摘要:

摘要: 为了解翘嘴鳜mi R-222的时空表达规律,研究利用实时荧光定量PCR的方法检测mi R-222在翘嘴鳜不同组织、胚胎发育及胚后发育中的相对表达丰度。研究结果显示,mi R-222在肌肉相关的组织中表达较高,特别是在成年翘嘴鳜的白肌中表达最高;胚胎发育阶段结果显示,mi R-222在胚胎发育的2细胞期就有表达,而表达量在心动期达到最高。不同组织及不同发育阶段的差异性表达结果表明,mi R-222很可能参与调控鳜鱼肌肉的生长发育。为研究合成代谢过程中mi R-222在肌肉生长调控中的表达规律,通过对翘嘴鳜幼鱼在饥饿一周后饱食一餐的实验处理下,利用实时荧光定量的方法测定mi R-222在骨骼肌中的相对表达变化。结果显示,mi R-222的表达量在恢复喂食后的1h显著上升(P<0.05),表明mi R-222很可能是调节鱼类骨骼肌生长过程中,参与快速应答信号系统的一类mi RNA。研究为mi R-222在鱼类发育中的调控作用提供一些理论依据。

摘要: 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是一种危害鳜鱼养殖生产的重要病原细菌,为进一步明确该病原菌的分子特征及建立快速检测技术,实验对引起翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)暴发性死亡的病原嗜水气单胞菌进行了致病性、菌株毒力特征研究,同时以嗜水气单胞菌气溶素基因aer A为分子靶标设计引物,利用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了病原嗜水气单胞菌的快速检测方法。结果表明,本次引起翘嘴鳜暴发性死亡的病原嗜水气单胞菌半致死浓度为1.6×10~6 CFU/m L,携带aer A等14种毒力基因,此14种毒力基因可用于其致病性分析及分子检测。以气溶素基因aer A设计引物进行的环介导恒温扩增,结果显示可扩增出阶梯状条带,加入SYBR Green I染色后呈现绿色的阳性反应,而对照组均未出现任何扩增条带且反应体系呈现橙色,表明LAMP检测方法对于嗜水气单胞菌检测具有很好的特异性;灵敏度检测的最低检测限为4.6×10~1 CFU/m L;10种经人工感染的淡水养殖鱼虾组织匀浆增菌液,提取DNA后进行LAMP方法检测,结果均可获得阳性扩增结果,而对照未染菌组呈阴性,表明该方法具有较好的应用性,可应用于嗜水气单胞菌引起的水生动物疾病的检测。

摘要: 为探究翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)中原癌基因c-Fos (proto-oncogene c-Fos)对摄食相关的味觉受体t1r1(taste receptor type 1 member 1, t1r1)的调控作用,研究采用学习记忆通路相关抑制剂T-5224、KN-62处理鳜脑细胞,通过不同浓度抑制剂处理发现T-5224对c-fos的起负调控作用而KN-62对c-fos起正调控作用,同时筛选出适合的处理时间及浓度。30μmol/L T-5224处理24h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达显著降低(P<0.05),而200 nmol/L KN-62处理2h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达却极显著升高(P<0.05)。此外,研究还分析了抑制剂处理翘嘴鳜脑细胞后, t1r1基因DNA甲基化变化。然而在两种抑制剂处理后,鳜脑中t1r1的甲基化水平无显著变化(P>0.05)。以上结果说明,翘嘴鳜脑细胞味觉受体t1r1转录水平变化,可能是通过学习记忆因子cfos基因调控,而c-fos可能通过其他途径调控t1r1的转录,但不是DNA甲基化。同时为翘嘴鳜驯化后摄食偏好变化提供理论依据。

摘要: 为通过建立雌核发育纯系以实现快速优化种质资源,文章以翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象,探索出了一套静水压诱导雌核发育的方法:将装有翘嘴鳜精子的培养皿置于摇床缓慢摇动,在两只15 w的紫外灯管(培养皿与紫外灯管的垂直距离约17 cm)下照射18min,然后与雌鱼卵子受精5min, 63 MPa静水压处理2min,最后常规孵化。HRM分型技术检测其雌核发育群体的雌性率为100%。该方法简单快捷,诱导孵化率(受精后72h的存活率)为7.56%,比已有的冷休克诱导翘嘴鳜雌核发育的方法约提高3个百分点。研究结果可用于翘嘴鳜雌核发育品系的快速扩群,也可用于翘嘴鳜抗逆相关品系的种质资源创制。