摘要: 根据亲缘关系较近的鲤鱼胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )cDNA设计一对引物 ,通过RT PCR从草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝组织首次克隆了草鱼 IGF ⅠcDNA开放阅读框 (ORF)片段。经序列分析表明克隆的草鱼IGF ⅠcDNA为Ea 2亚型 ,ORF与鲤鱼有 95 %的同源性 ,与人有 6 3%的同源性 ;草鱼IGF Ⅰ蛋白与鲤鱼IGF Ⅰ仅 2个氨基酸残基不同 ,与人IGF Ⅰ也仅有 13个残基不同。将表达成熟草鱼IGF Ⅰ (gcIGF Ⅰ)蛋白的cDNA片段亚克隆至谷胱甘肽S 转移酶 (GST)融合表达载体 pGEX 4T 3,再将构建的重组表达载体 pGEX T gcIGF Ⅰ转入大肠杆菌BL2 1。在IPTG的诱导下 ,GST gcIGF Ⅰ融合蛋白高效表达。兔抗鲑鱼IGF Ⅰ抗血清进行的WesternBlot检测显示重组草鱼IGF Ⅰ蛋白具有免疫活性。

摘要:

摘要: 取草鱼经嗜水产气单胞菌疫苗免疫 ,获免疫血清分两组 ,一组样品经饱和硫酸铵分级沉淀、透析和电泳分析 ,另一组经SephadexG 2 0 0柱层析分离及电泳分析。各分离样品经特异性凝集活性测定 ,发现沉淀分离组样品中抗体凝集活性最强的主要为 35 %饱和硫酸铵沉淀的组分 ,而柱层析分离组样品的凝集抗体主要集中在第一个洗脱峰里。在电泳图谱中 ,各免疫组均比对照组增加了一条大分子B带 ,分子量为 30 9kD左右 ,后者经变性电泳分离表现为两条区带 ,相对分子量分别为 5 2kD和 2 6kD。因而推测它们是单体IgG解离的重链和轻链 ,而聚集在B带的是IgG的聚合形式IgM。

摘要: 超氧化物歧化酶 (SOD)是一种对生物细胞保护至关重要、在进化上比较保守的酶。因此 ,超氧化物歧化酶作为分子钟或分子标记已被广泛应用于生物进化研究、群体遗传结构分析以及品系鉴定。但鱼类SOD的生物化学和遗传学特性都尚未进行过系统和深入的研究。为使这一重要的分子标记能更好地应用于鱼类遗传育种、种质资源保护以及进化研究 ,本实验采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法 ,研究了草鱼线粒体型超氧化物歧化酶 (fm SOD)的同功酶形式 ,生化遗传表型、亚基组成以及金属类型。实验结果表明 ,草鱼fm SOD有三种不同的同功酶形式 ;按从正极到负极的排列分别命名为fm SOD 1 ,fm SOD 2 ,fm SOD 3。这三种不同的fm SOD在草鱼群体中可构成 3种不同的生化遗传学表型 :表型 1个体只含有迁移率最快的fm SOD 1同功酶 ;表型3个体只含有迁移率最慢的fm SOD 3同功酶 ;而表型 2个体中含有所有三种不同形式的同功酶。在野生草鱼群体中 ,存在所有三种表现型 ;而在基因纯合型的雌核发育草鱼群体中只检测到表型 1和表型 3。野生草鱼群体中三种表现型的个体数之比符合一对等位基因分离的 1∶2∶1孟德尔遗传分离比例。由这些实验结果得出以下结论 :(1 )草鱼fm SOD是由细胞核DNA上的基因所编码而不是由线粒体DNA上的基因所编码的

摘要: