摘要: [目的]亚社会性寄生蜂管氏肿腿蜂Sclerodermus guani具有典型的亲代抚育行为,并贯穿于子代整个发育过程。这种长时间的亲代投入虽然会牺牲亲代未来繁殖力,但能有效提高当前子代存活率,进而有利于种群繁衍,抚育与繁殖之间的权衡也意味着该寄生蜂在亲代产出更多后代和抚育有限子代之间抉择,而亲代卵巢发育的可塑性是保障种群生殖利益的重要适应性策略,不仅调节着亲代对有限寄主资源的利用率,还能促进其后代的存活与发育。明确管氏肿腿蜂抚育前后及过程中的卵巢发育动态,为进一步揭示管氏肿腿蜂亲代抚育与生殖权衡的生理基础提供重要科学依据。[方法]在2日龄管氏肿腿蜂雌成蜂接入松墨天牛寄主后经历取食寄主至产卵过程中（自接蜂起12 d内）,定期解剖观察该雌成蜂卵巢发育相关数量性状（卵巢长宽度、卵巢指数、基部卵子长宽度和卵子数目）和腹部变化特征（腹部长宽度及腹部指数）,对雌成蜂卵巢发育过程进行分级,明确雌成蜂腹部膨大期与卵巢发育的关联;并对比分析抚育过程中不同生理状态下雌成蜂卵巢发育动态变化。[结果]根据卵巢色泽、卵黄沉积和卵子发生情况,将管氏肿腿蜂卵巢发育过程分为5级,即乳白透明期（Ⅰ级）、卵黄沉积期（Ⅱ级）、成熟待产期（Ⅲ级）、产卵盛期（Ⅳ级）和产卵末期（Ⅴ级）;与此过程相对应,观察到雌成蜂腹部表型有膨大变化的典型现象,分为5个阶段,即未膨大期、膨大初期、膨大期、膨大末期和膨大暂停期。结果显示,雌成蜂腹部数量性状和卵巢数量性状（除基部卵子长宽度）都呈现先上升后下降的变化趋势。抚育前期,初羽化雌成蜂[即未取食处女蜂（virgin females without feeding,VF）和未取食已交配雌成蜂（mated females without feeding,MF）]不怀卵,但取食且已交配的雌成蜂（mated females with feeding,MFF）卵巢发育逐渐明显;已交配的产卵初期雌成蜂（mated females in the early oviposition stage,MFEO）卵巢长度[（2 871.31±80.17）μm]、卵巢宽度[（405.91±29.14）μm]、卵巢指数[（1.19±0.09） mm²]、卵子数量[成熟卵子:（7.94±1.49）粒;未成熟卵子:（9.76±1.70）粒]均达最大值。抚育卵的雌成蜂（females caring for eggs,FCE）卵巢长宽度和卵巢指数显著高于抚育其他子代发育阶段。抚育卵的雌成蜂（FCE）、抚育低龄幼虫的雌成蜂（females caring for early instar larvae,FCEIL）、抚育老熟幼虫的雌成蜂（females caring for mature larva,FCML）和抚育后期茧蛹的雌成蜂（females caring for late pupal cocoon,FCLPC）卵巢内均怀卵,其余状态的雌成蜂不怀卵。在卵巢发育过程中,雌成蜂腹部指数和卵巢指数呈显著正相关关系。[结论]管氏肿腿蜂雌成蜂的卵巢发育与其取食和抚育有关,当补充营养之后亲代雌成蜂卵巢开始发育;而在抚育子代过程中,亲代雌成蜂虽具生殖力但卵巢发育受到抑制,进而保障其亲代抚育对子代存活及发育利益最大化。

摘要: 【目的】本研究旨在通过测定分析补充激素和烟蚜Myzus persicae补充桃叶汁进行复壮对烟蚜茧蜂Aphidius gifuensis寄生能力及其子代成蜂体型和生长发育相关酶含量和活性的影响，筛选出复壮效果最好的方式，为对退化的烟蚜茧蜂进行种群复壮，使烟蚜茧蜂的寄生能力在人工扩繁中维持在一个健康的状态。【方法】室内挑选饲养至10代后出现明显种群退化的烟蚜茧蜂成蜂饲喂不同浓度(0.32, 1.6, 8, 40和200 mg/L)的激素(雌二醇、甲基睾丸素和氢化可的松)溶液24 h后，测定烟蚜茧蜂寄生率、子代成蜂体型及子代成蜂生长发育相关酶[羧酸酯酶(carboxylesterase, CarE)、酚氧化酶(phenoloxidase, PO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和海藻糖酶]的含量和活性。室内挑选饲养至10代后出现明显退化的已完成交配的烟蚜茧蜂雌成蜂，按雌蜂∶烟蚜=1∶100接入处理过的具有100头2-3龄烟蚜若蚜的烟株的小养虫笼中，将不同浓度(稀释倍数1, 10, 100, 1 000和10 000)的桃叶汁均匀喷洒至各烟株的烟叶上，并饲喂烟蚜24 h后，测定烟蚜茧蜂寄生率、子代成蜂体型及子代成蜂CarE、 PO、 SOD和海藻糖酶的含量和活性。【结果】补充激素复壮中，1.6 mg/L甲基睾丸素复壮效果最好，烟蚜茧蜂成蜂饲喂1.6 mg/L甲基睾丸素后，其寄生率为33.67%,和对照组[饲喂纯净水∶乙醇(1∶5, v/v)]相比提高了14.34%,但1.6 mg/L甲基睾丸素对子代成蜂体型无显著复壮效果。烟蚜茧蜂成蜂在饲喂1.6 mg/L雌二醇时，子代成蜂后足胫节长度与对照组相比增长了22.25%;在饲喂1.6 mg/L甲基睾丸素后，烟蚜茧蜂子代成蜂体内CarE活性和PO含量最高，和对照组相比分别提升了41.00%和40.81%;烟蚜茧蜂成蜂在饲喂1.6 mg/L氢化可的松后，子代成蜂体内SOD含量最高，和对照组相比提高了48.92%。