摘要: 美洲大蠊提取物具有显著的抗肿瘤、抗菌和抗肝纤维化等作用,但是,其对肺脏抗氧化应激效果的研究未见报道,本文主要探讨美洲大蠊乙醇提取物对熏烟小鼠血液和肺脏抗氧化应激的效果。选用雌性KM小鼠28只,随机分为对照组、熏烟组、低剂量和高剂量美洲大蠊醇提物组各7只,除对照组灌胃生理盐水外,其他各组每天中午和下午采用烟熏处理,持续31 d,其中第17天开始高剂量和低剂量组每天晚上灌胃美洲大蠊醇提物,实验结束后计算肺脏系数,检测血浆和肺脏组织匀浆中MDA、SOD、CAT、NO、GSH-Px和肺脏SOD、GSH-P_X、CAT基因mRNA表达的水平以及肺脏组织病理结构的变化。结果表明:各组间肺脏系数和血浆、肺脏中总SOD和CAT的活力差异无统计学意义(P>0.05),但是与对照组相比,熏烟组显著升高了血浆和肺脏中NO以及肺脏中MDA的含量,显著降低了血浆中GSH-P_X的活力和肺脏中该基因表达,差异具有统计学意义(P<0.05);而与熏烟组相比,低剂量和高剂量美洲大螊醇提物组均显著降低了血浆和肺脏中NO和MDA的水平,显著升高了肺脏GSH-P_X的活力及其基因表达,高剂量组还显著升高了血浆中GSH-P_X的活力,差异均具有统计学意义(P<0.05);高剂量美洲大蠊醇提物还对香烟造成的肺组织损害具有缓解作用。研究结果表明美洲大蠊乙醇提取物对熏烟小鼠血液和肺组织具有较好的抗氧化应激功能。

摘要: 昆虫肠道共生放线菌作为一种特境放线菌,因与土壤中的放线菌生存环境的不同,研究其种类和抗菌活性具有重要意义。将金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)这两种致病菌作为指示细菌,对分离自美洲大蠊Periplaneta americana肠道的159株内生放线菌使用牛津杯法实验,分别对其进行体外抑菌活性筛选,随后利用16S rRNA PCR、BLAST同源性对比和构建系统发育树相结合的方法对菌株进行分子生物学鉴定,对关键酶基因非核糖体多肽合成酶(Nonribosomal peptide synthetase, NRPS)基因、多聚酮合酶(Polyketone synthase, PKS)基因和卤化酶基因FADH2进行初步筛选。结果表明49株放线菌能够不同程度的抑制金黄色葡萄球菌和MRSA,有11株放线菌对两种致病菌均具有不同程度的抑制作用。49株放线菌中链霉菌属有36株(73.47%),属于优势菌属;其余的13株放线菌分别属于戈登氏菌属、微杆菌属、短状杆菌属、分枝杆菌属、无色杆菌属和小单孢菌属。琼脂糖凝胶电泳结果显示,11株放线菌中有6株放线菌均检测到关键酶基因PKS I、NRPS和卤化酶基因FADH2。本研究表明美洲大蠊肠道中含有具有抗菌活性的放线菌资源。

摘要: 美洲大蠊Periplaneta americana是常见的家居害虫，前期研究发现营养期杀虫蛋白3Aa(Vegetative insecticidal proteins 3Aa, Vip3Aa)蛋白具备杀美洲大蠊作用，但其机制尚不明确。本研究对美洲大蠊饲喂Vip3Aa蛋白后，进行中肠转录组分析，所得raw data过滤获得44.60 Gb Clean Data。通过生物信息学分析，共注释了23 470条基因，发掘新基因5 757个。与对照组比较，共获得2 302个差异表达基因，其中1 539个上调、763个下调。KEGG分析表明，差异基因主要涉及调控溶酶体、其他多糖降解、淀粉和蔗糖代谢、糖胺聚糖降解、昆虫激素合成、鞘糖脂生物合成、药物代谢和凋亡等信号通路，其中溶酶体相关差异表达基因50个，凋亡相关差异表达基因21个。透射电镜和Hoechst 33342染色显示，Vip3Aa给药后，中肠上皮细胞出现凋亡典型的形态改变，线粒体肿胀、空泡、破裂，出现大量次级溶酶体，可见部分细胞的细胞核凝集、固缩、荧光强度增加。结果表明Vip3Aa蛋白可能通过上皮细胞溶酶体-线粒体损伤介导凋亡通路的激活，发挥杀美洲大蠊作用。

摘要: 作为世界性的卫生害虫，美洲大蠊Periplaneta americana对环境有惊人的适应性和极强的繁殖力，其强大的繁殖能力以及卵鞘对胚胎发育的有效保护，是其防治困难的内在原因。本研究以美洲大蠊卵鞘为研究对象，利用Label-free定量技术提取前期和中期的美洲大蠊卵鞘蛋白，检验合格后的蛋白溶液通过酶解，液质联用检测技术后，利用MaxQuant软件对下机数据进行蛋白质鉴定和label-free定量分析，对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG代谢通路富集分析，并讨论不同发育时期美洲大蠊蛋白质组的表达差异。结果显示，在美洲大蠊前期和中期卵鞘中共鉴定出754个蛋白，其中总差异蛋白220个，157个存在显著性差异，与新鲜卵鞘相比，中期卵鞘中表达量上调的蛋白102个，下调的55个。这些差异蛋白主要富集在生物代谢通路、蛋白质合成、胞吐、黏蛋白类、蛋白合成与降解、免疫等过程，它们与卵鞘的形成，胚胎发育时期的保水、免疫等功能密切相关。本研究为进一步研究美洲大蠊卵鞘功能奠定了基础，为美洲大蠊的生物防治提供科学依据。

摘要: 昆虫肠道菌是重要的微生物资源。为拓展微生物酶资源菌种来源，本研究以含Na_2CO_3和脱脂奶粉的培养基从美洲大蠊Periplaneta americana(L.)肠道中筛选产碱性蛋白酶的嗜碱细菌，进行形态学和16S rDNA序列鉴定，并分析温度、pH和Na_2CO_3对菌株生长的影响；采用福林-酚法和SDS-PAGE酶谱法测定温度、pH对菌株所产蛋白酶活性和稳定性的影响。结果显示，从美洲大蠊肠道分离到一株嗜碱细菌PaGA523-1,革兰氏阳性，具芽孢，经鉴定为列城芽孢杆菌Bacillus lehensis,其最适生长pH范围为9～11,最适生长温度为37℃,可在含0.03～0.09 mol/L Na_2CO_3的肉汤蛋白胨液体培养基中生长。在含Na_2CO_3的玉米粉-黄豆饼粉发酵培养基中，菌株PaGA523-1可产生蛋白酶。该蛋白酶的最适反应温度为62℃,最适反应pH范围为9～11。蛋白酶在不同pH缓冲液(7～11)和热处理(40～60℃)后仍具有一定活性，在60℃处理1 h后，仍保留其初始活性的62.68%。SDS-PAGE酶谱法检测结果也定性说明菌株可产生具有一定程度热稳定性的碱性蛋白酶。本研究获得了一株嗜碱性的昆虫肠道芽孢杆菌，该菌可分泌热稳定碱性蛋白酶，在蛋白质水解方面具有潜在应用价值。