摘要: 【目的】本研究旨在通过同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术，探索茶园中抗性种群（常规用药管理）与敏感种群（荒废未作管理）茶小绿叶蝉Empoasca flavescens之间的蛋白质组学差异，为后续茶小绿叶蝉的抗药性治理奠定理论基础。【方法】采用随机多点的方式采集茶小绿叶蝉，利用蛋白纯化试剂盒对总蛋白进行提取与定量。通过iTRAQ标记试剂盒对总蛋白进行酶解与标记。通过高pH-RPLC与RPLC-MS技术对多肽进行分离与鉴定。通过GO分析（Gene ontology）方法，对差异蛋白的分子功能、生物过程和细胞位置进行分析。通过KEGG Pathway网站，对差异蛋白代谢通路进行注释。通过STRING-DB数据库，对差异蛋白的互作网络进行分析。最后，对差异显著的抗性相关蛋白酶进行了分析整理。【结果】总蛋白提取结果显示，敏感与抗性种群的总蛋白含量分别为728.23μg和1 261.17μg。抗性与敏感种群之间，共有1 399个蛋白发生了明显变化。其中，上调与下调达到1.5倍以上的分别为101个和218个。GO分析结果显示，这319个差异蛋白具有离子结合蛋白、组成核糖体和氧化还原酶等功能，主要参与蛋白翻译、物质运输和小分子代谢过程，主要分布于细胞内膜、细胞质、核糖体和细胞核。KEGG分析结果显示，319个差异蛋白主要参与碳代谢、核糖体代谢和吞噬作用通路。STRING分析结果显示，319个差异蛋白通过多种路径相互调控。抗性相关蛋白酶整理结果显示，共有3个谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）、2个细胞色素P450氧化酶（P450）、2个超氧化物歧化酶（SOD）和2个过氧化物酶（POD）发生了明显变化。【结论】抗性与敏感种群茶小绿叶蝉蛋白组差异明显，差异蛋白具有多种分子功能，分布于细胞各个位置，抗性种群对药剂的解毒酶活性多数强于敏感种群。

摘要: 【目的】研究艾蒿Artemisia argyi挥发物对茶小绿叶蝉Empoasca onukii的驱避或引诱作用，以期为茶小绿叶蝉“推-拉”策略的应用提供理论依据。【方法】采用Y型嗅觉仪，测定艾蒿植株挥发物对茶小绿叶蝉3龄若虫的行为选择，通过固相微萃取-气质联用技术提取和分析艾蒿植株挥发物组分，并对活性单体进行田间试验。【结果】在室内，艾蒿嫩茎植物挥发物对茶小绿叶蝉具有极显著的驱避作用（P<0.01）；提取并鉴定出艾蒿植物挥发性化合物72种，其中，单组分中β-石竹烯、D-樟脑、大牛儿烯D和左旋-α-蒎烯化合物的相对含量较大，分别占总量的27.81%、10.94%、7.19%和4.23%；浓度为1μL/mL和0.01μL/mL的挥发物单体β-蒎烯对茶小绿叶蝉3龄若虫具有极显著的驱避作用（P<0.01）；浓度为1μL/mL的β-石竹烯和浓度为100μL/mL的cis-香芹醇对茶小绿叶蝉3龄若虫具有显著的驱避作用（P<0.05），浓度为0.01μL/mL的胡椒酮对茶小绿叶蝉3龄若虫具有显著引诱作用（P<0.05）；田间试验结果表明，β-蒎烯、β-石竹烯和cis-香芹醇具有驱避茶小绿叶蝉成虫的作用，与对照比较，降低了黄板上茶小绿叶蝉成虫数量。【结论】艾蒿植物挥发物中β-蒎烯、β-石竹烯和cis-香芹醇3种化合物是驱避茶小绿叶蝉的重要物质，其驱避效果与挥发物的物质浓度有关。

摘要: 【目的】为了探讨外源信息化合物对茶小绿叶蝉Empoasca vitis G?the其优势天敌时序动态的影响和对叶蝉的生态控制效应,本文研究了3种外源信息化合物对茶园小绿叶蝉和蜘蛛种群数量的影响。【方法】将用水杨酸(SA)、水杨酸甲酯(MeSA)、芳樟醇及添加有抗氧化剂和抗紫外线剂浸泡后的诱芯在田间悬挂1、3、7、14 d后,在距诱芯1、2、3 m处分别调查了茶小绿叶蝉和蜘蛛的个体数,以正己烷浸泡的诱芯作对照。【结果】不同处理均使叶蝉的种群数量下降,其中以水杨酸的抑制作用最明显,水杨酸甲酯次之;悬挂7 d后对叶蝉的数量影响最大,显著低于悬挂前。各处理均能增加蜘蛛种群数量,以水杨酸甲酯对蜘蛛的诱集作用最明显;悬挂3 d后蜘蛛数量增加最多;不同距离的诱芯对叶蝉和天敌密度影响差异均不明显。【结论】外源SA和MeSA能够降低田间茶小绿叶蝉的种群密度,并对天敌具有一定的诱集效果,研究结果为茶园叶蝉的防治与优势天敌的保护和利用提供了重要的依据。

