摘要: 【目的】核心结合因子(core binding factor, CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子，在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用，但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中的生理功能。【方法】克隆西方蜜蜂Bgb(big brother)基因AmBgb的编码序列(coding sequence, CDS),并进行生物信息学分析；运用qRT-PCR检测AmBgb在西方蜜蜂不同发育发育阶段(1-3日龄工蜂卵，1, 3和5日龄工蜂幼虫，工蜂预蛹，1, 3, 5, 7和9日龄工蜂蛹，刚出房工蜂，10日龄哺育蜂以及21日龄采集蜂)的表达量；采用CRISPR/Cas9敲除西方蜜蜂卵中AmBgb,监测卵的发育和存活情况，并通过PCR和测序的方法检测靶位点，验证AmBgb在西方蜜蜂中的生理功能。【结果】西方蜜蜂AmBgb的CDS全长为759 bp,编码252个氨基酸，第39-201位氨基酸存在1个CBFβ结构域；AmBgb分子量为28 982.37 D,无信号肽和跨膜结构，预测其为胞内蛋白；系统进化树显示西方蜜蜂AmBgb与东方蜜蜂A.cerana的Bgb高度同源(氨基酸序列一致性为99.21%),且亲缘关系最密切。AmBgb在2和3日龄工蜂卵中的表达量明显高于其他发育阶段的。基于CRISPR/Cas9处理的西方蜜蜂43粒卵中，有5粒卵孵化为幼虫且AmBgb靶位点无突变；随机对7粒死亡卵进行检测，发现6粒卵中AmBgb的靶位点出现基因编辑，包括不同长度插入、缺失或替换。【结论】西方蜜蜂AmBgb在2和3日龄卵中高量表达，敲除AmBgb导致卵不能正常孵化为幼虫。这些结果表明AmBgb在西方蜜蜂胚胎发育过程中发挥重要作用，这将为其他膜翅目(Hymenoptera)昆虫中该基因的生理功能研究提供理论指导。

摘要: 【目的】本研究旨在明确共生菌Wolbachia属中特定菌株对宿主适合度的影响及分子机制。【方法】以20 mg/mL盐酸四环素蜂蜜溶液连续饲喂处理短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum孤雌产雌品系3代成蜂，计算寄生率、羽化率和雌性比，并利用绝对定量qPCR(absolute quantitation qPCR, AQ-PCR)对短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia属的wsp的lg(绝对拷贝数)进行检测，分析Wolbachia的滴度；利用Illumina平台以Wolbachia基因组作为参考基因组进行短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia属的转录组测序，盐酸四环素处理前后短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia转录组中筛选差异表达基因并进行GO/KEGG/COG数据库分析；利用RT-qPCR检测短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂中Wolbachia属的5个基因(w1260,w0535,w3585,w4570和w2910)的表达量。【结果】盐酸四环素处理组短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂寄生率、羽化率、雌性比和体内wsp的lg(绝对拷贝数)均显著低于对照组且随世代增加显著下降。从盐酸四环素处理前后的短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia转录组中共鉴定出28个差异表达基因(6个下调)且显著富集于代谢过程、氧化磷酸化、能量产生与转换等多个与生长发育相关的通路，6个下调基因经NCBI Blast比对到3个Wolbachia菌株wCIFem,wfur和wSca。RT-qPCR验证表明，盐酸四环素处理后孤雌产雌成蜂体内5个差异表达基因(w1260,w0535,w3585,w4570和w2910)表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】Wolbachia滴度降低通过抑制关键代谢通路(如氧化磷酸化)及清除功能菌株(wCIFem,wfur和wSca),削弱宿主能量供给与发育效率，导致生殖适合度下降。本研究首次以Wolbachia基因组为参考基因组解析共生菌-宿主互作的分子机制，研究结果表明Wolbachia通过菌株特异性基因网络维持共生稳态，揭示了Wolbachia中不同菌株通过多通路调控宿主生殖适合度的分子机制，为建立基于共生菌基因组的靶向调控技术体系提供理论支持。

