摘要: 【目的】为了揭示浙江省茶区灰茶尺蛾Ectropis grisescens和小茶尺蠖Ectropis obliqua两近缘种的分布情况。【方法】利用线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(mt COⅠ)基因作为分子标记,对采自浙江省17个地点茶园的茶尺蠖533个样品进行了鉴定,并分析了灰茶尺蛾和小茶尺蠖在浙江的地理分布情况。【结果】在调查的17个地点中,11个地点的茶尺蠖样品全部为灰茶尺蛾,另外3个地点(安吉、余杭和龙坞)采集的样品全部为小茶尺蠖,其余的3个地点(杭州西湖、杭州临安和杭州富阳)为两近缘种的混发区。【结论】在浙江省茶区,灰茶尺蛾的分布范围较广,小茶尺蠖的分布范围较窄,同时存在两近缘种的混发区。

摘要: [目的]原核表达茶尺蠖Ectropis oblique羧酸酯酶(carboxlesterase,CarE)基因CarE592,并探讨其对农药的降解能力。[方法]构建原核表达载体pET-32a-CarE592,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21异源表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白,并对包涵体蛋白变复性;通过固蓝B盐比色法的含量标准曲线测定重组CarE592酶活以及温度、pH和金属离子对酶活的影响;利用气相色谱检测CarE592在30℃pH7.0和0,4,8,12,16,20及24 h时对200 mg/L的高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、甲基对硫磷(methyl parathion)和异丙威(isoprocarb)降解能力。[结果]通过大肠杆菌异源表达得到重组CarE592包涵体蛋白,经尿素变复性后得到酶活29.8 U的重组CarE592,其最适温度30℃左右、最适pH7.08.0左右、Mg(2+)和K+对酶活有促进作用;重组CarE592能在30℃,pH7.0,24 h内对初始浓度为200 mg/L的高效氯氟氰菊酯、甲基对硫磷和异丙威降解率分别为81.3%,83.94%和79.83%。[结论]羧酸酯酶CarE592能降解高效氯氟氰菊酯、甲基对硫磷和异丙威,可能参与茶尺蠖的解毒过程。本研究为环境和果蔬中农药残留的降解奠定了基础。

摘要: 【目的】探讨LED光照波长、强度及处理时间对灰茶尺蠖Ectropis grisescens成虫保护酶活性的影响，为茶园灰茶尺蠖应用灯光绿色防控提供参考。【方法】室内检测了灰茶尺蠖雌雄成虫在LED光照波长590595和520525 nm,光照强度分别为40, 80和120 lx下照射1, 2和3 h时总蛋白含量、以及保护酶[过氧化物酶(peroxidase, POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)]活性及总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)的变化。【结果】590595和520525 nm两种波长LED光处理后随着光照强度和处理时间的增加，灰茶尺蠖雌雄成虫中总蛋白含量，POD, SOD和CAT活性及T-AOC呈增加趋势。两种波长各光照强度处理不同时间雌成虫中总蛋白含量和POD活性均显著高于雄成虫中的，雄成虫中SOD和CAT活性及T-AOC均高于雌成虫中的，且均以120 lx LED光照强度处理3 h时最高。两个波长的LED光照射不同时间时灰茶尺蠖雌雄成虫体内POD, SOD和CAT活性均高于自然光对照。【结论】590595和520525 nm的LED光照均可引起灰茶尺蠖成虫体内保护酶活性变化，为探索打破保护酶活性最佳照射波长、强度和时间及茶园内采用灯光照射茶园害虫开展绿色防控提供基础数据。

摘要: 【目的】明确灰茶尺蠖Ectropis grisescens成虫复眼的超微结构及其明暗适应中的变化，探究其调光机制。【方法】采用超景深显微镜测定了灰茶尺蠖成虫复眼的小眼数量、间角、直径和曲率半径等外部参数，并通过组织切片、光学显微镜和透射电子显微镜等技术观察了复眼的内部超微结构；通过光学显微镜观察了灰茶尺蠖成虫复眼在明暗环境中分别适应2 h后晶锥结构及色素颗粒的位置变化。【结果】灰茶尺蠖成虫复眼呈半球形，雌、雄虫单个复眼分别有2 502±105和3 123±78个小眼。小眼自远端至近端由角膜、晶锥、透明区构成的屈光层和由15个视网膜细胞构成的感光层组成。2个初级色素细胞包裹着晶锥，自角膜近端延伸至视网膜细胞核区的远端；每个小眼外围由6个次级色素细胞围绕，自角膜近端延伸至基膜；在透明区内14个视网膜细胞聚集成束(非感杆束),远端与晶锥束末端连接，在感光层内形成闭合型感杆束，延伸至第15个视网膜细胞(基部视网膜细胞)。在明暗适应时，灰茶尺蠖复眼的晶锥细胞间出现开闭，色素颗粒进行纵向位移，以适应外界的光强度的变化。【结论】灰茶尺蠖成虫复眼属于重叠像眼，感杆束为“14+1”模式；屏蔽色素颗粒的移动是其复眼适应外界光强度变化的重要机制。

摘要: 【目的】明确沃尔巴克氏菌Wolbachia对茶尺蠖两近缘种杂交卵孵化的影响及相关机制。【方法】使用2.5 mg/mL四环素浸液处理1 min后的新鲜茶树叶片连续饲喂灰茶尺蠖Ectropis grisescens幼虫3代，建立不携带Wolbachia的灰茶尺蠖种群。通过携带和不携带Wolbachia的灰茶尺蠖成虫分别与小茶尺蠖E.obliqua成虫进行杂交，探究Wolbachia对二者杂交卵孵化的影响。同时利用iTRAQ技术检测并分析携带和不携带Wolbachia的灰茶尺蠖精子蛋白的差异。【结果】与自然携带Wolbachia的灰茶尺蠖相比，去除Wolbachia后的灰茶尺蠖与小茶尺蠖杂交卵孵化率从3.92%显著提高到56.20%,表明Wolbachia诱导胞质不亲合。精子蛋白差异分析显示，携带和不携带Wolbachia的灰茶尺蠖的精子蛋白中，共有128个蛋白显著差异表达，其中KEGG数据库注释到45个差异蛋白富集到鞘脂类代谢、唾液分泌、溶酶体、鞘脂信号通路和鞘糖脂生物合成等106个通路中，其中鞘脂类代谢通路中与神经酰胺合成相关的神经酰胺酶和磷酸酯酶显著上调表达。【结论】共生菌Wolbachia通过胞质不亲和作用介导了茶尺蠖两近缘种间的合子前生殖隔离，导致杂交卵的孵化率显著下降；Wolbachia可能通过鞘脂代谢通路实现了对雄性精子蛋白的修饰。