摘要: 本研究通过扩增测序共获得了148条口虾蛄线粒体COⅠ基因序列,定义了52个单元型,其中存在63个变异位点。在黄渤海海域中,盐城口虾蛄种群的遗传多样性最高;渤海与黄海海域口虾蛄群体间遗传分化指数(Fst)为0.006 12。经MEGA 4.0软件计算得知11个种群间的遗传距离为0.0009～0.0057,而渤海与黄海两大海域间的遗传距离为0.0043。系统发生关系显示,渤海与黄海海域的单倍型呈交错聚集状态,说明两大海域间不存在显著的遗传分化。本次研究初步评估了两个海域的口虾蛄种群的遗传多样性水平,为渤海海域与黄海海域口虾蛄种质资源保护提供了基础资料。

摘要: 以不同铜离子添加水平(0 mg·kg-1、10 mg·kg-1、25 mg·kg-1、40 mg·kg-1、55 mg·kg-1和110 mg·kg-1)的饲料喂养斑节对虾Penaeus monodon 8周,测定对虾血细胞中酚氧化酶原系统相关基因(pro PO1、pro PO2、PE、PPAF和BGBP)表达水平的变化。结果显示,与对照组相比,当铜添加水平为40～55 mg·kg-1时,proPO1的表达量显著上升;当铜添加水平为25～55 mg·kg-1时,pro PO2、PE和PPAF的表达量显著上升;铜添加水平对BGBP的表达量没有显著影响。血清PO活力也在铜添加水平为25～55 mg·kg-1时显著提高。这些结果表明,饲料中添加一定量的铜离子可诱导pro PO1、pro PO2、PE和PPAF表达量的上调,从而提高血清PO活力。根据上述结果,针对提高酚氧化酶原系统免疫功能,在本基础饲料配方中适宜的铜添加水平为25～55 mg·kg-1。

摘要: 采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术首次从秀丽白虾Exopalaemon modestus卵巢中克隆了PL10基因的cDNA全长序列。秀丽白虾的PL10基因(Em-PL10)cDNA全长2559 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)2154 bp,编码717个氨基酸。秀丽白虾PL10蛋白含有DEAD-box家族蛋白的8个保守结构域和GG重复序列,在N端具有5个RGG重复,与日本沼虾、中国明对虾、果蝇等相关蛋白的同源性分别为92%、81%和64%。亚细胞定位预测秀丽白虾PL10蛋白定位于细胞核中。系统进化分析显示秀丽白虾基于PL10基因的分子进化地位完全与形态学分类地位相吻合。半定量RT-PCR检测结果显示,Em-PL10 mRNA在各组织中均能表达,在卵巢中表达量最高,其次是精巢,而在胸神经节、鳃和肝胰腺中的表达量较少。

摘要: 细胞色素P450(CYP)酶系在机体的毒素、污染物和药物等代谢过程中发挥着重要作用,为深入了解对虾CYP基因的结构和功能,采用c DNA末端快速克隆技术得到凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei CYP家族基因CYP370C2的全长c DNA序列,共1 745 bp,包含1个1 464 bp的开放阅读框,编码487个氨基酸。CYP370C2基因序列中具有CYP蛋白特有的血红素结合区、Ⅰ螺旋保守区、C螺旋保守区和K螺旋保守区。同源性比对结果显示,凡纳滨对虾CYP370C2基因序列与三疣梭子蟹Portunus trituberculatus的CYP基因相似度最高,为64%。CYP370C2基因在所有检测的组织中均有表达,在肝胰腺中的表达量最高,鳃和肠道次之。在48 h的氨氮胁迫试验中,胁迫24 h后,肝胰腺和鳃中的CYP370C2基因相对表达量与对照组相比均显著上调,分别在48 h和24 h达到峰值。脂多糖(LPS)注射后,CYP370C2基因在肝胰腺中的相对表达量在3 h开始显著上升,在12 h达到最大值; CYP370C2基因在鳃中的表达在LPS注射后的3 h和6 h被显著抑制,12 h恢复至对照组水平,随后在24 h和48 h显著上调。这些实验结果显示,CYP370C2基因参与了氨氮胁迫响应和LPS刺激响应,表明CYP370C2基因可能在凡纳滨对虾抗环境胁迫和抗病原体的免疫防御过程中均发挥重要作用。

摘要: 本研究以Cu²⁺(0、100μg·L^-1)对罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii进行处理,分别在胁迫后的0 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h收集血淋巴,检测血细胞中的细胞凋亡率、活性氧（ROS）含量、酯酶活性、一氧化氮（NO）含量以及细胞凋亡执行分子caspase-3和免疫因子α-2M基因的表达。结果显示,血细胞凋亡率和ROS含量的变化趋势一致,在胁迫后的6～48 h显著升高（P<0.05）。酯酶活性在胁迫后的3～48 h均显著下降（P<0.05）,最低值出现在48 h。在胁迫后的6～48 h,NO含量持续增加,并与对照组的差异有统计学意义（P<0.05）。caspase-3的相对基因表达量在胁迫后的6～48 h均显著升高（P<0.05）,并在24 h达到最高值。在胁迫后的12 h,α-2M基因的表达量显著升高（P<0.05）并达到峰值,在24 h有短暂降低,但与对照组相比仍显著增加（P<0.05）,在48 hα-2M基因的表达量显著降低（P<0.05）。相关性分析显示,血细胞凋亡率和NO以及ROS都呈显著的正相关（P<0.001）。实验表明,Cu²⁺胁迫显著抑制了机体的酯酶活性,诱导NO和ROS的产生以及免疫相关基因α-2M的表达来对抗Cu²⁺胁迫带来的损伤。随着胁迫时间的延长,过高浓度的NO和ROS对机体自身造成了伤害,并诱导凋亡相关基因caspase-3的表达,最终导致细胞凋亡,说明Cu²⁺对虾类具有免疫抑制性和毒性。NO和ROS的升高可能是细胞凋亡的主要诱因。