摘要: 脱氧鬼臼毒素是砂地柏Sabina vulgarisAnt.中的主要杀虫活性成分之一。为探讨其作用机理,以叶碟饲喂法处理粘虫MythimnaseparataWalker4龄幼虫,测定了饲喂处理12h、24h、36h、48h和72h后试虫的羧酸酯酶(CarE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(AKP)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的活性。结果表明:脱氧鬼臼毒素对粘虫羧酸酯酶的活性无明显影响;对酸性磷酸酯酶具有明显的抑制作用,且随着处理时间的延长,抑制作用增强;对碱性磷酸酯酶的影响较为复杂,表现为先抑制,后有所恢复,再被抑制的变化过程;对谷胱甘肽S-转移酶处理12h后活性变化不明显,24h后被抑制,36h后逐渐激活,与对照差异极显著;对细胞色素P450酶系的O-脱甲基酶活性具有明显的抑制作用。

摘要: 昆虫中肠膜类钙粘蛋白(cadherin-like protein,CLP)是苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)毒素的重要受体之一,与Bt毒素的杀虫作用机制以及昆虫对Bt毒素的抗性等密切相关。本研究应用RT-PCR和RACE技术,克隆了迁飞性重要害虫粘虫Mythimna separata类钙粘蛋白基因全长cDNA序列(命名为Msclp,GenBank登录号为JF951432),全长5642bp,编码1757个氨基酸,推导的氨基酸序列具有昆虫类钙粘蛋白的特征结构,包括1个信号肽、1个前蛋白区、12个钙粘蛋白重复、1个近膜区、1个跨膜区和1个胞质区。预测的分子量和等电点分别为196.786kD和4.5。该蛋白与同科的烟夜蛾Helicoverpa assulta、烟芽夜蛾Heliothis virescens、棉铃虫Helicoverpaarmigera及甜菜夜蛾Spodoptera exigua的类钙粘蛋白亲缘关系最近,氨基酸序列一致性分别为61.77%,61.66%,61.26%和58.14%。荧光定量RT-PCR分析表明,该类钙粘蛋白基因在不同龄期的粘虫幼虫中表达量差异极显著(P<0.01),其中4龄幼虫相对表达量最高,但与3龄、6龄幼虫并没有显著性差异;1和2龄幼虫表达量最低;表达部位主要在粘虫中肠,在中肠以外的虫体其他部位表达量极低。这些结果对于揭示转Bt作物对非靶标、迁飞性粘虫的杀虫作用机制以及评价其潜在的对Bt毒素抗性机制等奠定了基础。

摘要: 为揭示寄生蜂寄生对其寄主的生理调控机制,室内对中红侧沟茧蜂Microplitis mediator寄生与未被寄生寄主粘虫Mythimna separata幼虫血淋巴中糖类、脂类和蛋白含量变化进行了测定。结果显示:在滞育与非滞育条件下,被寄生的粘虫血淋巴中糖原浓度均比未被寄生的粘虫高。滞育条件下寄生后12 d差异显著(P<0.05),被寄生粘虫糖原含量为7.93μg/mL,未被寄生粘虫糖原含量为4.70μg/mL;非滞育条件下寄生后6 d差异显著(P<0.05),被寄生粘虫糖原含量为14.35μg/mL,未被寄生粘虫糖原含量为5.47μg/mL。海藻糖含量测定结果显示,在滞育条件下寄生蜂对被寄生粘虫无明显影响,而非滞育条件下影响效果差异显著(P<0.05),寄生后4 d被寄生粘虫海藻糖含量为46.82μg/mL,未被寄生粘虫含量为26.72μg/mL。在滞育与非滞育两种条件下,寄生与末被寄生寄主脂类和蛋白含量没有显著性差异。结果说明:寄生蜂的存在使寄主血淋巴中的糖原含量增高;非滞育条件是影响被寄生粘虫海藻糖含量变化主要因素;粘虫对中红侧沟茧蜂的寄生表现相当强的适应性和忍受力。

摘要: 为了更全面地评价转基因作物对粘虫Mythimna separata(Walker)(鳞翅目:夜蛾科)的影响,在室内用生测法研究了粘虫初孵幼虫连续取食含不同浓度的Cry1Ac毒蛋白的人工饲料后,其生长发育、繁殖及飞行能力的变化。结果表明:取食0(对照),3,6,12,24,48和96μg/gCry1Ac毒蛋白人工饲料6d后的幼虫头宽、体长、18d后的体重随着毒蛋白浓度的升高显著降低,幼虫发育历期显著延长,死亡率显著升高。取食含毒蛋白浓度>12μg/g饲料的幼虫不能正常化蛹;取食含0,3和6μg/g毒蛋白饲料的幼虫能正常化蛹、羽化,化蛹率随着毒蛋白浓度的升高而显著降低、蛹历期显著延长;取食含0,3和6μg/g毒蛋白饲料的幼虫羽化的成虫繁殖能力有显著差异,产卵前期随毒蛋白浓度的升高显著延长,产卵量显著降低;而1日龄成虫飞行能力(飞行距离、时间和速度)则随毒蛋白浓度的升高显著降低。这些结果表明,Cry1Ac毒蛋白对粘虫的生长发育、繁殖及飞行具有显著影响,从而为完善转Bt作物的生态安全性风险评估提供了重要的实验依据。

摘要: 为进一步探讨斑蝥素的杀虫作用机理,本研究采用叶碟饲喂法处理粘虫Mythimna separata(Walker)5龄幼虫,测定了饲喂处理后6,12,24,36和48h试虫体内羧酸酯酶(CarE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和细胞色素P450Ο-脱甲基酶及多酚氧化酶(PPO)的活性。结果表明:斑蝥素可显著激活羧酸酯酶,处理后48h酶比活力最大,为同期对照的1.68倍;酸性磷酸酯酶在处理后6和12h活性变化不明显,处理24h后逐渐被激活,且与对照差异显著(P<0.05);明显抑制碱性磷酸酯酶,且随着处理时间的延长,抑制作用增强;对Ο-脱甲基酶表现为先抑制后激活的趋势;谷胱甘肽S-转移酶表现出先激活后抑制的影响;离体活体条件下均可显著抑制PPO活性。可见,斑蝥素可明显影响昆虫的代谢酶系,且其对碱性磷酸酶和多酚氧化酶的抑制作用可能与其毒杀作用有关。