摘要: 利用Trizol一步法从柔嫩艾美耳球虫孢子化10h卵囊提取总RNA。利用poly(A)QuikmRNAIsolationkit分离纯化了mRNA。采用cDNASynthesisKit合成cDNA,以XR-λZAP为载体,构建了cDNA表达文库,经蓝白斑筛选,其重组率为98%,滴度为0·9×106pfu/mL,扩增后滴度为1×109pfu/mL。随机取10个克隆,提取λDNA后,经PCR鉴定,插入片段长度大于0·4Kb。该cDNA表达文库的构建为下一步功能基因的筛选等奠定了良好基础。

摘要: 用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5～ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。

摘要: 凭借光镜和电镜、切片和涂片技术相结合之手段 ,作者对斯氏艾美耳球虫 (Eimeriastiedai)大配子发育及其超微结构进行了研究。大配子发育历经早、中、晚 (成熟 ) 3期。早期虫体以大核、大核仁和数个早期形态的成囊颗粒Ⅰ (WFⅠ )的出现为特征 ;中期虫体以成囊颗粒Ⅱ (WFⅡ )之出现为特征 ,含大量脂肪体和支链淀粉颗粒并出现小管构造 ;成熟期大配子体即大配子 ,被单层膜 ,WFⅠ和WFⅡ周边排列 ,含极多的脂肪体和支链淀粉颗粒 ,有一明显核仁的大核 ,小管构造增多。

摘要: 以对马杜霉素完全敏感和柔嫩艾美耳球虫豪顿株为参照 ,检测柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株(HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)对马杜霉素的耐药程度。按每羽 5× 1 0 4个孢子化卵囊的剂量接种 7日龄试验鸡只 ,接种后第 7天剖杀所有试验鸡 ,观察盲肠病变 ,计算平均增重、盲肠内容物卵囊数、粪便中卵囊排出量和抗球虫指数 (ACI)。以ACI值作为判定耐药程度的标准 ,ACI≥ 1 80判为敏感 ,1 6 0≤ACI<1 80判为部分耐药 ,ACI<1 6 0判为耐药。结果是柔嫩艾美耳球虫豪顿株的ACI为 1 98 3,柔嫩艾美耳球虫河北分离株HBZ、HBH组的ACI分别是 1 4 7 5、 1 5 3 7,山东分离株SDZ、SDT组的ACI分别是1 2 7 2、 1 30 0。试验证明柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株 (HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)对马杜霉素具有耐药性

摘要: 通过单卵囊接种法从美国的Coccivac苗中 ,分离出 1株毒害艾美耳球虫 (E .necatrix) ,感染仔鸡增殖后 ,以不同的剂量 (5 0 0 0～ 10 0 0 0 0个 羽 )接种 10日龄京星黄羽肉仔鸡 ,研究其致病性。感染鸡临床症状主要表现为食欲不振、精神萎靡、怠动、扎堆、腹泻、便血 ,但接种剂量不同 ,临床症状出现的时间及表现程度也不同 ;实验结果还表明 ,接种的所有剂量均影响实验仔鸡的增重并引起不同程度的肠道病变 ,总的趋势为正相关 ;而所有组均未出现死亡。