摘要: 为了研究内质网应激相关基因需肌醇酶1(Inositol-requiring enzyme 1, IRE1-like)的结构和生物学功能及其在草鱼(Ctenopharyngodon idella)响应微囊藻毒素-LR(MC-LR)中的作用,研究根据草鱼转录组测序结果得到该基因家族成员IRE1-like的EST序列,采用RACE技术获得了草鱼IRE1-like基因的cDNA全长序列(登录号:MG797683)。该基因序列全长3595 bp,包括3093 bp开放阅读框,编码1030个氨基酸,分子量为116.24 kD,理论等电点为6.26,具有跨膜结构和信号肽。草鱼IRE1-like基因包含Luminal (39—307 aa)、STKc (569—834 aa)和RNase (837—915 aa)三个结构域。同源性和系统进化树结果表明草鱼IRE1-like基因与斑马鱼IRE1-α基因亲缘关系最近。荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结果表明,草鱼IRE1-like基因在肝脏组织中的表达量最高,在肌肉、脾脏、鳃和心脏等其他8种不同组织中也均有表达。不同剂量MC-LR诱导草鱼24h和96h后, 25μg MCLR/kg BW和100μg MC-LR/kg BW剂量组中草鱼肝脏IRE1-like基因表达水平分别在24h和96h显著上升(P<0.05)。以上结果初步说明了草鱼IRE1-like基因可能在MC-LR诱导草鱼内质网应激中起着重要的作用,为进一步研究草鱼IRE1-like基因的功能奠定了基础。

摘要: 为研究益生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对草鱼(Ctenopharyngodon idella)肝脏脂质代谢及抗氧化功能的影响,实验设置对照组(Con组)、Aeromonas hydrophila组(Ah组)、Aeromonas hydrophila+Bacillus subtilis组(Ah+Bs组)、Bacillus subtilis+Aeromonas hydrophila组(Bs+Ah组),三个实验组均腹腔注射1×105 CFU/fish嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),枯草芽孢杆菌饲料含菌量为1×107 CFU/g,实验周期为56d,并于第28和第56天取样。结果表明,与Ah组相比,投喂枯草芽孢杆菌饲料后,(1)体增重率、特定生长率显著增加(P<0.05);(2) 28d时肝脏油红O染色脂滴面积及脂肪含量显著下降(P<0.05);(3)调节血脂代谢及缓解肝脏损伤:血清胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量升高,谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05);(4)调节脂质代谢:28d时乙酰辅酶A羧化酶的表达水平下调,脂蛋白脂酶及脂肪甘油三酯脂肪酶的表达水平上调;(5)增强肝脏抗氧化能力、减少脂质过氧化的发生:肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽、总抗氧化能力提高;丙二醛及过氧化氢含量降低。综上,在饲料中添加益生枯草芽孢杆菌可以增强草鱼的抗氧化能力,缓解机体因嗜水气单胞菌感染造成的肝脏损伤,调节肝脏脂质代谢功能,减少脂质在肝脏中的积累,并促进草鱼的生长。

摘要: 研究选择一种新型分子标记——微单体型用于亲子鉴定,构建了高效的标记筛选和亲子鉴定流程,并以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为例评估了该亲子鉴定方法的效果。结果表明,利用基因组重测序数据能够准确完成微单体型标记的分型,效果和适应性明显优于传统的基于群体遗传学推断的分型;通过信息熵的大小能够高效筛选微单体型标记组合, 3个和5个微单体型标记的亲子鉴定结果与微卫星序列(SSR)鉴定结果的一致性分别达到97.08%和99.42%。研究表明使用微单体型分子标记可以快速而准确地完成鱼类的亲子鉴定工作。

摘要: 为揭示草鱼(Ctenopharyngodon idellus)树突状细胞(Dendritic cells)的生物学特性及益生芽孢杆菌对其免疫功能的影响,研究通过草鱼体外细胞培养技术分离获得草鱼DCs,对其形态学特征、生物学功能及膜表面标记分子的表达进行了分析鉴定; RT-PCR检测了益生芽孢杆菌对草鱼DCs免疫相关细胞因子表达的影响。结果表明草鱼DCs具有典型的树突状形态,可有效地激活T淋巴细胞的增殖并具有迁移能力。LPS刺激可促进其成熟过程,显著提升膜表面标记分子CD80/86、CD83的表达。这表明草鱼DCs和哺乳动物DCs在形态和功能上具有高度相似性。RT-PCR结果显示,在体外条件下使用紫外照射灭活的益生枯草芽孢杆菌对草鱼DCs进行刺激后,抗炎性因子IL-4, IL-10的表达水平显著提升(P<0.05),并在12h时达到峰值。这表明枯草芽孢杆菌可通过促进树突状细胞分泌抗炎性因子来影响其免疫功能。以上结果为进一步研究鱼类树突状细胞的生物学特性及益生芽孢杆菌对其免疫功能的影响提供了重要的依据。

摘要: 细胞因子信号抑制因子3 (SOCS3)是一类调节免疫反应的蛋白,为研究其在草鱼(Ctenopharyngodon idella)中的功能,文章克隆了草鱼SOCS3b基因,分析了SOCS3s基因在成鱼组织中的表达情况。序列分析结果显示,草鱼SOCS3b基因全长2126 bp,编码216个氨基酸。qRT-PCR结果显示,草鱼SOCS3a和SOCS3b在成鱼11个组织中均有表达,但表达略有差异。注射嗜水气单胞菌(Aerononas hydrophila)后,草鱼SOCS3a和SOCS3b在肝、脾、肠、肾中的表达均有明显上升。以上结果表明SOCS3s基因在草鱼的组织生长调控中发挥着重要的作用,且SOCS3s可以调节细菌诱导的免疫应答。研究将为后续草鱼SOCS3s基因的功能研究提供参考依据。