摘要: 【目的】明确不同烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)生物型在新疆地区的区域分布及其携带番茄黄化曲叶病毒的情况。【方法】本文利用烟粉虱mtDNA COⅠ基因片段作标记以及番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curlvirus,TYLCV)特异性引物,鉴定新疆不同地区烟粉虱生物型,并检测其携带TYLCV情况。【结果】石河子市、博乐市、岳普湖县、泽普县、叶城县、莎车县、墨玉县、和田市与和田县烟粉虱属于B型烟粉虱,且720bp COⅠ基因序列一致性为100%;阿克苏市、哈密市、鄯善县、乌鲁木齐市、克拉玛依市与伊宁市烟粉虱属于Q型烟粉虱,720bp COⅠ基因序列一致性为99.9%100%;吐鲁番市与库尔勒市兼有B型烟粉虱和Q型烟粉虱。伊宁市、乌鲁木齐市、鄯善县、哈密市、阿克苏市、库尔勒市、莎车县、和田县和墨玉县的烟粉虱样本携带TYLCV,除2011年底已经暴发危害的莎车县外,其他区域均为番茄黄化曲叶病毒病发生的高风险区域。【结论】本研究为新疆地区烟粉虱及番茄黄化曲叶病毒病的科学防控提供依据。

摘要: 卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor,VgR)是卵黄原蛋白被卵母细胞摄取的关键因子,在卵黄发生和卵母细胞发育等生理过程中发挥着重要作用。为探讨烟粉虱Bemisia tabaci VgR的功能,我们采用RT-PCR和RACE等技术扩增了烟粉虱MEAM1隐种B.tabaci Middle East-Asia Minor1(MAEM1)的VgR基因cDNA全长序列。生物信息学分析表明,烟粉虱MEAM1隐种的VgR基因cDNA全长5774bp,编码1919个氨基酸,推测分子量约201kDa,N-端前31个氨基酸为信号肽。烟粉虱MEAM1隐种的VgR属于低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)家族,蛋白质三维结构预测分析表明,该受体具有LDLR家族基因典型的保守功能结构域。通过实时荧光定量PCR技术研究了烟粉虱MEAM1隐种VgR基因不同发育时期的表达,结果表明VgR基因在伪蛹期开始表达,并在羽化后1d达到高峰,此后逐渐降低,3d后又逐渐升高,直至羽化后7d达到峰值。研究结果丰富了卵黄原蛋白受体家族基因的数据库,为今后深入研究并揭示烟粉虱卵黄发生的调控机制奠定了基础。

摘要: 昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)是降解昆虫体内保幼激素的关键酶之一,具有调控昆虫发育、变态和生殖等功能。本实验以烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术克隆获得编码552个氨基酸的烟粉虱MED隐种保幼激素酯酶基因的部分cDNA序列,将其命名为Btjhe(GenBank登录号为KC422259)。同源序列比对发现,该基因与菜叶蜂Athalia rosae、西方蜜蜂Apis mellifera的保幼激素酯酶基因推导的氨基酸一致性较高,且具有昆虫保幼激素酯酶共有的5个氨基酸保守模块,其中包括对保幼激素酯酶活性起关键作用的长疏水结合域GxSxG。由此推测,Btjhe为烟粉虱MED隐种的保幼激素酯酶基因,其编码蛋白参与烟粉虱体内保幼激素的特异性降解。实时荧光定量PCR检测结果表明,Btjhe在烟粉虱若虫、成虫阶段都有表达,在成虫阶段表达量较高,且在羽化后11d达到峰值,其表达模式与卵黄原蛋白基因(vg)类似。本研究结果为明确烟粉虱的生殖调控机理奠定基础。

摘要: 多酚氧化酶是多种刺吸式昆虫唾液中的关键酶类,可以通过干扰寄主植物正常的氧化还原反应来调控食物来源使其更有利于昆虫本身。昆虫体内的漆酶-1属于多酚氧化酶家族,被认为参与昆虫取食过程中的金属离子代谢、降解植物次生有毒物质以及免疫防御等生理活动。为研究漆酶-1基因在烟粉虱MEAM1隐种Bemisia tabaciMiddle East-Asia Minor1组织中的功能,利用RACE技术首次获得了烟粉虱MEAMI隐种漆酶-1(laccase-1,lac-1)基因的cDNA全长序列,命名为Btlac-1(GenBank登录号:JQ966215)。结果表明,该基因含有一个2733bp的开放阅读框,编码910个氨基酸,其编码产物含有3个Cu-oxidase功能域,属于蓝多铜氧化酶家族成员。同源性比较分析表明,Btlac-1与黑尾叶蝉Nephotettix cincticeps和豌豆蚜Acyrthosiphon pisum的lac-1编码的氨基酸序列一致性达58%。Btlac-1在不同组织和发育时期的转录表达分析表明,Btlac-1在烟粉虱MEAM1隐种中肠中的转录水平最高,显著高于头胸部和腹部组织中,且在各个发育时期均有表达,在成虫期的表达水平较高。该结果为进一步明确lac-1在烟粉虱取食过程的生理作用奠定基础,也为探讨刺吸式昆虫与植物相互作用机制提供理论依据。

摘要: 烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一个物种复合体,包括31个以上形态上无法区分的隐种,其中少数隐种是世界性入侵害虫。目前,在中国境内分布有2个入侵隐种和13个土著隐种。快速、高效的鉴别方法对掌握烟粉虱田间发生规律及制定相关防控策略具有重要意义。然而到目前为止,除了mtCOI基因测序比对外,尚未有一种简便的方法可以有效地区分多个烟粉虱隐种。本研究采用mtCOI PCR-RFLP技术,单独或组合使用TaqI,VspI,Van91I,NcoI和FokI这5种限制性内切酶,酶切烟粉虱mtCOI的PCR扩增片段,鉴别分布在中国境内的9个烟粉虱隐种。结果表明,单独使用TaqI酶切,可鉴别出MEAM1和China1两个隐种,使用TaqI+NcoI分步酶切可鉴定出MED和Asia1两个隐种,使用TaqI+Van91I分步酶切可鉴定出Asia II3和Asia II9两个隐种,使用TaqI+VspI+FokI分步酶切可鉴定出Asia II1,Asia II6和Asia II73个隐种。本研究为高效鉴别中国境内的多个烟粉虱隐种提供了方法。