摘要: Pacifastin蛋白酶抑制剂在昆虫免疫与发育中起着重要作用。为了明确其在寄生蜂中的相关功能,本研究分别克隆获得编码丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂开放阅读框的cDNA序列nvpp-1和nvpp-2,序列长度分别为723和888 bp,分别编码240和295个氨基酸残基。预测结果表明,nvpp-1和nvpp-2推导氨基酸序列N端均含一个长度为17个氨基酸残基的信号肽序列。序列分析和进化树构建结果表明,NVPP-1和NVPP-2分别含有5个和4个典型的Pacifastin保守结构域,并与疑黑瘤姬蜂Pimpla hypochondriaca毒液蛋白CVP4聚为一类。实时荧光定量RT-PCR结果表明,nvpp-1和nvpp-2于该蜂雌蜂各组织中均发生转录,且在胸、腹部残体(解剖后腹部剩余部分)和毒器官中的转录水平较高;于毒器官中,其在羽化初期(0和1 d)转录水平较高,其转录水平显著降低。Western blot结果表明,NVPP-1和NVPP-2均只在毒液中被大量检出,在其他待测组织中均未被检出,而刚羽化时(0 d)其在毒液中含量较低。利用pET-28a(+)载体分别对nvpp-1和nvpp-2进行了原核表达,并对重组表达产物进行纯化。分别测定重组NVPP-1和NVPP-2对4种不同丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、蛋白酶K和弹性蛋白酶)的抑制效果,结果表明,重组NVPP-1和NVPP-2分别能显著抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶活性。同时还分别测定了两种重组蛋白对寄主家蝇蛹血淋巴自身的酚氧化酶活性及原酚氧化酶激活反应的影响,结果表明,重组蛋白对家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应亦有抑制效果,但其均不能显著影响血淋巴自身的酚氧化酶活性。综上所述,丽蝇蛹集金小蜂毒液中含有Pacifastin蛋白酶抑制剂NVPP-1和NVPP-2,分别为糜蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶抑制剂家族成员,均能显著影响寄主家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应,从而削弱寄主体液免疫水平。本研究所获结果加深了我们对昆虫尤其是寄生蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂作用的认识。

摘要: 凹唇壁蜂Osmia excavata Alfken被广泛应用于我国北方果树的传粉,而其飞行能力是影响其传粉效率的重要因素。本研究通过飞行磨吊飞试验,评估了凹唇壁蜂雌蜂和雄蜂飞行能力的差异以及取食对其飞行能力的影响。结果表明,凹唇壁蜂雌蜂体重(116.30 mg)显著大于雄蜂(59.80 mg)(P<0.001),雌蜂的最大飞行速度(3.44 km/h)显著大于雄蜂(2.36 km/h),雄蜂的飞行距离和最大飞行速度与其飞行前体重成显著的正相关性,雌蜂的飞行时间与其飞行前体重成显著正相关性,而雌蜂的平均飞行速度与其体重成显著负相关性;雌蜂的日平均飞行距离为0.23 km,根据雌蜂以巢为中心,采集花粉繁殖后代的生物学习性,蜂巢之间的放置距离应少于100 m。取食蜂蜜后,雌雄壁蜂的飞行距离、飞行时间、最大飞行速度均有提高的趋势,建议在田间应用时,可在蜂巢附近放置蜂蜜或种植其他蜜源植物给初羽化的凹唇壁蜂提供食物补充能量。本研究明确了雌、雄壁蜂的飞行能力和出茧后补充食物对于壁蜂飞行的促进作用,为有效地利用凹唇壁蜂进行传粉提供了理论依据。

摘要: 整合素是由α和β亚基组成的异源二聚体跨膜蛋白,在调控细胞增殖中起重要作用。本实验初步研究了腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum整合素β亚基在胚胎增殖中所起的作用。用PCR方法克隆获得了腰带长体茧蜂整合素β基因Mcitg-β(GenBank登录号为KC784942),其开放读码框全长2 526 bp,编码841个氨基酸,含有整合素基因特有的多个功能域。Mcitg-β与已报道的昆虫整合素基因具有很高的序列相似性,系统发育分析结果表明其与膜翅目的熊蜂Bombus impatiens整合素基因核苷酸序列一致性最高,达76%。定量PCR结果表明Mcitg-β在蜂卵中大量表达,在初级胚胎及二级胚胎细胞中也有表达,但在桑葚胚中没有表达。将dsMcitg-β通过体外浸泡法导入到二级胚胎或体内注射法导入到寄主亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫体内后,可极显著抑制腰带长体茧蜂整合素基因的表达量,降低胚胎增殖能力,并减少出蜂数量。结果初步证明Mcitg-β可能对调节多胚发育的腰带长体茧蜂的胚胎增殖起重要的作用。

摘要: 旋纹潜蛾Leucoptera malifoliella(Costa)是苹果和梨上一种偶发性害虫。本文依据文献和我们的研究,综述了旋纹潜蛾的分布与危害、寄主植物、形态、习性、天敌和防治技术。旋纹潜蛾在北京1年4代,越冬代成虫在苹果花蕾露红期时开始羽化,可持续1个多月,盛期发生在苹果的花期。幼虫分为3个龄期,其各龄的平均头壳宽度分别为0.23,0.33和0.44 mm。2011年旋纹潜蛾在北京昌平王家园果园大发生。2011年春天在该果园用性诱剂引诱到大量的旋纹夜蛾成虫,第1代的卵量很低,且当年的种群数量一直很低,可能的原因是越冬期的干旱影响了蛹的活力,从而影响成虫的产卵量。在防治上,以保护寄生蜂为主,可人工清除越冬蛹,大发生时在卵盛期用灭幼脲喷雾防治。本文还提供了该虫为害状、成虫、卵、幼虫、茧和部分天敌的彩色图片。

摘要: 植物病毒可通过影响植物形态和生理特性从而对媒介昆虫和寄生性天敌产生作用。然而,在植物-媒介昆虫-寄生蜂三营养级关系研究中有关植物病毒的影响很少被考虑。本研究测定和分析了番茄植株感染番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)后叶毛密度的变化及对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)重要寄生性天敌海氏桨角蚜小蜂Eretmocerus hayati Zolnerowich and Rose行为与适合性的影响。结果表明:携带TYLCV病毒番茄植株叶毛密度显著增加,为健康植株叶毛密度的1.8倍。海氏桨角蚜小蜂在带毒植株叶片上的寄主处置时间和寄主块停留时间显著长于其在健康植株叶片上的时间,分别为其2倍和1.5倍,但寄生蜂的寄生率、羽化率及发育历期差异不显著(P>0.05)。本文首次报道了双生病毒侵染可引起叶毛密度的增加,对理解植物-双生病毒-烟粉虱-寄生蜂四方关系提供了新的数据。