摘要: 【目的】本研究旨在对前期转录组测序鉴定到的棉铃虫Helicoverpa armigera原肌球蛋白基因HaTm-1进行组织表达谱和RNAi效应分析，探究HaTm-1作为鳞翅目(Lepidoptera)害虫广谱性RNA生物农药靶点的可行性和理论依据。【方法】PCR克隆棉铃虫HaTm-1 cDNA序列并进行生物信息学分析；利用RT-qPCR检测HaTm-1在棉铃虫4龄幼虫不同组织(表皮、脂肪体、中肠、脑、精巢和马氏管)以及2-5龄幼虫表皮中的表达量；通过喷洒dsHaTm-1对棉铃虫和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 1龄幼虫HaTm-1进行RNAi,分别检测棉铃虫HaTm-1和草地贪夜蛾SfTm-1的表达量以及幼虫体重和幼虫存活率；对棉铃虫4龄幼虫注射dsHaTm-1,检测幼虫体重、蛹重、相对生长速率、相对代谢速率和取食量。【结果】棉铃虫HaTm-1全长cDNA为855 bp (GenBank登录号：XP021201113.1), HaTm-1与多物种中的同源蛋白都有超90%的氨基酸序列一致性。棉铃虫与草地贪夜蛾的Tm-1汇聚在同一分支上，亲缘关系最近。HaTm-1在棉铃虫4龄幼虫表皮中特异性高表达，且在不同龄期幼虫表皮中均有表达，其中在5龄幼虫表皮中表达量最高。与dsEGFP对照组相比，喷洒dsHaTm-1处理棉铃虫1龄幼虫12和24 h时，HaTm-1表达量分别降低了55.73%和50.85%; 168 h时幼虫存活率显著降低，仅为43.33%;处理后72, 120和168 h时幼虫体重分别下降17.67%, 14.65%和18.90%。与dsEGFP对照组相比，喷洒dsHaTm-1处理草地贪夜蛾1龄幼虫12和24 h时SfTm-1表达量分别降低了44.72%和39.65%;144 h时幼虫存活率为60%; 72和120 h时幼虫体重分别下降了13.00%和28.11%。与dsEGFP对照组相比，注射dsHaTm-1处理棉铃虫4龄幼虫24 h时HaTm-1表达量显著降低了55.66%,处理后72和120 h幼虫体重分别下降了50.34%和54.91%,蛹重也下降了13.14%,相对生长速率下降14.00%,相对代谢速率下降15.66%,取食量下降14.50%。取食消化过程受到影响进而导致了幼虫的死亡。【结论】干扰HaTm-1表达对棉铃虫的取食消化过程至关重要。本研究证明了原肌球蛋白作为潜在RNA生物农药广谱性害虫防治靶标的可行性，为其实际应用提供参考。

摘要: 【目的】鹿眼蛱蝶浓核病毒(Junonia coenia densovirus, JcDV)通过漏扫描方式编码4个病毒结构蛋白(viral structural protein, VP) VP1, VP2, VP3和VP4。本研究旨在探究JcDV的4个结构蛋白基因(vp1-4)在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫体内的表达特征，为深入研究病毒结构蛋白VP1-4的功能及其组装机制提供依据。【方法】采用免疫荧光检测在转染pJcDV质粒的Hi5细胞内VP1-4的亚细胞定位；利用RT-PCR检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96和120 h时vp1-4的表达量；采用Western blot检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24, 48, 72, 96和120 h时VP1-4的表达量；用免疫组织化学技术检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24和96 h时VP1-4的组织表达特性。【结果】VP1-4主要位于Hi5细胞质中，少量以多聚体形式分布于细胞核内；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3 h时可检测到vp1-4的转录并至少持续至120 h; JcDV侵染后24-120 h时可检测到VP1-4的表达；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后96 h时在虫体的表皮和气管中可检测到VP1-4的表达，而肌肉和脂肪体中没有明显表达信号。【结论】JcDV在侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3和24 h时可分别检测到病毒结构蛋白基因vp1-4的转录和翻译，表明VP1-4可能在侵染早期已开始发挥重要功能；JcDV可侵染草地贪夜蛾幼虫的表皮和气管，可能是导致其死亡的原因之一。