摘要: 【目的】茶小绿叶蝉Empoasca onukii是我国茶园的重要害虫,其体表覆盖网粒体,而网粒体是否具有防御功能则知之甚少。本研究旨在明确网粒体脱落是否对该害虫逃离茶园蜘蛛网起到关键作用。【方法】将茶小绿叶蝉成虫置于草间小黑蛛Hylyphantes graminicola的不规则网内,利用高清摄像机和Vegas软件对茶小绿叶蝉在蜘蛛胁迫和无蜘蛛胁迫情况下脱离蛛网的行为参数及其微动作进行解析;将茶小绿叶蝉成虫翅面触碰蛛网后,在扫描电镜下观察翅面网粒体与蛛丝接触的微观形态,分析试虫挣扎时与蛛网粘黏部位的网粒体分布情况。【结果】当蜘蛛胁迫时,茶小绿叶蝉成虫60 min内脱网率为45.0%,无蜘蛛胁迫时,60 min内成虫脱网率可达76.7%;茶小绿叶蝉成虫陷入蛛网后的逃离时长蜘蛛胁迫组显著短于无蜘蛛胁迫组。茶小绿叶蝉成虫逃网策略至少有4种。蜘蛛胁迫和无蜘蛛胁迫两处理组的翻身率都接近80%,翻身时长约0.5 s,提示成虫翅面与蛛网间的黏力较小。茶小绿叶蝉挣扎逃离蛛网的时长接近翻身时长的3倍,通过对茶小绿叶蝉在蛛网的挣扎行为解析判定茶小绿叶蝉的前足和中足是虫体中最难脱离蛛丝的部位。扫描电镜结果显示,茶小绿叶蝉翅面是虫体表面网粒体分布最均匀且密度较高的部位,网粒体分布密度为280±17粒/25μm2;翅面网粒体可脱落并包裹整根黏丝;茶小绿叶蝉前足腿节及前跗节表面网粒体覆盖数量不均匀,稀少部位的覆盖密度仅4±4粒/25μm2,是前足难以脱离蛛丝的可能原因。【结论】茶小绿叶蝉体表网粒体脱落可有效帮助成虫脱离蛛网,其成虫能否成功快速逃离蛛网取决于与蛛网的接触部位是否有网粒体的分布。

摘要: 【目的】研究不同茶园茶小绿叶蝉Empoasca onukii种群的遗传分化和基因流格局,探究其种群遗传结构差异和扩散特点及其与茶园景观格局的关系。【方法】以福建省安溪县为研究区域,在运用ArcMap10.5和R软件包raster分析研究区域景观组成和结构的基础上,选取周边景观格局不同的18个茶园采集茶小绿叶蝉(530个个体),基于23个微卫星位点对这些个体进行PCR扩增和基因型测定,采用ARLEQUIN 3.5.2, FSTAT 2.9.3和R软件包adegenet 2.0.0分析其遗传多样性和遗传分化情况;采用STRUCTURE 2.3.4和R软件包adegenet 2.0.0中的DAPC程序分析其种群遗传分化;利用BAYESASS 3.0.4估算种群间最近几代的迁移率;同时利用景观遗传学的统计方法Mantel、距离矩阵多元回归模型(MRM)和一般线性模型(GLMM)将茶小绿叶蝉种群遗传分化与景观组成和景观结构的空间数据进行关联分析。【结果】供试18个茶小绿叶蝉种群的23个微卫星位点的等位基因数为952,等位基因丰富度(A_R)为3.6864.397,基因多样性(D_(IV))为0.6760.734,期望杂合度(He)为0.6590.729。聚类分析显示,有大量森林生境的西北部5个相邻样点的种群组成一个类群,有大量居民点和其他作物田分布的东北部的5个相邻样点的种群分为两个类群,而集约化种植模式明显的南部样点的种群也分成两个类群。两两种群间的Nei氏遗传距离为0.0420.984,Provesti氏遗传距离为0.2070.650,遗传分化指数F_(ST)为0.0020.222。BAYESASS分析显示,种群间的现时基因流(Nm)相对较低,介于0.0070.180,而在种群内部的基因流介于0.6740.854。在此基础上,Mantel和距离矩阵多元回归模型分析显示,地理距离和采样点周围1 000 m范围内草地面积占比是与茶小绿叶蝉种群遗传分化有关的两个关键因子;一般线性模型分析进一步证实茶小绿叶蝉种群遗传分化与这两个关键因子线性关系显著,茶小绿叶蝉种群遗传多样性与采样点周围半径1 000 m范围内草地面积占比线性关系显著。【结论】结果说明研究区域内茶小绿叶蝉种群形成了明显的遗传分化结构和地理距离隔离格局,异地种群间现时基因交流受限明显,因此推测茶小绿叶蝉其自主扩散能力比较有限,不具有远距离迁飞的习性。茶园周围1 000 m范围内草地生境对茶小绿叶蝉种群的遗传多样性具有积极作用,茶园周边景观组成和尺度范围可能通过影响茶小绿叶蝉种群的扩散和定殖过程而与其种群遗传结构相关联。