摘要: 【目的】本研究旨在丰富西方蜜蜂Apis mellifera过氧化物还原酶5（peroxiredoxin-5） AmPRX5的理化性质和分子特征信息，检测AmPRX5的表达模式，并探究AmPRX5在蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染后对西方蜜蜂的抗氧化应激作用，为进一步开展AmPRX5功能和作用机制研究提供科学依据。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmPRX5的CDS;使用相关软件预测AmPRX5的理化性质和分子特征，构建蛋白互作网络，并进行保守基序、结构域和系统进化分析。采用RT-qPCR检测AmPRX5在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段（卵、 3和5日龄幼虫、 1和2日龄预蛹、 1日龄蛹以及1, 2, 6, 8和12日龄成虫）和工蜂成虫不同组织（脑、咽下腺、中肠、触角、毒腺、表皮和脂肪体）及3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量；利用分光光度法检测蜜蜂球囊菌接种3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的过氧化氢（H₂O₂）含量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmPRX5的CDS,长558 bp。AmPRX5的分子式为C₉₀₄H₁₄₄₅N₂₄₁O₂₆₄S₈,分子量约为20.17 kD,等电点为8.99,平均亲水系数为-0.013。AmPRX5含有19个磷酸化位点，但不含典型的信号肽和跨膜结构域。AmPRX5的二级结构包含88个无规卷曲、 59个α-螺旋和38条延伸链。AmPRX5与硫氧还蛋白还原酶等10个蛋白构成1个互作网络。西方蜜蜂和其他9种蜂的PRX5均包含1个相同的PRX5结构域和6个保守基序。西方蜜蜂与东方蜜蜂A.cerana的PRX5同源性最高。AmPRX5在1日龄蛹中的表达量最高且显著高于卵、 3日龄幼虫、 5日龄幼虫、 1日龄预蛹和2日龄预蛹中的表达量；AmPRX5在12日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1, 2, 6和8日龄成虫体内的表达量；AmPRX5在成虫触角中的表达量最高且显著高于中肠、脂肪体、表皮、毒腺和脑中的表达量。与未接种对照组比较，西方蜜蜂3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后AmPRX5的表达量在4日龄幼虫肠道中上调但无显著差异，在5日龄幼虫肠道中极显著上调，在6日龄幼虫肠道中显著上调；H₂O₂的含量在接种蜜蜂球囊菌后4和5日龄幼虫肠道中均极显著上升，在6日龄幼虫肠道中显著升高。【结论】AmPRX5是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白；AmPRX5在西方蜜蜂不同发育阶段和不同组织中动态差异表达；AmPRX5可能通过影响H₂O₂含量参与幼虫对蜜蜂球囊菌侵染的应答。

摘要: 【目的】本研究旨在探究我国油茶Camellia oleifera花期中华蜜蜂Apis cerana cerana粉源植物多样性及其对油茶传粉的贡献。【方法】对2015-2023年我国油茶9个种植区(三带九区) 99个油茶基地采集的中华蜜蜂标本洗刷其体表携带花粉，提取混合花粉DNA,进行ITS2区PCR扩增，基于Illumina PE250二代高通量测序技术进行测序；经Trimmomatic, FLASH和Usearch v10.0对原始序列进行质控、拼接和去嵌合体处理，以97%相似度划分可操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs),基于NT数据库进行物种注释。采用Past v4.17计算Simpson指数、Shannon指数、Chao1指数及Margalef指数等Alpha多样性指数值，利用SPSS v26.0进行单因素方差分析与LSD检验，分析不同种植区油茶花期中华蜜蜂的粉源植物组成、丰度和多样性。【结果】共注释到油茶花期中华蜜蜂粉源植物33目58科85属150种。不同油茶种植区花期中华蜜蜂粉源植物组成和丰度不同，总占比超过1.00%的粉源植物共有13种。其中油茶花粉的相对丰度较低，为0.03%～23.33%。中带油茶种植区的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.75±0.14, 2.01±0.52, 85.04±21.53和7.30±1.84),北带的分别为0.56±0.17, 1.22±0.36, 35.99±3.11和2.76±0.30,南带的分别为0.43±0.14, 1.10±0.25, 77.74±9.71和6.60±0.78,多样性较低。在油茶种植区的层面上，Ⅱc(中带贵州高原区)的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.87±0.00, 2.44±0.06, 101.97±11.33和8.33±0.58)、 Ia(北带东部桐柏山大别山低山丘陵区)的最低(分别为0.40±0.00, 0.90±0.01, 34.07±1.85和2.82±0.37)。去除油茶花粉后，不同油茶种植区的伴生粉源植物的相对丰度存在显著地域差异，优势种包括鬼针草Bidens pilosa、甘菊Chrysanthemum lavandulifolium、蔓菁Brassica rapa及假弯曲碎米荠Cardamine fallax(最高相对丰度分别为85.05%, 75.71%, 43.99%和35.38%)。【结论】中华蜜蜂是我国油茶的传粉昆虫之一，其体表携带花粉中油茶花粉的含量在不同地区差异性显著。油茶花期中华蜜蜂粉源植物资源丰富，且存在明显的区域性差异。

摘要: 熊蜂独特的授粉特性在设施作物授粉中发挥着重要作用，长期以来，作物的病虫害防控依赖于大量化学农药的使用，这严重制约着熊蜂授粉技术的推广。然而授粉效果与病虫害防控效果相辅相成，采用绿色防控技术是降低农药对熊蜂授粉影响的重要途径。本文从熊蜂授粉与作物病害的关系、与植保的互作关系、绿色植保技术与熊蜂授粉的协作应用3个方面展开综述，并提出未来绿色植保技术与熊蜂授粉协作发展的方向，旨在为保护和更好的推广熊蜂授粉技术提供参考，为促进树立大食物安全观和发展高质量绿色农业提供理论支撑。