摘要: 为了探索快速鉴定马铃薯瓢虫Henosepilachna vigintioctomaculata(Motschulsky)和茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata(Fabricius)的分子生物学方法,本研究在随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA, RAPD)的基础上,分别设计了可以鉴别两个物种的序列特征扩增区域(sequence characterized amplified regions, SCAR)标记。从随机合成的60条引物中筛选出来2条特异性引物(分别为OPI-6和OPJ-15),引物OPI-6在马铃薯瓢虫中扩增出约750 bp的特异性条带,引物OPJ-15在茄二十八星中扩增出约750 bp的特异性条带,根据测序结果设计了两对SCAR引物对筛选结果进行验证,发现根据OPI-6的测序结果所设计的SCAR引物(OPI-6 test)仅能在马铃薯瓢虫中扩增出645 bp的条带,而根据OPJ-15的测序结果所设计的SCAR引物(OPJ-15 test)仅能在茄二十八星瓢虫中扩增出436 bp的条带。这两对SCAR引物能够准确、稳定且快速地区分马铃薯瓢虫与茄二十八星瓢虫,对这两种害虫的精准防控具有重要意义。

摘要: 纳米材料被视为重要的RNA干扰增效物质。层状双氢氧化物(LDH)是具有生物相容性的可降解纳米材料，可以显著提高dsRNA防控黄瓜花叶病毒的效果。为明确LDH能否提高昆虫RNA干扰的效果，以期促进RNA生物农药在农业害虫防治中的应用和推广，本研究选择茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata的EcR基因进行RNA干扰介导的致死效应研究。将LDH与dsEcR组装形成复合物LDH-dsEcR,利用琼脂糖凝胶电泳确定LDH-dsEcR的最佳装载比例。通过静置法检测LDH-dsEcR的稳定性，借助透射电子显微镜验证其组装状态。采用浸叶法测定LDH-dsEcR的增效性，使用体视镜观察其对试虫形态的影响。结果表明：LDH与dsEcR可形成稳定的复合物，其最佳装载比为16∶1。LDH对茄二十八星瓢虫无毒性，但经LDH与dsEcR处理，部分试虫虫体呈黑褐色，或无法蜕皮化蛹，或维持在预蛹状态。遗憾的是LDH-dsEcR复合物的增效作用不明显，推测昆虫肠道的酸碱度可能是影响LDH-dsRNA增效的因素之一。本研究首次为利用LDH研究昆虫RNA生物农药提供了可观的理论基础。

摘要: 【目的】本研究旨在探究茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata中的重链铁蛋白(ferritin1HCH, Fer1)基因HvFer1功能，为茄二十八星瓢虫生物防治提供理论基础。【方法】对HvFer1氨基酸序列进行blastp分析后，再与不同物种的Fer1序列进行多重比对；通过RT-qPCR检测HvFer1在茄二十八星瓢虫不同发育阶段(卵、1-4龄幼虫、蛹和雌雄成虫)和4龄幼虫不同组织(头、中肠、脂肪体、表皮和马氏管)中的表达量；通过注射200 ng/头的dsHvFer1沉默茄二十八星瓢虫3龄幼虫HvFer1,观测幼虫表型、存活率和4龄幼虫至蛹的历期以及中肠中双氧化酶(dual oxidase, Duox)基因HvDuox表达量、活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量以及细菌多样性。【结果】鞘翅目(Coleoptera)昆虫的Fer1序列聚为一支，HvFer1与异色瓢虫Harmonia axyridis和七星瓢虫Coccinella septempunctata的Fer1亲缘关系最近。HvFer1在茄二十八星瓢虫雄成虫中的表达量最高，在4龄幼虫中的表达量最低；HvFer1在4龄幼虫中肠中的表达量显著高于其他组织中的。与对照组(注射dsGFP)相比，对茄二十八星瓢虫3龄幼虫注射dsHvFer1 (200 ng/头)后4龄幼虫到蛹的历期显著延长，蛹的部分枝刺和斑点无法正常形成；羽化后的成虫鞘翅发育异常，斑点融合或者缺失；3龄幼虫HvFer1的表达量在注射dsHvFer1第2天时与对照组比无显著差异，在注射dsHvFer1第4天时与对照组比显著降低。HvFer1的沉默导致茄二十八星瓢虫幼虫体内发生剧烈的氧化应激，中肠中HvDuox的表达量、ROS水平和MDA含量与对照组比显著上调，改变了中肠细菌的结构组成，降低了肠杆菌属Enterobacter和金黄杆菌属Chryseobacterium的相对丰度，提高了沙雷氏菌属Serratia、假单胞菌属Pseudomonas和不动杆菌属Acinetobacter等肠道菌的相对丰度。【结论】HvFer1在调控茄二十八星瓢虫幼虫发育、成虫表型、维持幼虫肠道免疫和微生物稳态过程中起着至关重要的作用，有望成为基于RNAi技术防治茄二十八星瓢虫的候选靶标基因。

摘要: 本研究利用扫描电镜对马铃薯瓢虫Henosepilachnavigintioctomaculata (Motschulsky)和茄二十八星瓢虫H .vigintioctopunctata (Fabricius)体表的细微结构进行了比较研究。结果表明 ,马铃薯瓢虫和茄二十八星瓢虫在细微结构上存在明显差异。第一 ,2种瓢虫鞘翅表面凹陷内 ,毛的着生位置不同 ,马铃薯瓢虫的毛着生于凹陷中心 ,茄二十八星瓢虫的毛着生于凹陷边缘 ;第二 ,鞘翅表面凹陷的深浅不同 ,马铃薯瓢虫的凹陷较深于茄二十八星瓢虫。这为 2种瓢虫的形态学研究提供了细微结构方面的依据

摘要: 室内初步试验了敌敌畏等５种杀虫剂对茄二十八星瓢虫的毒力效果，并从中挑选出杀虫效果较好的敌敌畏、速灭杀丁、害极灭３种杀虫剂，研究其对茄二十八星瓢虫优势寄生蜂——瓢虫柄腹姬小蜂的影响。结果表明：敌敌畏、速灭杀丁、害极灭在大田常规使用浓度范围内，对瓢虫杀伤力强、死亡率达９０％以上；对寄生蜂的毒力依次为敌敌畏＞速灭杀丁＞害极灭，各浓度对寄生７ｄ后蜂蛹影响不大，但对寄生１～５ｄ的蜂幼阶段危害很大；害极灭５０００倍，速灭杀丁４０００～６０００倍，敌敌畏８０００倍时，低龄蜂幼能少量出蜂，并且羽化出的蜂繁殖力与正常蜂无显示差别。