摘要: 昆虫非滞育、冬滞育和夏滞育蛹具有不同的生理和发育过程。本研究以葱蝇Delia antiqua作为模式种,以黑腹果蝇Drosophila melanogaster蛹的发育形态特征和命名为参照,用解剖、拍照、长度测量和图像处理等方法系统地比较研究了非滞育、冬滞育和夏滞育蛹的发育历期和形态变化,重点在头外翻和滞育相关发育和形态特征,目的在于弄清非滞育、冬滞育和夏滞育蛹发育和形态特征差异,为滞育发育阶段的识别、滞育分子机理研究奠定形态学基础。冬滞育蛹的滞育前期、滞育期和滞育后期分别为4,85和27d,夏滞育蛹的滞育前期、滞育期和滞育后期分别为2,8和22d。从化蛹至头外翻完成为滞育前期,头外翻完成约10h内复眼中央游离脂肪体可见。头外翻的完成是滞育发生的前提,非滞育、夏滞育和冬滞育蛹头外翻发生在化蛹后的48,36和83h,在头外翻过程中发育形态没有差异。头外翻的过程为:首先,头囊和胸部附肢从胸腔外翻,头部形态出现;然后,腹部肌肉继续收缩,将血淋巴和脂肪体推进头部及胸部附肢。葱蝇蛹在完成蛹期有效积温约15%时进入冬滞育或夏滞育。在滞育期,蛹的形态一直停留在复眼中央游离脂肪体可见这一形态时期,且冬滞育和夏滞育的蛹在形态上没有区别。在体长、体宽和体重上,冬滞育蛹最大,夏滞育蛹次之,非滞育蛹最小。在滞育后期,在黄色体出现期间,非滞育蛹的马氏管清楚可见,呈绿色,而滞育蛹的马氏管几乎不可见。本研究为认知昆虫滞育生理、从发育历期和形态上推断滞育发育进程提供了依据。

摘要: 葱蝇Delia antiqua(Meigen)具有冬滞育的特性且与黑腹果蝇Drosophila melanogaster近缘。该研究目的在于构建葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库,为进一步的冬滞育专化基因筛选、克隆、和表达分析奠定基础。利用RNAiso试剂盒提取葱蝇冬滞育蛹的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,经SfiⅠ酶切消化后,将cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB。经鉴定,原始文库的滴度为2.4×107cfu/mL。随机挑取15个克隆,经PCR快速鉴定,插入片段大小在0.5～3kb之间,平均大小在1kb左右,重组率达100%。结果表明该研究获得高质量的葱蝇冬滞育蛹cDNA文库。