摘要: 建立了松材线虫PCR检测标准化阳性对照及特异性强的PCR检测体系.根据松材线虫rDNA-ITS区和BxPe12基因的特异基因序列设计引物,并从中筛选出一对特异引物cqubs01/cquba01,该引物能从松材线虫特异性扩增出196bp片段,而不能对其他种类线虫进行扩增.基于优化PCR反应体系和反应程序,稳定的检测体系得以建立,检测灵敏度为100pg/μL.以松材线虫基因组DNA为模板,以上述特异引物进行PCR扩增,将纯化后的PCR产物与PMD18-T载体连接之后转入大肠杆菌中,筛选出阳性克隆进行测序验证,最终获得了松材线虫的无害化阳性对照,建立了松材线虫标准化阳性对照的PCR检测体系.对来自于不同地区的12批次近100个样品进行了实际检测验证,其结果与实际发生情况一致,说明本检测体系稳定可靠.图3表2参8

摘要: 以抗禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae Wollenweber,cereal cyst nematode,CCN)小麦品系‘E-10’和易感材料‘中国春’为材料,通过人工接种禾谷孢囊线虫二龄幼虫,并在接种线虫后测定根部防御酶苯丙氨酸转氨酶(PAL)和脂氧合酶(LOX)活力变化,研究抗感性材料对线虫侵染后防御酶的响应,以了解作物的抗虫机制.结果发现,‘E-10’和‘中国春’防御酶活力变化存在显著差异,‘E-10’在线虫侵染后6 h,LOX酶活增强,在24 h达到最大值,酶活变化比‘中国春’迅速,暗示‘E-10’启动线虫防御反应更为有效直接.此外,发现小麦在接种线虫后会引起邻近未接种植株根部防御酶活力变化.‘E-10’在接种线虫后12 h,其接触组未接种材料根部PAL酶活增加0.9倍,LOX酶活增加1.1倍,并且‘E-10’未接种植株的酶活变化比‘中国春’更迅速,幅度更剧烈.表明可能有某些气态或挥发性物质参与了小麦防御线虫侵染过程,并且这种现象在抗感材料间差异显著.使用茉莉酸甲酯处理‘E-10’和‘中国春’,小麦根部PAL和LOX酶活并未产生与接触接种线虫材料相一致的变化,表明该气态或挥发性物质并非茉莉酸甲酯.

摘要: 为筛选对甘薯茎线虫具有高毒力的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,提取12株供试Bt菌株的晶体蛋白,溶解后加入到甘薯茎线虫悬浮液中,统计3 d和7 d后甘薯茎线虫的死亡率.经初筛和复筛后得到一株对甘薯茎线虫具有高毒力的Bt菌株YBT-008,其对甘薯茎线虫的LC50值为203.76μg/mL.研究了YBT-008的生物学特性,结果表明,YBT-008在LB培养基上培养约12 h后进入稳定期,并且伴随芽胞的形成产生卵圆形的伴胞晶体;SDS-PAGE分析表明YBT-008可产生多种待鉴定的晶体蛋白类型,质粒检测显示该菌株有5条质粒条带.YBT-008的获得为利用Bt防治甘薯茎线虫提供了新型菌株和基因资源.

摘要: 随着磁现象在家电、材料、医疗和通讯等领域中的广泛应用,其对人类健康以及生态环境的影响逐渐引起关注,进一步评价有关电磁辐射的生物效应具有非常重要的理论和应用价值.模式生物秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)因饲养简单、经济有效、发育及遗传背景清楚等优点,在磁场生物效应研究中起着重要作用.本文概述了磁场分类及生物电磁特性,综述了近几年国内外利用秀丽线虫评价不同磁场的生物效应及其潜在机制的研究.磁场的生物效应与磁场本身的特点及生物电磁特性紧密相关.磁场可减缓线虫发育速率,缩短寿命,降低后代数目,引起行为能力下降及行为紊乱等生物效应,其中发育与老化相关基因、凋亡与insulin/IGF-1信号通路在磁响应上发挥着关键作用.磁场暴露还可显著提高线虫的氧化应激水平,增加能量代谢并限制进食水平,但诱导的部分生物效应可随暴露时间的延长被机体耐受或代偿.此外,磁场与生物体的相互作用受到磁感强度、作用时间和磁场运动状态等多种参数的影响,不同的磁场暴露环境可能会导致相反的结果.最后探讨了胚胎及幼体暴露后的发育毒性、孕期暴露的生殖及可遗传毒性等研究焦点,以及高通量测序筛选敏感基因靶点、免疫组化结合电镜观察异染色质评价表观遗传效应、活体药物转运系统筛选辐射防护剂等相关新技术的应用.

摘要: 以大连国家森林公园凋落物作为分解基质,采用不同网孔的分解袋法,开展土壤线虫群落对城市森林凋落物分解和主要养分元素释放的影响研究.研究期间共鉴定出4 418条土壤线虫,分别隶属于39个属.0.1 mm网袋土壤线虫类群相对密度年均值为7.34目/g凋落物干重,个体相对密度年均值为1.55个/g凋落物干重,显著高于0.02 mm网袋(0.49目/g凋落物干重、0.21个/g凋落物干重),并且0.1 mm网袋中的线虫数量远远大于0.02 mm网袋中的线虫数量,由此视0.1 mm网袋凋落物分解由土壤线虫和微生物共同作用,而0.02 mm网袋基本排除了土壤线虫对袋内凋落物分解的影响.0.1 mm网袋凋落物失重率和C、P元素释放率明显高于0.02 mm网袋,表明土壤线虫在一定程度上促进凋落物分解和养分元素释放.两种不同网袋凋落物失重率和元素释放率的差异比较结果显示土壤线虫对凋落物分解的贡献率年均值约为24%,而对元素释放率的影响不同,其中对N元素释放率的影响较大,对K元素释放率的影响作用最小.本研究表明,土壤线虫群落对城市森林凋落物分解和主要养分元素释放有显著影响,其中对凋落物分解速率和N元素释放具有明显的促进作用.