摘要: 为了研究斑节对虾α-淀粉酶基因的结构和生物学功能,根据原实验室构建的斑节对虾(Penaeus monodon)c DNA文库得到的EST序列,利用RACE技术获得了斑节对虾α-淀粉酶基因(Pm Amy)的c DNA全长序列。该基因序列全长2465 bp,包括2175 bp的开放阅读框,编码724个氨基酸,分子总量为78.9 k D,理论等电点为4.66。Pm Amy包含一个α-淀粉酶家族保守的A结构域(Thr~(34)-Ser~(410))和一个C结构域(Glu~(420)-Ala~(496))。Pm Amy氨基酸序列与其他物种的相似性为47%—99%,利用Pm Amy构建的进化树显示斑节对虾和凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的亲缘关系最近。基因表达结果显示Pm Amy在肝胰腺组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。斑节对虾Pm Amy基因在卵巢发育的过程中均有表达,表达量有所变化,虽然没有发现显著性的差异(P=0.09)。斑节对虾Pm Amy在整个生长阶段的检测中都有表达,其中幼体发育过程中存在显著性差异,糠虾时期Pm Amy表达量显著高于无节幼体、溞状幼体和仔虾时期(P<0.05)。以上实验结果初步说明了Pm Amy可能与斑节对虾的幼体发育相关。

摘要: 以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,通过分子筛层析、Tricine-SDS-PAGE、Westernblotting、凝集实验、抑菌实验和Edman N端测序等方法探索血蓝蛋白酶解多肽的凝集和抑菌活性。结果发现,血蓝蛋白经胰蛋白酶酶解后可产生分子量约为6—70 k D的7条多肽,该酶解混合物对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)具有显著的凝集活性,与未酶解的血蓝蛋白相比,其凝集活性可提高4—16倍。在此基础之上,进一步分离纯化该7条多肽,发现多肽-3对副溶血弧菌表现出较强的抑菌活性,且具有较好的浓度依赖性。在浓度为75μg/m L时,其抑菌率为(93.76±1.60)%,与阴性对照组相比,存在极显著性差异(P<0.01)。进一步研究显示该多肽位于血蓝蛋白N端α-螺旋区域。由此推测,凡纳滨对虾血蓝蛋白在体外经胰蛋白酶酶解后可产生具有凝集、抑菌等免疫活性的多肽,这对研究血蓝蛋白的降解机制及其在先天免疫中的作用具有重要意义。

摘要: 为了研究抗脂多糖因子ALFs在日本沼虾先天性免疫中的功能作用,研究从日本沼虾中克隆了2种抗脂多糖因子Mn ALF1、Mn ALF2。Mn ALF1 c DNA全长1008 bp,编码121个氨基酸;Mn ALF2 c DNA全长836 bp,编码124个氨基酸。这2种氨基酸均包含有一个信号肽序列和一个LPS结合位点,并且在结合位点的两端(N-端和C-端)都有2个保守的半胱氨酸残基。这2种Mn ALFs与之前发现的甲壳动物的ALFs是非常相似的。q RT-PCR结果显示Mn ALFs在所有被检测的组织中均有表达。其中Mn ALF1主要在心脏和小肠内表达,而Mn ALF2则主要在血细胞和肝胰脏中表达。在用嗜水气单胞菌刺激之后发现2种Mn ALFs在心脏、小肠、血细胞、肝胰脏中都呈现出明显的时间依赖表达模式(Mn ALF1在刺激之后呈现出先减少后增加的趋势,之后分别在不同组织的不同时间点达到最大值;然而,对于Mn ALF2,在心脏和小肠中先减少后增加,在血细胞和肝胰脏中呈现出先增加后减少,最后都在24h达到最大值)。结果提示这2种Mn ALF具有不同的组织特异性,并且在细菌侵染的免疫防御中起着重要的保护作用。

摘要: 通过对洞庭湖克氏原螯虾肌肉成分进行分析,并与其他产地克氏原螯虾进行比较,进而较为科学的评定其品质特性。结果表明:克氏原螯虾含肉率为20.21%,水分和灰分含量分别为79.46%和1.17%,粗蛋白和粗脂肪含量分别16.67%和0.77%;对肌肉的质构特性分析表明克氏原螯虾肌肉硬度小,易咀嚼;肌肉中含18种氨基酸,其中包括8种必需氨基酸,必需氨基酸指数为80.02%,氨基酸总含量为16.06%,鲜味氨基酸含量为5.98%;依据氨基酸化学评分,克氏原螯虾的第一限制性氨基酸是含硫氨基酸(甲硫氨基酸和胱氨酸),第二限制性氨基酸是缬氨酸。测定了克氏原螯虾肌肉中15种脂肪酸占肌肉鲜质量的含量,其总脂肪酸含量为6.66‰,其中不饱和脂肪酸含量为4.94‰,n-3与n-6多不饱和脂肪酸比值为1.73。综上所述,洞庭湖克氏原螯虾具有较高的食用价值和养殖价值。

摘要: 采用在基础饲料中分别添加0、130和260 mg/kg的合成虾青素配制成3种粗蛋白和粗脂肪含量分别为42%和16%的等氮等脂的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)育肥饲料(分别记为饲料1、2和3),以中华绒螯蟹商业育肥饲料作为饲料4,分别投喂4组雌蟹(每个饲料组3个重复水槽,每个水槽中12只蟹),进行为期60d的室内养殖实验,以探讨添加合成虾青素对中华绒螯蟹成体雌蟹性腺发育、色泽及抗氧化能力的影响。结果显示:(1)实验进行到30d和60d,在饲料中添加虾青素对雌体肝胰腺指数(HSI)和性腺指数(GSI)均无显著影响(P>0.05)。(2)性腺、肝胰腺和头胸甲中的总类胡萝卜素含量和红度值(a值)均以饲料3组最高,性腺亮度值(L值)和黄度值(b值)以饲料1组最高(P<0.05);饲料2组头胸甲的b值最高,饲料1组最低(P<0.05)。(3)饲料1组中华绒螯蟹血清过氧化物酶(POD)活性显著高于其他组,饲料4组的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、乳酸脱氢酶(LDH)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和乳酸(LD)含量最高(P<0.05);肝胰腺中的SOD、T-AOC、GSH-Px和GR活性均以饲料1组最高,饲料2组最低(P<0.05)。(4)饲料2组血清酸性磷酸酶(ACP)活性和血蓝蛋白(Hc)含量显著高于其他组,其余各组间差异不显著。血清中的碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性和一氧化氮(NO)含量均以饲料4组最高(P<0.05),肝胰腺中的ACP、ALP和γ-GT活性以饲料1组最高。综上,在育肥饲料中添加合成虾青素对成体雌蟹性腺发育无显著影响,但可显著提高头胸甲、肝胰腺和卵巢中的类胡萝卜素总量、色泽和抗氧化能力,建议雌蟹育肥饲料中合成虾青素的含量为90 mg/kg左右。