摘要: 本研究以Cu²⁺(0、100μg·L^-1)对罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii进行处理,分别在胁迫后的0 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h收集血淋巴,检测血细胞中的细胞凋亡率、活性氧（ROS）含量、酯酶活性、一氧化氮（NO）含量以及细胞凋亡执行分子caspase-3和免疫因子α-2M基因的表达。结果显示,血细胞凋亡率和ROS含量的变化趋势一致,在胁迫后的6～48 h显著升高（P<0.05）。酯酶活性在胁迫后的3～48 h均显著下降（P<0.05）,最低值出现在48 h。在胁迫后的6～48 h,NO含量持续增加,并与对照组的差异有统计学意义（P<0.05）。caspase-3的相对基因表达量在胁迫后的6～48 h均显著升高（P<0.05）,并在24 h达到最高值。在胁迫后的12 h,α-2M基因的表达量显著升高（P<0.05）并达到峰值,在24 h有短暂降低,但与对照组相比仍显著增加（P<0.05）,在48 hα-2M基因的表达量显著降低（P<0.05）。相关性分析显示,血细胞凋亡率和NO以及ROS都呈显著的正相关（P<0.001）。实验表明,Cu²⁺胁迫显著抑制了机体的酯酶活性,诱导NO和ROS的产生以及免疫相关基因α-2M的表达来对抗Cu²⁺胁迫带来的损伤。随着胁迫时间的延长,过高浓度的NO和ROS对机体自身造成了伤害,并诱导凋亡相关基因caspase-3的表达,最终导致细胞凋亡,说明Cu²⁺对虾类具有免疫抑制性和毒性。NO和ROS的升高可能是细胞凋亡的主要诱因。

摘要: 试验旨在研究中华圆田螺内脏粉(CVM)替代鱼粉对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)生长性能和肌肉品质的影响。分别配制以0(CVM0,作对照组)、20%(CVM20)、40%(CVM40)、60%(CVM60)、80%(CVM80)和100%(CVM100)田螺内脏粉等量替代鱼粉的6种等氮等脂的试验饲料。在循环水系统中饲养初始体重为(0.26±0.01) g的罗氏沼虾396尾,随机分成6组,每组设3个重复,每个重复22尾。试验周期为60d。结果显示, CVM不影响罗氏沼虾存活率(P>0.05)。与对照组相比, CVM替代60%鱼粉时显著提高了罗氏沼虾的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)(P<0.05),但替代比例达80%后, WGR、SGR和蛋白质效率(PER)显著降低,饲料系数(FCR)和摄食率(FI)显著升高(P<0.05)。CVM替代20%—80%的鱼粉均显著提高了罗氏沼虾粗蛋白质含量(P<0.05)。CVM替代鱼粉对罗氏沼虾水分、粗脂肪和灰分影响不显著(P>0.05)。在CVM替代60%鱼粉时,显著提高了罗氏沼虾肌肉中总呈味氨基酸含量和总氨基酸含量(P<0.05)。在CVM替代40%鱼粉时,显著改善了罗氏沼虾肌肉的硬度、弹性、黏聚性和咀嚼力,并显著降低了滴水损失率(P<0.05)。观察肝胰腺组织形态发现, CVM80组肝小管间出现嗜酸性红染, CVM100组部分肝小管结构紊乱。综上所述, CVM替代60%的鱼粉能促进罗氏沼虾的生长,提高肌肉粗蛋白质、总呈味氨基酸和总氨基酸含量,但高比例替代会导致肝胰腺组织结构损伤。

摘要: 为探明罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)新发疫病“白体病”(暂命名)的病因及防控策略,通过流行病学调查研究了该病的典型症状与潜在病原,并进一步筛选了其防治药物。结果发现,该病主要流行于罗氏沼虾种虾养殖场,其临床症状为体色发白、肌肉混浊及肝胰腺萎缩,组织病理特征包括肌肉组织破裂、肝胰腺上皮细胞坏死、肠道壁细胞溶解及鳃炎症细胞增多。经病虾肝胰腺组织液回感试验证实致病菌存在,并从6个养殖场的病虾中分离出8株优势菌株,鉴定为葡萄牙柠檬酸杆菌(Citrobacter portucalensis)和产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)。人工感染试验表明,所有分离菌株均对罗氏沼虾具致病性,其中葡萄牙柠檬酸杆菌XN241202和产气克雷伯氏菌GY241001致死率最高。研究将该病命名为罗氏沼虾白体综合症(White Syndrome, WS)。体外抑菌试验显示,头孢哌酮、恩诺沙星、氟苯尼考等抗生素及百里酚、牛至油、白屈菜红碱、藿香提取物等植物源药物对菌株XN241202和GY241001具有显著抑菌效果。体内试验表明,饲料中添加1 mg/kg的恩诺沙星、氟苯尼考或牛至油可显著降低WS罗氏沼虾的死亡率(P<0.05)。研究结果为罗氏沼虾WS防控提供了重要科学依据,对保障罗氏沼虾种业安全具有重要意义。

