摘要: 为了全面评估草鱼的耐碱性能,研究对草鱼“沪苏1号”在低（10 mmol/L,AW-10）、中（30 mmol/L,AW-30）和高（50 mmol/L,AW-50）3个NaHCO₃碱度梯度胁迫7d的重要生理响应参数及鳃组织相关基因表达进行了检测和分析。结果发现:在氨氮代谢方面,随碱度升高,血氨含量呈增加态势,AW-50组含量显著升高,但中、低碱度组和淡水对照组无显著差异（P>0.05）,血清尿素氮含量均低于淡水对照组。谷氨酸脱氢酶（GDH）活性及鳃rhbg、rhcga和glud1a在中、高碱度组均上调表达,表明草鱼可能通过提高鳃氨转运基因高表达及激活GDH途径进行氨解毒,维持其中、低碱度的血氨稳定。在免疫应答方面,尽管不同碱度组3种免疫细胞数量（白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数）均与淡水对照组无明显差异,但随着碱度的升高,3种免疫细胞数量呈先下降后上升的趋势,AW-50与对照组相比数量增多。免疫相关基因c3在碱度处理组均显著高表达,il-1β在高碱度组显著上升,tnf-α在中碱度组显著高表达,中、高碱度组发生了较为严重的炎症反应。在离子和渗透压调节方面,不同碱度组草鱼4种血清离子含量(Na⁺、Cl^-、K⁺、Ca²⁺)均与淡水对照组相比无显著差异（P>0.05）,但Na⁺含量随碱度升高呈下降趋势,AW-50组含量最低;尽管鳃钠钾ATP酶（NKA）活性在AW-30和AW-50组显著低于淡水对照组（P<0.05）,但其对应基因ATP1a1b和ATP1a3b在AW-30组极显著上调表达,推测基因表达可能与其蛋白合成滞后有关。在血氧运输方面,不同碱度组常氧条件下草鱼鳃血红蛋白生成基因hbaa2和hbba1表达被显著抑制,但血液红细胞数、血红蛋白含量和血清铁含量随碱度升高呈增加态势,且在AW-50组达到最高,表明机体出现缺氧症状。综合分析来看,碱度≤30 mmol/L,草鱼基本能够维持生理稳态,高于30 mmol/L碱度临界值,因氨中毒和组织细胞缺氧造成死亡的风险将显著增加。因此,研究判定草鱼的耐碱性能为中等,具备选育耐碱新品种的潜力,适于在碱度≤30 mmol/L水体中增养殖。

摘要: 为研究饲料中添加大型海藻对感染呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠道菌群和免疫的影响,在草鱼饲料中分别添加5%的马尾藻(Sargassum hemiphyllum)、紫杉状海门冬(Asparagopsis taxi-formis)、龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)藻粉,饲喂草鱼2个月。采用腹腔注射,构建草鱼GCRV感染模型,分析宿主肠道微生物群落和免疫响应。结果显示,饲料中添加大型海藻显著提高了健康草鱼肠道菌群的多样性,改变了特有微生物数量。有效减缓了GCRV感染1d后的草鱼肠道菌群多样性的降低,缩小了GCRV感染4—7d草鱼肠道菌群的组间差异,降低了感染后肠道菌群的紊乱。其中饲料中添加马尾藻和龙须菜组肠道中弧菌属(Vibrio)相对丰度显著降低;饲料中添加马尾藻组肠道中鲸杆菌属(Cetobacterium)相对丰度降低,而拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度增加。共现网络分析显示,大型海藻提高了感染GCRV的草鱼肠道菌群现网络的复杂度,增强肠道菌群的稳定性。蛋白表达结果显示,感染后1d,饲料中添加马尾藻组草鱼血清中促炎补体成分C5a含量增加,而饲料中添加龙须菜组补体成分C5a含量降低。相关性分析表明,补体蛋白C5、C5a成分及其受体(C5aR)的上调表达与肠道中致病菌群相对丰度显著正相关,而与碳水化合物和膳食纤维消化菌群负相关。综上,饲料中添加大型海藻缓解了GCRV感染对草鱼肠道菌群带来的不利影响,并调节感染草鱼的补体表达,可为从饲料开发方面防控草鱼出血病提供新思路。

摘要: 为了解长链非编码RNA在GCRV感染草鱼过程中的分子调控机制,对GCRV攻毒的草鱼肾脏细胞(CIK)进行长链非编码RNA组学测序,在此基础上,筛选出在GCRV攻毒前后差异表达明显的lncRNA1153(PP712057)。利用qRT-PCR技术对lncRNA1153在草鱼CIK细胞中的时空表达水平进行检测,发现在GCRV感染细胞后, lncRNA1153的表达水平在稳步上升至32h达到峰值。在CIK细胞内对lncRNA进行过表达实验,发现在lncRNA1153过表达的细胞系中,在GCRV攻毒后,干扰素的mRNA表达水平上调。同时,通过在CIK细胞内进行过表达及RNA pull-down实验,将富集的蛋白质进行质谱分析,从中筛选出P62蛋白进行深入研究。qRT-PCR验证发现,在草鱼肝脏、肾脏等组织及CIK细胞中, lncRNA1153与P62的表达趋势大致相同。进一步的研究发现, GCRV感染CIK细胞后,过表达lncRNA1153与P62都对GCRV病毒蛋白的复制起到抑制作用。研究表明长链非编码RNA在草鱼拮抗GCRV感染的先天性免疫机制中发挥重要作用,为未来设计针对GCRV感染的lncRNA靶向治疗提供参考。

摘要: 为探究瘦身养殖模式对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌肉品质的影响,研究比较了对照鱼和经8个月瘦身养殖后的瘦身鱼的形体数据、质构特性、一般营养成分、异味物质、氨基酸和脂肪酸等指标。结果显示,瘦身鱼肥满度、脏体指数、肝体指数及腹脂指数均显著低于对照鱼(P<0.05);瘦身鱼肌肉硬度、弹性、胶黏性、咀嚼性和剪切力均显著大于对照鱼(P<0.05);瘦身鱼肌肉中粗脂肪和粗蛋白显著低于对照鱼(P<0.05),灰分与对照鱼无显著差异(P>0.05),但水分显著高于对照鱼(P<0.05);瘦身鱼和对照鱼肌肉中均未检出土臭素(GSM)和2-甲基异茨醇(2-MIB);瘦身鱼肌肉中氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸总量(TEAA)及鲜味氨基酸总量(TDAA)均显著高于对照鱼(P<0.05);瘦身鱼肌肉中多不饱和脂肪酸(PUFA)、n-3 PUFA、n-6 PUFA、EPA和DHA占脂肪酸总量的百分比均显著高于对照鱼(P<0.05)。研究表明,瘦身养殖模式能有效改善草鱼体型,提高其肌肉品质。相关研究结果可为草鱼瘦身养殖模式的探索提供基础资料,为养殖生产实践提供参考。

摘要: 以草鱼ZC7901细胞株为材料,观察鱼类细胞从间期染色质到中期染色体的包装过程。主要通过:(1)分裂期与间期细胞融合,诱导染色体早熟凝集;(2)染色体“伸长”处理;(3)培养细胞的低渗处理;(4)染色质铺展等方法,制作染色体标本,进行扫描和透射电镜观察。 观察表明,鱼类染色质的基本结构与哺乳类细胞相同,也是直径约10nm的核丝(Nucleofilament)。染色体的色装有两种形式:一种是多级螺旋化形成直径约300nm的染色单体,再经过一次绞合,形成约600nm的染色体;另一种是从30nm或60nm的螺线管直接折叠交联包装,其间也伴有部分不规则螺旋的纤丝形成染色体。本文认为:前一种螺旋化是草鱼染色体的正常包装,后一种折叠交联是染色体的快速早熟包装。