摘要: 淡色库蚊具有明显的偏好性,对鸟类的偏好胜过哺乳类动物。本研究采用吸附剂和羽毛浸提方法分别收集气味物质,应用GC/MS方法分析家鸡Gallus gallus domesticus和鸽子Columba rupestris的挥发性气味物质组成。随后使用Y型嗅觉仪进行行为实验,对影响淡色库蚊搜寻宿主行为的化学物质进行鉴定。从家鸡气味物质中鉴定出69个化合物,其中脂肪醛、吲哚和对甲苯酚分别占全部分成的17. 4%、10. 77%和10. 67%。从鸽子气味和羽毛浸提液中鉴定出100个化合物。鸽子气味的主要成分是苯甲酸(2. 20%)、壬醛(2. 22%)和a-蒎烯(2. 23%),羽毛浸提液的主要成分是苯甲醛(3. 38%),胆甾烷醇(2. 38%)和肉豆蔻酸(2. 18%)。家鸡中鉴定出的两个羧基酸类(辛酸和肉豆蔻酸)以及2个芬芳类化合物(吲哚和对甲苯酚)对淡色库蚊具有引诱作用,而所有醛类则具有驱避作用。两种从鸽子中鉴定出的壬醛和苯甲醛,对蚊虫具有驱避作用。结果表明,宿主气味对蚊虫的驱避或引诱是一个复杂的机制主导,应该是多种气味物质的组合决定了宿主对蚊虫的作用类型。本研究为淡色库蚊引诱剂和驱避剂的开发提供技术基础。

摘要: 为了解广州市白纹伊蚊的抗药性水平及变化,本研究于2017年在广州市10个行政区的11个采样点采集幼虫和蛹,带回实验室饲养（F1～F3代）,采用WHO推荐的成蚊滤纸接触筒法对白纹伊蚊的抗药性进行监测。羽化3 d的雌性成蚊分别接触0.05%溴氰菊酯、0.75%氯菊酯、5%马拉硫磷、0.1%恶虫威和4%DDT药膜,分别计算KDT₅₀、KRR₅₀和24 h死亡率。结果显示,监测点白纹伊蚊对溴氰菊酯的KDT₅₀为34～62 min,KRR₅₀为1.79～3.26,死亡率为46%～77%;对氯菊酯的KDT₅₀为36～77 min,KRR₅₀为1.33～2.85,死亡率为60%～87%;对马拉硫磷的KDT₅₀为29～65 min,KRR₅₀为0.97～2.17,死亡率为99%～100%;对恶虫威的KDT₅₀为45～166 min,KRR₅₀为1.67～6.15,死亡率为9%～86%;对DDT的死亡率为7%～54%。实验结果显示广州市区范围内白纹伊蚊除对马拉硫磷敏感外,对溴氰菊酯、氯菊酯、恶虫威和DDT均存在抗性;与2014年调查结果相比,白纹伊蚊对溴氰菊酯和氯菊酯抗性程度升高,对DDT的抗性水平仍在继续升高。

摘要: 本文旨在探讨白纹伊蚊Aedes albopictus唾液腺匀浆粗蛋白(salivary gland extract,SGE)血小板聚集抑制和抗凝血活性,为后续单个唾液蛋白在蚊虫吸血中的功能研究奠定基础。采用比浊法检测低、中、高浓度SGE在不同血小板聚集激活剂作用下对人血小板聚集活性的影响,手工法检测不同浓度SGE对人全血部分凝血活酶时间,凝血酶原时间,凝血酶时间的影响。结果显示,低浓度SGE对Ⅰ型胶原诱导的血小板聚集有显著抑制作用,随着浓度升高具有明显的量效关系,最高抑制率可达90. 36%;高浓度SGE对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用。SGE对ADP诱导的血小板聚集无明显抑制作用。SGE对人血浆APTT、PT、TT均有延迟效应,1. 25 ng/m L SGE即对TT有显著延迟效应。研究结果表明,白纹伊蚊SGE不仅对胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用,而且可作用于血液级联凝集全过程。

摘要: Aa CPR100A是本实验室从埃及伊蚊RNAseq数据库中获得的预测与表皮结构相关的基因。本文拟通过生物信息学和分子生物学技术,探究埃及伊蚊表皮Aa CPR100A基因的序列特点,并分析其在埃及伊蚊的时空表达特征。埃及伊蚊表皮Aa CPR100A蛋白序列Aa CPR100A ORF长度为765 bp,编码254个氨基酸,蛋白分子量约为28.6 k Da,1～16位氨基酸残基为信号肽,其氨基酸序列中含有表皮蛋白CPR家族中的RR-1基序。埃及伊蚊与白纹伊蚊、致倦库蚊、冈比亚按蚊和黑腹果蝇的氨基酸同源性分别为95%、72%、61%、54%。qRT-PCR结果显示Aa CPR00A基因在表皮和卵期表达量最高,并随发育阶段呈现显著递减变化。结果表明,埃及伊蚊Aa CPR100A表达具有时空和组织特异性特征。

摘要: 埃及伊蚊serpin23(丝氨酸蛋白抑制剂23)在雌蚊唾液腺特异高表达,是蚊虫唾液组分的主要蛋白之一。本文设计特异性引物序列,采用RT-PCR技术扩增获得埃及伊蚊广东电白株serpin23成熟肽序列,构建重组表达质粒pET-28a(+)-serpin23并测序验证。经IPTG诱导表达、KCl染色、切胶纯化获取了目的蛋白;制备了小鼠特异性抗serpin23蛋白多克隆抗体。结果显示:获得serpin23成熟肽序列,全长1 197bp,编码399个氨基酸。等电点pI为6.13,具有serpin结构域和一个功能未知的FAINT结构域。pET-28a(+)-serpin23重组质粒可表达了大小约为47 kDa、以包涵体表达为主的融合蛋白。Western Blot结果证明serpin23重组蛋白可以与抗-His标签和抗-serpin23抗体发生免疫反应,约47 kDa处产生特异性条带。本研究成功获得了埃及伊蚊广东电白株serpin23重组表达蛋白和抗serpin23多克隆抗体,为后续功能研究奠定基础。