摘要:

摘要: 废弃塑料进入自然界后会分解为各种尺寸的塑料颗粒，其中纳米级塑料颗粒有一定的生物毒性.为探讨单细胞动物对纳米级塑料颗粒胁迫的响应，首先基于急性毒理试验和种群增长试验观察聚苯乙烯纳米颗粒（polystyrene nanoparticles,PSNPs，粒径20nm）对绿草履虫（Parameciumbursaria）的毒性效应，结果显示PSNPs对绿草履虫的生存和细胞分裂有明显的影响，并且有显著的致死效应（24 h半致死浓度为15.93 mg/L）.在此基础之上，选择13.5 mg/L的PS NPs处理草履虫后进行转录组分析（对照组PS NPs浓度为0 mg/L）.基于高通量测序的数据，从绿草履虫的PS NPs处理组与对照组间筛选到了371个差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs），包括298个表达上调的DEGs和73个表达下调的DEGs.基于DEGs共获得764个GO(gene ontology)显著富集条目（P <0.05），而富集最显著的前20个GO条目全部与细胞周期及细胞分裂直接相关；而基于DEGs还获得了10条显著富集（P <0.05）的KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路，其中细胞周期通路、磷脂酶D信号通路、p53信号通路、孕激素介导的卵母细胞成熟通路和卵母细胞减数分裂通路等5条通路是以MAPK信号通路为中心、与细胞分裂调控相关的代谢通路集群.此外，qRT-PCR测定的10个DEGs的相对表达量与来自RNA-Seq的相对表达量之间较高的相关性验证了转录组高通量测序及分析的可靠性.总之，绿草履虫对PS NPs胁迫的分子响应结果暗示PS NPs对绿草履虫细胞分裂活动有一定程度的扰动.（图6表6参53）

摘要: 以“绿草履虫 -小球藻”共生系统为材料 ,选用 2 0种随机引物对光培养下含小球藻共生体的草履虫和暗培养诱导除去小球藻共生体的草履虫基因组DNA进行遗传多态分析 ,由扩增产物电泳图谱显示 ,用S40 1、S147、S786、S75 9、S86、S15 5、S140等随机引物扩增出 86 6、 1393、 16 37bp等具有相同特征的电泳条带 ;随机引物S174、S75 0、S76 9、S75 5、S10 3等则扩增出 1385、 185 2、 15 79bp等无共生藻草履虫的特有条带。据此推测 ,绿草履虫中的共生小球藻会导致宿主草履虫基因组结构的改变。同时显示小球藻共生体的基因组可能与宿主基因组有某些相似之处。

摘要: 以含共生藻绿草履虫 (CCP)、恢复型绿草履虫 (RCCP)和无共生藻绿草履虫 (CFP)为材料 ,探讨共生体对宿主生长、细胞大小、抗氧化能力和细胞质糖含量的影响。 3种细胞培养液中 ,细胞培养密度峰值分别为 15 0 0、 80 0和 5 0 0个 /mL ,对应的生长峰值期分别在第 14天、第 14天和第 8天。CCP细胞比CFP约长 2 2μm ,约宽 16 μm ;RCCP在CCP和CFP之间。对邻苯三酚自氧化产生O2 化学发光的抑制效果不同 :随匀浆液浓度 (μL/mL)从 2 0增加到 10 0时 ,CCP抑制率提高了 6 7% ,RCCP提高了 4 2 % ,而CFP和小球藻仅分别为 2 7%和<10 %。细胞质葡萄糖和麦芽糖含量差异巨大 :CCP分别为RCCP的 4和 2倍 ,而CFP是RCCP的 1/ 4和 1/ 2。看来 ,绿草履虫在这个共生系统中受益。

摘要: 通过石炭酸品红、Hoechst 33342、蛋白银及免疫荧光标记等染色方法对草履虫接合生殖过程进行了重新观察,结果发现:1)新月核是第一次减数分裂前期小核的主要形态学特征,在核内有一未被石炭酸品红、Hoechst 33342着色区域,蛋白银染色则清楚显示该结构;2)4个单倍体减数分裂产物中的1个核进入口旁锥完成配前第三次核分裂,其余3核退化。蛋白银染色和抗α微管蛋白单克隆抗体进行免疫荧光标记显示,核进入口旁锥的时期在第二次减数分裂末期而非减数分裂结束后;3)配前第三次分裂末期,核间连丝的中间段有一被蛋白银识别的结构,但免疫荧光标记却无显示,只表现为纤维状结构与两侧核间连丝相连。观察结果为草履虫接合生殖过程中相关分子生物学机制研究奠定了必要的形态学基础。