供理论依据。

摘要: 【目的】揭示东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂的影响，为深入开展二者互作研究提供科学依据。【方法】采用Percoll不连续密度梯度离心法制备东方蜜蜂微孢子虫纯净孢子，接种羽化出房的意大利蜜蜂工蜂后制备中肠样品，通过PCR扩增东方蜜蜂微孢子虫16S rRNA和actin基因，验证接种7 d时意大利蜜蜂工蜂成虫中肠中东方蜜蜂微孢子虫的侵染有效性；利用数字PCR检测东方蜜蜂微孢子虫侵染1, 4, 7和11 d时Hsp70的拷贝数。观测和比较东方蜜蜂微孢子虫接种组及未接种组意大利蜜蜂工蜂成虫的蔗糖溶液消耗量和存活率。【结果】东方蜜蜂微孢子虫接种的意大利蜜蜂工蜂成虫中肠样品中能够扩增出符合预期大小的16S rRNA和actin基因；接种后1, 4, 7和11 d时在单头意大利蜜蜂工蜂成虫中肠中鉴定到Hsp70的拷贝数分别为36.67, 386.67, 480和25 095.33;意大利蜜蜂单头工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子虫后4-13 d时的平均日蔗糖溶液消耗量[(0.0313±0.0041) g]均高于未接种对照组的[(0.0219±0.0049) g],其中在4, 5, 9和11 d时单头工蜂成虫日蔗糖溶液消耗量两组间差异显著；意大利蜜蜂工蜂成虫存活率在东方蜜蜂微孢子虫接种1-5 d时与未接种对照组中均为100%,意大利蜜蜂工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子6 d时出现死亡，而未接种对照组工蜂成虫在7 d时出现死亡；意大利蜜蜂工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子虫6-13 d时的存活率均低于未接种对照组的。【结论】东方蜜蜂微虫在意大利蜜蜂工蜂中肠中持续增殖，对宿主造成明显的能量胁迫，进而缩短了宿主寿命。