摘要: 【目的】测定药用植物白花丹中重要植物次生物质白花丹素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 2龄幼虫的毒力，并明确亚致死浓度(LC₂₅浓度)白花丹素对草地贪夜蛾亲代（F₀）和子一代（F₁）生长发育及解毒酶活性的影响。【方法】白花丹素通过饲料混毒法处理草地贪夜蛾2龄幼虫（蜕皮后的第2天）测定其对草地贪夜蛾的毒力，同时以LC₂₅浓度（0.343 mg/g）白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫，统计记录F₀代与F₁代幼虫历期、化蛹率、蛹历期、雌雄成虫寿命和成虫单雌产卵量，构建年龄-龄期两性生命表。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h后，测定羧酸酯酶（carboxylesterase, CarE）、谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase, GST）和细胞色素P450单加氧酶（cytochrome P450 monooxygenase, CYP450） 3种解毒酶的活性。【结果】白花丹素对草地贪夜蛾2龄幼虫7 d内的致死中浓度(median lethal concentration, LC₅₀)和LC₂₅值分别为0.607和0.343 mg/g。与溶剂对照（0.1%丙酮）对比，LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫后亲代（F₀）的化蛹率显著下降了25.13%,雌雄蛹历期分别显著缩短了1.29和1.08 d,成虫的单雌产卵量显著下降了47%,产卵期和成虫寿命分别显著降低了1.75和1.19 d;子代（F₁）的平均世代周期（mean generation time,T）显著缩短了0.91 d。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著诱导其体内CarE, GST和CYP450 3种解毒酶活性，分别为溶剂对照的1.28, 1.30和1.42倍。【结论】LC₂₅浓度白花丹素对亲代（F₀）草地贪夜蛾的生长发育和繁殖产生明显的不利影响，且处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著提高3种解毒酶CarE, GST和CYP450酶活性，该结论有助于将植物次生物质白花丹素作为防治草地贪夜蛾的潜在生物防治手段。

摘要: 本研究从田间采集的菜青虫Pieris rapae L.中肠分离获得可培养的、菌落形态有显著差异的细菌菌落53个。将这些菌落接种至新鲜的LB培养基中培养3 d后，用于浸泡人工饲料并饲喂草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Smith2龄幼虫，其中9株对草地贪夜蛾幼虫展现出一定的胃毒活性。针对杀虫活性最高的一株——克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae A7株进行了进一步的检测，发现其在培养后1 d、2 d和3 d后对草地贪夜蛾2龄幼虫处理96 h的致死率分别为26.39%±11.98%、8.33%±3.73%和56.25%±10.26%，均显著高于对照组试虫的死亡率（P<0.05）。全基因组测序的结果表明，A7基因组总长度为8.55 Mb,GC含量51.78%，可编码8 148个基因，另含有3个质粒，大小分别为190 495 bp、89 806 bp和77 436 bp。进一步的分析结果表明，A7株编码的748种基因中，有214种毒力基因的检出率在70%以上，306种毒力基因的检出率低于50%，其余228种毒力基因的检出率在50%～70%之间；进一步利用VFDB数据库对214种毒力基因检出率在70%以上的基因进行注释，分别注释到13类毒力相关基因。可以观察到A7在16S rDNA系统发育树上与其他克雷伯氏菌属Klebsiella sp.的亲缘关系。本研究报道了一种对草地贪夜蛾幼虫具有杀虫活性的克雷伯氏菌，结合基因组学的分析，为草地贪夜蛾的生物防治提供了依据。

摘要: 【目的】明确外源褪黑素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda过冷却点和结冰点的影响。【方法】利用食物介导法对草地贪夜蛾1-6龄幼虫饲喂含有不同浓度（0、0.2、2、20和200µg/g）外源褪黑素的人工饲料，测定褪黑素处理后草地贪夜蛾各虫态的过冷却点和结冰点变化。【结果】外源褪黑素处理后，草地贪夜蛾3-6龄幼虫、雌雄蛹和成虫的过冷却点和结冰点与对照相比均显著降低（P<0.05），表明外源褪黑素处理有助于增强草地贪夜蛾的抗寒性。随着外源褪黑素处理浓度的升高，草地贪夜蛾各虫态的过冷却点和结冰点与对照相比显著降低（P<0.05），尤其在200µg/g浓度处理下，草地贪夜蛾各虫态的过冷却点和结冰点最低。雌、雄性两性个体间过冷却点和结冰点具有一定差异，雌虫过冷却点和结冰点略低于雄虫，而且外源褪黑素处理能进一步增强雌、雄个体对低温环境的适应能力。【结论】外源褪黑素处理能降低草地贪夜蛾的过冷却点和结冰点，增强草地贪夜蛾的抗寒性。