摘要: 为探究温度对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)感染十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)的影响及调控机制,研究设置5组不同温度(26、28、30、32、34℃)对罗氏沼虾人工感染DIV1,并统计其存活率,结果显示温度34℃能够抑制罗氏沼虾体内的病毒复制,减少死亡并延长其存活时间。对感染DIV124h和72h的罗氏沼虾肝胰腺、鳃及肌肉进行病毒载量测定,结果表明感染DIV1的罗氏沼虾在72h内病毒迅速增殖,但当水温升高至30℃及更高温度时其体内的病毒载量明显降低。此外,采集罗氏沼虾不同温度下感染DIV1的肝胰腺进行转录组学分析,结果表明共有8483个不同差异表达基因,富集分析发现基因主要富集在花生四烯酸代谢(Arachidonic acid metabolism)、糖酵解/糖异生(Glycolysis/Gluconeogenesis)、α-亚油酸代谢(alpha-Linolenic acid metabolism)等与Warburg效应相关的代谢通路中,推测这些基因和通路可能与病毒感染机制密切相关。对罗氏沼虾感染DIV1后的免疫基因CAT、Cu/ZnSOD、CTL、ACP的表达水平进行测定,结果发现当温度为32℃时免疫基因的表达量显著高于其他温度,表明高温能够促进罗氏沼虾的免疫基因表达量增加以抵御病毒入侵。研究通过分析不同温度对DIV1感染罗氏沼虾的影响,初步揭示了温度对病毒复制的影响及调控机制,为深入探究病毒感染的分子机制和开发抗病毒免疫技术奠定一定的基础。

摘要: 为探讨饲料中脂肪水平对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)蚤状幼体生长、抗氧化、免疫和抗应激能力的影响,研究将同一批罗氏沼虾亲体所产的蚤状幼体[初体重为(0.19±0.05) mg]随机分到养殖桶内,试验共分为5组,每组6个平行,每个平行有5000尾幼体。试验第1周投喂丰年虫,第2周开始投喂粗蛋白水平为52.25%,脂肪水平分别为6%、8%、10%、12%和14%的试验饲料,饲养6周后,进行全虾采样,分析幼体的生长、抗氧化和免疫性能。同时,将每个平行30尾后期幼体用于空气暴露试验,分析幼体的抗应激能力。结果发现:当饲料脂肪水平超过6%时,幼体的存活率显著降低(P<0.05);幼体变态率在脂肪水平为10%—12%时达到峰值,显著高于其余各组(P<0.05);幼体的末重、增重率及特定生长率呈现先上升后降低趋势,在脂肪水平为12%时达到最大值(P<0.05)。幼体中C18﹕2n-6和n-6 HUFA的比例随饲料中相应脂肪酸比例的升高而显著升高,脂肪水平为10%—14%组显著高于脂肪水平为6%—8%组(P<0.05);幼体中C20﹕4n-6的比例随饲料中相应脂肪酸比例的降低而显著上升,脂肪水平为8%—14%组显著高于脂肪水平为6%组(P<0.05);幼体中DHA的比例随饲料中DHA比例的升高而呈降低趋势,在脂肪水平高于12%时,显著降低(P<0.05)。幼体的总抗氧化能力(T-AOC)在饲料脂肪水平为8%—10%时显著高于其余各组(P<0.05);谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性在脂肪水平为10%时达到最高(P<0.05);当脂肪水平为8%—12%时, SOD活性显著高于其余各组(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量在脂肪水平为10%—12%时显著低于其余各组(P<0.05)。饲料脂肪水平对幼体酸性磷酸酶(ACP)活性无显著影响,但在脂肪水平为10%时幼体碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于其余各组(P<0.05)。此外,在饲料脂肪水平为12%时,空气暴露试验后期幼体的存活率显著高于6%、8%和14%脂肪水平组(P<0.05)。因此,在实际生产中,为优化罗氏沼虾蚤状幼体的生长和健康状况,建议将饲料的脂肪水平控制在10%—12%。