烟蚜茧蜂成蜂饲喂不同激素对其子代海藻糖酶含量没有显著影响。烟蚜补充桃叶汁复壮中，不同浓度桃叶汁饲喂烟蚜若蚜后对烟蚜茧蜂成蜂寄生率无显著复壮效果，但不同倍数桃叶汁饲喂烟蚜若蚜后烟蚜茧蜂成蜂寄生率均高于对照组，其中使用1倍桃叶汁处理组烟蚜茧蜂寄生率最高；不同浓度桃叶汁饲喂烟蚜若蚜后对烟蚜茧蜂子代成蜂体型有显著影响，其中100倍桃叶汁处理组烟蚜茧蜂子代成蜂后足胫节长度最长，较对照组增加了0.018 mm; 1倍桃叶汁饲喂烟蚜若蚜后，烟蚜茧蜂子代成蜂体内SOD活性显著提高了11.34%,但对其他酶含量及活性无显著影响。【结论】生产上可对退化的烟蚜茧蜂种群补充1.6 mg/L甲基睾丸素、1.6 mg/L雌二醇或用1倍桃叶汁饲喂烟蚜，作为实际生产中提高烟蚜茧蜂人工繁殖的复壮措施。

摘要: 【目的】本研究旨在探究意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica去甲基化酶AmALKBH基因对生长发育过程和mRNA甲基化的潜在调控作用，为深入开展AmALKBH的功能研究提供新理论基础和参考。【方法】使用多种软件对5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7及AmALKBH8）进行生物信息学分析，并进行多物种间的同源序列比对和系统进化树构建。利用qRT-PCR检测5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7及AmALKBH8）在意大利蜜蜂不同发育阶段（卵、幼虫和蛹）,1, 7和18日龄成年工蜂脑中以及1日龄成年工蜂不同组织（触角、脑、咽下腺、蜜囊、中肠、回肠、直肠、脂肪体和毒腺）中的表达量。同时利用高效液相色谱三重四级杆串联质谱（high performance liquid chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry, HPLC-QqQ-MS/MS）检测意大利蜜蜂以上不同发育阶段以及1, 7和18日龄成年工蜂脑样品中mRNA m⁶A甲基化的水平。【结果】意大利蜜蜂的5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7和AmALKBH8）分别编码311, 297, 229, 228和585个氨基酸，具有共同的保守基序和结构域，均为亲水性的球形蛋白，5个AmALKBH蛋白之间的理化性质存在差异。意大利蜜蜂的5个AmALKBHs与黑腹果蝇Drosophila melanogaster、智人Homo sapiens、家鼠Mus musculus、拟南芥Arabidopsis thaliana以及大肠杆菌Escherichia coli的ALKBH氨基酸序列一致性为12.92%～46.46%,与东方蜜蜂A.cerana、黄脚胡蜂Vespa velutina和欧洲熊蜂Bombus terrestris的ALKBH亲缘关系最紧密。随着卵期的胚胎发育进程，AmALKBH4和AmALKBH7的表达量逐渐降低，而AmALKBH6的表达量逐渐增高，AmALKBH8的表达量在卵中期（产卵后36 h）最高而后下降，AmALKBH1不表达；在幼虫期和蛹期，5个AmALKBH基因的表达量随发育进程逐渐提高，在褐眼白蛹和褐眼浅色蛹时达到峰值，在羽化出房前有所下降；5个AmALKBH基因均显示出在意大利蜜蜂1日龄成年工蜂触角和脑中高表达；1日龄成年工蜂脑中AmALKBH6,AmALKBH7和AmALKBH8的表达量均显著低于7和18日龄成年工蜂中的。mRNA m⁶A甲基化水平从卵前期到卵中期明显降低，在卵后期（产卵后60 h）显著提高；幼虫和蛹期mRNA m⁶A甲基化水平呈现与基因表达量相似的变化趋势，不同的是在粉眼白蛹时就较早地出现峰值，而mRNA m⁶A甲基化水平在1日龄成年工蜂脑中最高，在7和18日龄成虫年工蜂脑中降低。【结论】研究结果显示出ALKBH基因家族在各物种间的高度保守性，意大利蜜蜂的5个AmALKBH基因之间在序列特征、蛋白结构和表达模式上均存在差异，预示其各自具有功能特点。AmALKBH基因表达量和mRNA m⁶A甲基化水平均随发育阶段出现动态变化，且二者之间存在一定关联，表明AmALKBH基因对意大利蜜蜂生长发育具有潜在调控作用。以上研究结果为揭示AmALKBH基因调控生长发育的分子机制打下良好基础，为进一步提升蜜蜂在基础研究和授粉应用中的价值提供全新理论依据。

摘要: 【目的】建立意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂喙转录组数据库，通过功能注释鉴定味觉受体(gustatory receptor, GR)基因信息，探究GR基因与意大利蜜蜂采集偏好性的相关性。【方法】采用Illumina HiSeq高通量测序平台对采集梨花粉、采集油菜花粉和不采集花粉的意大利蜜蜂工蜂喙进行转录组测序，筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)并进行GO功能注释和KEGG代谢通路分类以及筛选GR基因并构建系统进化树；用qRT-PCR验证9个DEGs的表达。【结果】共筛选得到342个DEGs,其中上调表达基因157个，下调表达基因185个。GO功能注释结果显示，DEGs在GO注释中主要参与细胞过程、细胞解剖实体和结合。KEGG代谢通路分析结果显示，DEGs在氧化磷酸化通路中富集最多，酪氨酸代谢通路次之。在意大利蜜蜂喙转录组共鉴定出9种GR基因，其中4种为已知的GR基因，其余5种为本研究鉴定的未知GR基因，均具有完整的阅读开放框，且都有昆虫GR基因家族所具有的7个跨膜结构域。基于氨基酸序列构建的意大利蜜蜂AmelGRs与黑腹果蝇Drosophila melanogaster GRs的系统进化树，推测AmelGR4和AmelGR6可能属于苦味家族受体，AmelGR9可能属于甜味家族受体。qRT-PCR验证结果表明，筛选的9个DEGs在采集梨花粉的工蜂喙中有8个基因的表达趋势与RNA-seq结果相一致，在采集油菜花粉的工蜂喙中9个DEGs的表达趋势都与RNA-seq结果相一致。【结论】本研究获得了意大利蜜蜂工蜂喙转录组数据，筛选得到了GR基因，通过系统进化分析推测AmelGR4和AmelGR6可能属于苦味家族受体，AmelGR9可能属于甜味家族受体，推测意大利蜜蜂采集偏好性可能与GR基因相关。研究结果有助于在分子水平上加深对昆虫味觉感知系统的理解，为意大利蜜蜂在授粉过程中的采集偏好行为调控机制的研究奠定基础。

摘要: 【目的】通过测定lncRNA13922在西方蜜蜂Apis mellifera工蜂不同发育阶段和成虫组织的表达谱，并解析lncRNA13922的调控方式和作用，为进一步探究lncRNA13922的调控功能和机制提供科学依据。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫不同组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的表达量；采用RT-qPCR检测lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)和工蜂成虫组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的相对表达量；通过Pearson相关性分析预测与西方蜜蜂lncRNA13922共表达的mRNA;利用miRDeep2将lncRNA13922的核苷酸序列比对到miRBase数据库，再通过miRPara来预测miRNA前体；联用Miranda, RNAhybrid和TargetScan软件分别预测lncRNA13922靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,取交集作为可靠的靶标集合；根据靶向关系构建竞争性内源RNA(competing endogenous RNA, ceRNA)调控网络，进而利用相关软件对靶mRNA进行GO和KEGG数据库注释。【结果】lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫的触角、脑、中肠、脂肪体、咽下腺、表皮和毒腺均能被扩增出符合预期大小(约127 bp)的目的片段。lncRNA13922在西方蜜蜂卵、 3日龄幼虫、 1和2日龄预蛹及4日龄蛹中差异表达，在卵中的表达量最高，且显著高于3日龄幼虫及1和2日龄预蛹中的表达量；lncRNA13922在1, 2, 6, 12, 15和17日龄成虫体内均有表达，但表达量存在差异；lncRNA13922在2日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1和17日龄成虫体内的表达量。lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫上述7种组织中差异表达，在毒腺中的表达量最高，且显著高于脑、中肠、脂肪体和咽下腺中的表达量。lncRNA13922与29条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有正相关关系，与12条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有负相关关系。lncRNA13922可作为2个miRNA的潜在前体。lncRNA13922可靶向75个miRNA进而靶向1 833条mRNA。上述靶mRNA涉及细胞部分和细胞等603个GO条目与内吞作用和嘌呤代谢等56条KEGG通路。【结论】西方蜜蜂lncRNA13922在工蜂的不同发育阶段和成虫不同组织中动态差异表达，并通过反式作用、miRNA前体和ceRNA作用网络潜在参与调控发育过程。