摘要: 探索了虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)食道下神经细胞急性分离培养条件,并利用全细胞膜片钳技术对虎纹捕鸟蛛食道下神经细胞电压门控性钠、钾和钙通道的基本电生理学特性进行了研究。适合虎纹捕鸟蛛神经细胞离体培养的培养基为(g/L):葡萄糖0.7,果糖0.4,琥珀酸0.06,咪唑0.06,L-1513.7,Hepes 2.38,酵母粉2.8,乳白蛋白2.5,青霉素200 IU/ml,链霉素200 mg/ml,小牛血清15%;pH6.8。该培养基非常适合虎纹捕鸟蛛神经节神经细胞离体培养,细胞在温度(27±2)℃的培养箱中培养24h,培养的细胞数目多、结构完整、贴壁效果好,细胞近似汤勺形,有一个长的单极突起,大部分细胞在1030μm之间。全细胞模式下可以记录到钠、钾和钙三种电压门控离子通道电流。钙电流为高电压激活电流,该电流能够被NiCl2完全抑制;钾电流为瞬时钾电流和延迟整流钾电流,这两类钾电流分别被细胞外液中的4-氨基吡啶和氯化四乙胺所阻断;钠电流为TTX敏感型电流。

摘要: 【目的】烟田一般多种害虫同时发生，为明确烟田蛾类害虫性诱芯之间的相互作用。【方法】采用性诱芯两两叠加的方法，调查并比较烟田斜纹夜蛾Spodoptera litura、棉铃虫Helicoverpa armigera、烟青虫Helicoverpa assulta和小地老虎Agrotis ypsilon性诱芯之间的相互作用。【结果】小地老虎诱芯与烟青虫诱芯复合使用，对小地老虎的诱捕量显著多于小地老虎诱芯单独使用，两者的平均诱捕量分别为（2.83±0.95）头/诱捕器/d和（1.17±0.79）头/诱捕器/d；这种复合诱芯对烟青虫的诱捕量也显著多于烟青虫诱芯单独使用，两者的平均诱捕量分别为（3.00±1.46）头/诱捕器/d和（0.83±0.54）头/诱捕器/d。斜纹夜蛾诱芯单独使用对斜纹夜蛾的诱捕量最多，为（7.83±1.97）头，小地老虎诱芯、棉铃虫诱芯和烟青虫诱芯分别与斜纹夜蛾诱芯复合，对斜纹夜蛾的诱捕量均会显著下降，这3种复合诱芯的诱捕量分别为（2.17±1.08）、（2.67±1.26）和（4.33±1.89）头/诱捕器/d。【结论】烟青虫性诱芯和小地老虎性诱芯复合的诱集效果对2种靶标均表现显著的增效作用，而斜纹夜蛾性诱芯无论和其他任一种类性诱芯复合使用均表现为拮抗作用。

摘要: 【目的】鉴定小地老虎Agrotis ipsilon sigma家族谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因,明确其编码蛋白质的催化活性,阐明该基因在小地老虎不同发育期、不同组织及在毒死蜱和高效氯氟氰菊酯胁迫下的表达模式,为深入探究小地老虎GST在杀虫剂解毒代谢中的功能提供理论基础。【方法】利用同源检索方法从小地老虎转录组中鉴定GST基因,利用原核表达系统表达重组蛋白并使用试剂盒检测其活性,使用实时荧光定量PCR技术分析基因的表达模式。【结果】从小地老虎转录组中鉴定了一个编码sigma家族GST的cDNA序列,命名为AiGSTs1。其编码的AiGSTs1蛋白含有谷胱甘肽结合位点和底物结合位点,具有GSTs的典型特征。在大肠杆菌中成功表达了重组AiGSTs1蛋白,测得此蛋白不仅具有谷胱甘肽转移酶活性,还具有过氧化物酶活性。毒死蜱和高效氯氟氰菊酯均可抑制重组AiGSTs1蛋白的活性。AiGSTs1在供试的小地老虎不同发育期和组织中均有表达,但在蛹期和幼虫脂肪体中表达量最高。使用LD50剂量毒死蜱和高效氯氟氰菊酯处理小地老虎幼虫后,AiGSTs1的表达水平显著上升。【结论】本研究明确了小地老虎AiGSTs1的序列、所编码蛋白的活性和表达模式。毒死蜱和高效氯氟氰菊酯能够诱导AiGSTs1表达水平上调,表明该基因可能在这2种杀虫剂的解毒代谢中起重要作用。

摘要: 【目的】昆虫UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)在其内源性和外源性有毒化合物的解毒代谢过程中起着重要作用,但在管纹艳虎天牛Rhaphuma horsfieldi中UGT基因的研究尚属空白。【方法】采用转录组学、生物信息学、进化和表达谱分析、蛋白同源建模等技术研究了管纹艳虎天牛的UGT基因家族。【结果】从管纹艳虎天牛转录组中一共鉴定到36个RhorUGTs基因,其中17个具有全长序列。鞘翅目不同种间UGT基因数量的比较表明,管纹艳虎天牛具有中等数量的UGT基因。进化分析结果表明,RhorUGTs分布在10个亚家族中,其中UGT352亚家族为天牛科昆虫所特有,且该亚家族中RhorUGT2/7/10/16/18/27可能通过基因的复制产生。表达谱结果表明,大部分RhorUGTs基因在检测的所有组织中均有表达,部分基因呈现触角或跗节特异或高表达的特点,暗示它们具有嗅觉或触觉等功能。三级结构分析发现,RhorUGT17的α3、α4、β4和β5主要参与UDP-葡萄糖的结合。【结论】本研究明确了管纹艳虎天牛UGT基因的数量、序列特征、进化关系及组织表达特征,研究结果为该种天牛解毒代谢机制的阐明奠定基础。

摘要: [目的]记述了云南元江虎斑蝶Danaus genutia(Cramer)种群的全虫期形态特征、幼期发育历期、在云南昆明温室中的代生活史和生殖力、寄主范围、成虫及幼虫的行为习性,为该高观赏价值蝶种的规模化养殖提供依据。[方法]通过在气候箱内单虫饲养观察个体发育史,建立温室实验种群收集种群生活史资料,结合实验种群和野生个体观察了解幼虫和成虫习性;根据成虫对多种植物的同时选择产卵、成虫对单种植物的顺序选择产卵及幼虫取食和发育情况判定幼虫寄主植物。[结果]在25℃恒温条件下,虎斑蝶从卵到成虫羽化历时2227 d;在温室自然变温条件下(16.536.4℃),雌成虫从卵发育至产卵需3540 d;成虫雌雄性比为1:1.26,单雌平均产卵量为64.84粒;虎斑蝶元江种群的唯一确认寄主为鹅绒藤属的两种植物,青羊参Cynanchum otophyllum和峨眉牛皮消C.giraldii。[结论]虎斑蝶元江种群中存在明显的体表色斑多态性,这种警戒色多态性可能是地理种群间基因交流的结果,也可能是种群内的稳定多态性,有待进一步研究;除了萝藦科鹅绒藤属的2种植物,其他多种被文献报道为虎斑蝶寄主的植物被证明非元江虎斑蝶种群的寄主植物。