摘要: 利用DNA聚合酶进行DNA体外复制时,模板上的多种回文结构可能导致复制跳跃,表现为较大的片段缺失。本文在研究黑斑侧褶蛙抗菌肽Temporin基因结构时,对一个1126 bp的内含子片段进行PCR扩增、扩增产物的T-A克隆和Sanger测序,在这3个阶段都遇到了在同一位置出现564 bp的缺失。根据实验数据和文献报道,我们推测这一复制跳跃的产生与一段6 bp的同向重复单元有关,并提出跳跃可能发生的机制:模板上两个重复单位下相互靠近,形成特定的高级结构,使DNA聚合酶脱落下来,新链延伸被阻断。下一个循环中新链的第一个重复单位与模板第二个重复单位互补配对并退火,形成引物,DNA聚合酶结合后继续延伸,形成缺失的PCR产物。这一发现显示,复制跳跃不仅可以发生在PCR和Sanger测序等体外复制过程中,而且可以发生在细菌体内质粒复制的过程中。如果研究中不能准确判定跳跃的发生,DNA上丢失一个片段就会被误读为新的等位基因。

摘要: 调查吉林省地区中国林蛙的生存环境以及中国林蛙各部位重金属含量,同时分析中国林蛙体内重金属含量与生态环境重金属之间的相关关系,评价中国林蛙生存环境重金属含量对中国林蛙体内重金属含量的影响。随机选择6个监测点,采集并检测中国林蛙生存环境中土壤、流动水、池中水和中国林蛙体内蛤蟆油、肝、骨、籽中的重金属含量。采用原子吸收法和原子荧光法检测林蛙各部位重金属总量以及铅、镉、铜、汞、砷元素的含量;以土壤环境质量标准GB15618-1995及地表水环境质量标准GB3838-20判断各种重金属元素含量超标情况。应用偏最小二乘方法分析林蛙体内重金属与生存环境中重金属之间的相关关系。结果表明林蛙体内骨、籽中的铜含量与其生存的池中水和流动水中的铜含量有显著的相关关系(P<0.05)。中国林蛙体内重金属含量与其生存环境中的重金属含量相关,应严控环境中的重金属污染以利于中国林蛙的用药安全。

摘要: 在黑龙江省伊春林区捕获的呈"红腿病"体征的东北林蛙(Rana dybowskii),从其肝脏和腹腔积液中分离出一致病菌株RY-1,通过对分离菌株形态特征、生理生化、16 S rDNA基因序列和系统发育树等分析进行菌种鉴定,并用该菌株RY-1人工感染健康东北林蛙后观察其肝脏组织病理学变化。结果显示,菌株RY-1形态呈浅黄色有光泽的圆形、中央凸起、边缘光滑、直径为1.5～2 cm的菌落,革兰氏染色阴性,16S rDNA的系统发育树等结果分析判定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。随着感染时间延长(12～72 h),肝细胞变性,呈空泡样变,细胞间隙增大,炎性细胞浸润逐渐明显。本研究分离并鉴定了1株东北林蛙源嗜水气单胞菌,并首次探讨了人工感染嗜水气单胞菌的东北林蛙病理学变化,对其疾病防控和健康养殖具有重要参考意义。

摘要: 依次采用了苏木紫-伊红(HE)染色法、Masson氏三色法,Mallory磷钨酸苏木紫染色法对牛蛙的皮肤组织结构进行研究;并通过透射电镜技术,观察不同部位皮肤的超微结构差异。通过研究结果显示,牛蛙皮肤的表皮结构从内到外依次为基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层。牛蛙的真皮层有大量的腺体,主要为黏液腺和颗粒腺,此外还有大量的黑色素散布于真皮层中。通过牛蛙皮肤各部位测量数据分析显示,牛蛙皮肤不同部位间存在显著差异。通过对牛蛙的皮肤组织形态学研究,可以为皮肤及皮下组织细胞间形态学的研究提供研究基础。

摘要: PDK1是PI3K/Akt信号通路中的一个重要的激酶。在哺乳动物中,PI3K/Akt信号通路是一条保守的通路,通过激活下游的因子对糖代谢、脂肪代谢以及蛋白质代谢,细胞的增殖、分化、凋亡等起调节控制作用。本研究基于东北林蛙转录组数据,从中鉴定出PDK1基因3条Unigene序列,并通过RACE法克隆了PDK1基因的全长cDNA,命名为rdPDK1,其全长为1 990 bp,开放阅读框长1 674 bp,编码557个氨基酸。进行生物信息学分析,推测该基因编码的蛋白质相对分子质量63.7 kD,等电点为7.21。该蛋白第82～344个和443～549个氨基酸是2段保守结构域STKc激酶域和PH调节结构域。同源性分析表明rdPDK1蛋白与HsPDK1蛋白氨基酸序列一致率为79%,相似率为100%;与MmPDK1蛋白氨基酸序列一致率为80%,相似率为100%。本研究结果有望为进一步研究东北林蛙PI3K/Akt信号通路中PDK1基因的特性及功能奠定基础。