摘要: 采用活体观察、吉姆萨与干银法染色等技术,运用国际间统一特定方法及齿体定位描述法对采自广西地区的罗非鱼(单性鱼吉富、奥尼系列)的外寄生车轮虫进行详细的形态分类学与多样性研究,研究结果共计获得车轮虫属2种,拟车轮虫属与三分虫属各1种,分别为:刺纹车轮虫Trichodina centrostrigata Basson et al.,1983、异齿车轮虫Trichodina heterodentata Duncan,1977、非洲拟车轮虫Paratrichodina africana Kazubski&El-Tantawy,1986与直齿三分虫Tripartiella orthodens Basson&Van As,1987。其中,非洲拟车轮虫为中国新纪录,刺纹车轮虫和直齿三分虫为中国广西地区新纪录。非洲拟车轮虫表现出寄主和寄生部位的专一性;进一步应用SPSS统计软件对非洲拟车轮虫进行了种群差异性分析。

摘要: 本研究克隆了罗非鱼源无乳链球菌HN0101分离株的α蛋白基因,通过生物信息学对其序列分析结果显示:α蛋白基因的ORF由1341个碱基组成,编码一个长度为446个氨基酸的多肽,N-端具有一个保守的YSIRK信号肽序列和一个AlphaC_N超家族结构域,C-末端含有1个保守Gram_pos_anchor超家族结构域,而在中间具有2个重复的Rib结构域;比较不同来源分离株的α蛋白结构,发现主要区别在于Rib结构域重复数目的不同;同源性及系统进化树分析,发现本株菌的α蛋白与已报道的人源A909和鱼源GD201008-001α蛋白聚为一簇,同源性达100%;罗非鱼源无乳链球菌α蛋白为亲水性蛋白,存在一个跨膜区,有37个潜在的磷酸化位点和1个潜在的N-糖基化位点;二级结构分析发现存在较多的无规则卷曲,推测有12个氨基酸区域可能是B细胞抗原表位;当选择大肠杆菌为表达宿主时,该重组蛋白的溶解度高达100%,亚细胞定位显示该蛋白位于细胞壁上。

摘要: 研究聚集于罗非鱼的鳃寄生非洲拟车轮虫（Paratrichodina africana El-Tantawy&Kazubski, 1986）,基于附着盘形态量化与SSU rDNA分子数据对采自重庆与广东两地的罗非鱼鳃寄生非洲拟车轮虫进行了群体分化与遗传多样性研究。基于附着盘形态量化研究结果表明:重庆与广东两种群除了在齿体形态（齿体纵长、齿长、齿钩长）和齿体比方面具显著性差异（P<0.05）外,其他方面均无差异; PCA分析结果显示广东种群的散点图分布包含于重庆种群之中,表明两种群的形态相似度极高。遗传多样性研究结果:28个SSU rDNA分子序列共计检测到10个单倍型,含7个特有单倍型和3个共享单倍型,其中Hap 3是最大的共享单倍型,且重庆、广东两地均有分布;广东种群（高H_d高P_i型）的遗传多样性高于重庆种群（高H_d低P_i型）,推测水温与地理分布可能是影响非洲拟车轮虫遗传多样性的重要因素。分子系统发育分析结果显示:来自广东的Hap5位于系统树底部,且广东样本遍布于每个分支;而遗传分化指数(F_st)和基因流（N_m）结果显示两群体间的基因交流不频繁,具有中等程度的遗传分化,以此推测重庆种群起源于广东种群,且分子变异分析（AMOVA）结果进一步证明其种群变异主要来源于群体内（变异率为92.18%）。中性检验（Tajima’s D和Fu’s F_s）和核苷酸错配分析结果认为,非洲拟车轮虫整个群体可能经历过早期的种群扩张,但近期未发生;而不同地理群体（广东种群与重庆种群）均未经历过种群扩张事件。研究为后续车轮虫的群体遗传及谱系地理学研究奠定基础,同时为水产养殖的车轮虫病害防控提供参考资料。

摘要: 实验旨在研究饲料中添加高浓度N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼体脂肪含量、血清生化指标、肝脏脂肪沉积、脂肪代谢基因表达的影响。选取360尾平均体质量为(32.56±1.12) g的罗非鱼,随机分为3组,每组设置3个重复,每个重复40尾鱼。以不添加NCG组的基础饲料作为对照,另外设置添加高浓度2000和5000 mg/kg NCG的2种实验饲料作为实验组(NCGⅠ和NCGⅡ)。每天按体重4%定量投喂2次,共饲养8周。研究结果表明,高浓度NCG添加水平升高了罗非鱼的肝体指数, NCGⅡ组的肝体指数显著增加(P<0.05)。NCGⅠ和NCGⅡ组罗非鱼血清甘油三酯和胆固醇含量显著高于对照组(P<0.05),且NCGⅡ组罗非鱼血清的谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性显著升高(P<0.05)。高浓度NCG的添加显著提高罗非鱼内脏脂肪含量,并显著减少内脏蛋白质含量(P<0.05)。肝脏HE染色和油红O染色结果显示,高浓度NCG添加组的肝脏细胞出现了空泡化变性和明显的脂滴富集现象,且NCGⅡ组比NCGⅠ组的罗非鱼肝脏中的空泡更大,脂滴更大更集中。在进食高浓度NCG后,罗非鱼肝脏中脂肪氧化分解相关基因肉碱棕榈酰转移酶1基因(Carnitine palmitoyl transferase 1)、基因过氧化物酶体增殖物激活受体a基因(Peroxisome proliferator activated receptor alpha)和解偶联蛋白1基因(Uncoupling protein 1)的表达量显著降低(P<0.05)。综上,高浓度NCG的添加会造成罗非鱼的脂肪代谢异常,使得血脂升高,并诱导出严重脂肪肝症状和内脏脂肪蓄积,这可能是高浓度NCG降低了肝脏脂肪β-氧化相关基因的表达所导致。

摘要: 目的研究罗非鱼肝细胞的分离提取的方法、鉴定。方法将鱼肝脏经D-Hank液反复洗涤后剪碎经IV型胶原酶消化后过滤、离心、经DMEM洗涤后用Percoll分离液行肝细胞纯化、细胞计数,光镜下观察其形态结构。结果胶原冷消化法分离后的细胞中仍含有一定量的杂细胞,可采用90g,60g,30g离心进一步分离提纯。结论胶原酶冷消化法获得满意结果,60g离心2min和30g离心3min可达到纯度和产量均较理想的结果。