摘要: 本研究主要采用透射电镜观察粉尘螨Dermatophagoides farinae(Hughes)生殖系统超微结构。粉尘螨雄性生殖系统是由精巢、输精管、附腺、射精管、交配器官及附属交配器官组成。精巢内可同时有精子发育各阶段的细胞。精子无核膜、核染色质聚集成束、线粒体缺乏典型的嵴、胞质内有平行排列的电子致密薄片等为其特征性结构。雌性生殖系统由交合囊、交合囊管、储精囊、囊导管、卵巢、输卵管、子宫及产卵管构成。卵巢内可见含多个细胞核的中央细胞,其周为卵母细胞等生殖细胞。该研究丰富了对粉尘螨生殖系统结构的认识。

摘要: 光镜下观察了粉尘螨Dermatophagoidesfarinae消化系统结构,其组成包括:口前腔、前肠、中肠、后肠、肛门和唾液腺。口前腔由颚体围绕而成;前肠包括一个肌肉的咽和食道,食道从脑中穿过;中肠分为前中肠(包括一对盲肠)和后中肠,中肠的上皮细胞呈现多种形态;后肠包括相对大的结肠和狭窄的直肠;消化腺为不规则形,位于脑前方。本文阐述了消化道的分支情况、显微结构及细胞形态。

摘要: 粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上,得到重组质粒pET24a-DerfⅠ,工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出DerfⅠ蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot及ELISA方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。

摘要: 粉尘螨Dermatophagoides farinae是一种重要的医学螨类。本文用光镜和扫描电镜研究了粉尘螨雌雄生殖系统的形态和结构。结果表明:雄性生殖系统由睾丸、输精管、附腺、射精管、阳茎及附属交配器官组成。睾丸位于血腔末端,不成对,精原细胞、精母细胞和精子依照精子发育的顺序有规则地分布在其内部。雌性生殖系统包括交配孔、囊导管、储精囊、囊导管、卵巢、输卵管、子宫、产卵管及产卵孔,其中卵巢由一个中央营养细胞和围绕其周围的卵母细胞组成。

摘要: 粉尘螨Ⅱ类变应原(DerfⅡ)是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原之一,可引发Ⅰ型变态反应。从深圳地区挑取活粉尘螨,经形态鉴定后纯培养,提取其总RNA,RT-PCR扩增出DerfