摘要: 为探索纤毛虫在营养及休眠条件下两套遗传系统的作用关系,对膜状急纤虫(Tachysomapellionella)营养细胞和休眠包囊大核DNA、线粒体DNA进行了RAPD比较。结果显示,在所选用的34条随机引物中,大核DNA共扩增出203条片段,其中以休眠包囊大核DNA为模板扩增出45条特有片段,以营养细胞大核DNA为模板扩增出36条特有片段,两者存在40%的差异。在所选用的32条随机引物中,线粒体DNA共扩增出216条片段,其中以休眠包囊线粒体DNA为模板扩增出35条特有片段,以营养细胞线粒体DNA为模板扩增出47条特有片段,两者有38%的差异。结果表明,膜状急纤虫休眠包囊与营养期的大核DNA结构存在显著的差异;两者的线粒体DNA结构也存在较大差异。这表明,膜状急纤虫在包囊形成过程中,大核及线粒体DNA结构可能都发生了一定的变化,并且这些变化可能与包囊形成过程中的形态结构和代谢活动等剧烈变化以及休眠状态下的生理生化变化密切相关。

摘要: 应用生化抽提和SDS-PAGE方法显示,膜状急纤虫(Tachysoma pellionella)的营养细胞含38条蛋白谱带,休眠细胞含29条蛋白谱带,两者共有谱带为26条,特有谱带各为12条和3条,相似度为77.6%;休眠细胞的包囊壁含22条蛋白谱带,细胞脱包囊后残留的包囊壁含15条蛋白谱带,两者共有谱带为14条,特有谱带各为8条和1条,相似度为76%。包囊游仆虫(Euplotes encysticus)的营养细胞和休眠细胞均含23条蛋白谱带,两者共有谱带为19条,特有谱带各为4条,相似度为82.6%;休眠细胞的包囊壁和细胞脱包囊后残留的包囊壁均含20条蛋白谱带,两者共有谱带为19条,特有谱带均为1条,相似度为95%。结果表明,两种纤毛虫的营养细胞向休眠细胞转化过程中,细胞结构的主要蛋白质成分发生了明显变化,这些变化与细胞在不同生理状态下结构的分化及其生命活动特征相关。形成“毛基体吸收型包囊”的急纤虫与形成“毛基体非吸收型包囊”的游仆虫相比较,前者营养期和休眠期细胞蛋白组成有更明显的差异,这可能与其细胞结构更大程度的脱分化有关;根据纤毛虫休眠细胞的包囊壁和细胞脱包囊后残留的包囊壁两者蛋白组成的差异推测,前者包囊壁可能含有与休眠细胞生命活动相联系的“活性”成分。

摘要: 利用生化分级抽提、DGD包埋 -去包埋透射电镜术和SDS PAGE凝胶电泳 ,研究了膜状急纤虫营养细胞和休眠细胞内中间纤维 -核骨架体系的分化特征及其蛋白组成。观察到营养细胞中 ,位于细胞质不同区域的中间纤维形成网状 ,其网络的密度不同 ;核骨架中 ,核纤层位于细胞核周缘 ,薄层状 ,厚约 5 0nm ;核内骨架由较致密的纤维网络组成。休眠细胞内该结构体系依然存在 ,但位于细胞内不同层次的纤维网比营养细胞的同种结构要致密得多 ,这可能与纤毛虫脱分化时细胞大范围的收缩有关 ;休眠细胞的包囊壁中层壁存在相当于中间纤维的网络结构。SDS PAGE电泳图谱显示 ,休眠细胞内该体系的蛋白组成发生了较明显的变化 ,其中保留了营养细胞的部分蛋白条带 ,丢失了部分条带 ,同时还产生了一些特异性条带。分析表明 ,膜状急纤虫的中间纤维 -核骨架体系是细胞在营养条件下和休眠状态下都稳定存在的结构 ;而纤毛虫形成休眠细胞后中间纤维-核骨架体系及蛋白组成上的变化提示 ,细胞在休眠状态下 ,基因的表达水平与营养细胞是不同的