摘要: 实验以初重(99.98±0.69) g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为研究对象,研究饲料中发酵芝麻粕替代菜粕蛋白对草鱼生长性能、肠道形态和微生物以及小肽转运相关基因表达的影响。添加0、5%、10%和15%发酵芝麻粕分别替代菜粕蛋白0、11.8%、23.5%和35.1%,配制4组等氮等脂的饲料,分别为对照组、实验1组、实验2组和实验3组。实验在室内循环水养殖系统中进行,每组3个重复,每一重复饲喂20尾鱼,每天饱食投喂2次,实验共持续45d。结果发现:各处理组间草鱼增重率、特定生长率和蛋白质效率均无显著差异,实验1组和2组略高于对照组(P>0.05);组间饵料系数也无显著差异,实验1组和2组略低于对照组(P>0.05)。实验组草鱼肠绒毛高度均显著高于对照组(P<0.05),而实验组隐窝深度小于对照组(P>0.05),绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C)在实验组也显著高于对照组(P<0.05)。随着发酵芝麻粕替代比例的增加,乳酸杆菌(Lactobacillus)和芽孢杆菌(Bacillus)占比显著上升(P<0.05),而大肠杆菌(Escherichia coli)和气单胞菌(Aeromonas)占比显著下降。小肽转运相关基因方面,尾型同源盒基因2 (CDX2)、特异性蛋白1 (Sp1)和小肽转运蛋白1 (PepT1)基因mRNA相对表达量均随着发酵芝麻粕替代比例的增加呈现先显著上调后下调的趋势,且均在实验1组时达到最大值(P<0.05)。综合考量鱼体生长性能、肠道黏膜形态、菌群及小肽转运相关基因表达方面,草鱼饲料中发酵芝麻粕蛋白适宜替代菜粕蛋白的比例为11.8%—23.5%。

摘要: 为评估微囊藻毒素-LR (MC-LR)对鱼类自噬的影响,根据转录组测序结果得到的EST序列,采用RACE技术获得了草鱼(Ctenopharygodon idella)自噬基因Beclin1 (CiBeclin1)的cDNA全长序列。该基因序列全长1590 bp,包括1344 bp的开放阅读框,编码447个氨基酸,分子量为51.2 kD,理论等电点为4.88。CiBeclin1包含1个BH3和1个ECD结构域。CiBeclin1氨基酸序列与其他物种的相似性为88%—98%,构建的进化树显示CiBeclin1与稀有鲫(Gobiocypris rarus)的Beclin1亲缘关系最近。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测结果表明, CiBeclin1在肝、肾、脾等10种不同组织中均广泛表达,但在肝脏组织中的相对表达量最丰富,显著高于相对表达量最低的头肾组织(P<0.05)。在不同剂量(25和100μg MC-LR/kg BW) MC-LR胁迫24h、48h、72h和96h后,草鱼肝脏中CiBeclin1表达量均显著低于对照组的表达水平,研究结果表明, MC-LR能抑制草鱼CiBeclin1的表达,但MC-LR是否在该剂量下诱导了草鱼的自噬还有待于进一步研究。

摘要: 为研究草鱼(Ctenopharyngodon idella)在摄食高能饲料后血清生化指标的动态变化,选择均重为(55.0±2.5) g的健康草鱼320尾,随机分成4组,每组4个重复,分别以3组高能纯化饲料(分别以额外的蛋白质、脂肪、糊精供能,高能饲料组较对照组总能量提高11%)及对照组饲料喂养草鱼11周后,将鱼体禁食48h后采样(对照),再饱食投喂,在摄食后的2h、8h和24h取样,测定实验鱼8种血清生化指标,并对采样时间点(T)和不同饲料(D)进行双因素方差分析。为确保实验结果的准确性,需要保证不同处理组的采样时间同步性,即均在餐后同一时间点采样。结果显示:除血清总胆固醇(TCHO)含量外,血清碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性,以及血清甘油三酯(TAG)、葡萄糖(GLU)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量均受到采样时间点(T)即餐后时间的显著影响,饲料(D)对上述8个指标亦均有显著影响,且两者存在交互作用。草鱼血清GLU含量和血清AST活性均在餐后2h达到峰值,血清ALT和ALP活性以及LDLC含量均在餐后24h达到峰值,血清TAG含量在餐后8h达到峰值,而血清TCHO和HDLC含量则无明显峰值。在餐后24h, 3个高能组的ALT活性和GLU含量较对照组显著升高,血清AST和ALP活性以及TAG、TCHO和HDLC含量较对照组无显著差异。上述结果表明,草鱼血清生化指标受到餐后采样时间点和饲料的显著影响。

摘要: 为探讨草鱼高脂(7%)实用日粮磷酸二氢钙(MCP)适宜添加量对草鱼生长性能、脂质代谢及抗氧化能力的影响,以磷酸二氢钙[Ca (H2PO4)]为磷源,配制含MCP分别为0(对照组)、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%的5种等氮等能实用日粮,饲喂初始均重为(105.23±0.55) g的试验草鱼,每种日粮设置3个重复,每个重复15尾鱼,进行为期8周的养殖试验。结果显示:在高脂日粮中添加适宜的MCP可显著增加草鱼增重率(WGR)和全鱼磷含量,降低饲料系数(FCR)和脏体比(VSI)。以WGR、FCR和全鱼磷为观测指标,折线模型分析得出日粮MCP适宜添加量分别为3.26%、2.96%和2.63%;全鱼、内脏、肌肉和肝脏粗脂肪含量随日粮中MCP的增加呈先降后升趋势,而全鱼和肌肉粗蛋白含量则呈相反趋势;在MCP3.0%组,草鱼肠道淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活性,血清碱性磷酸酶(AKP)活性最高,血清甘油三酯、肝脏丙二醛含量,乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性最低;添加组血清总胆固醇含量均显著低于对照组(P<0.05),肝脏肉碱脂酰转移酶(CPT-I)活性随日粮MCP添加量增加而渐增。研究表明,草鱼高脂(7%)日粮中MCP适宜添加水平为2.96%—3.26%(饲料总磷1.43%—1.50%),该添加水平能促进草鱼对日粮中营养物质的消化利用,减少鱼体及肝脂蓄积,增加鱼体蛋白,提高抗氧化机能,促进生长。

摘要: 为揭示草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus, GCRV)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道菌群的影响,在通过人工浸泡方式感染GCRV后,采用针对16S rRNA基因的高通量测序技术对草鱼肠道菌群的组成和多样性进行了研究。结果显示,感染组与对照组差异显著(MRPP, Anosim, Adonis, P<0.01),且感染组肠道菌群的Alpha多样性指数(Shannon-Wienner、Inverse Simpson、Pielou evenness)显著低于对照组(t-test, P<0.05)。此外,肠道菌群在感染组个体间差异显著大于对照组(Wilcoxon test, P<0.05),表明患病草鱼肠道菌群失去原有平衡而变得紊乱。尽管病毒感染组和对照组草鱼肠道优势菌门均为Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidetes、Fusobacteria,但在OTU水平仍表现出明显的变化,如OTU_69(Pasteurellaceae)、OTU_504(Comamonadaceae)和OTU_1898(Cetobacterium)在感染GCRV组丰度显著降低(t-test, P<0.05),也表明GCRV感染可使草鱼肠道微生态发生紊乱。肠道菌群结构稳定对于宿主健康具有重要意义,研究患病鱼肠道菌群状况为鱼类常见疾病的防控提供科学依据,也为健康养殖提供参考。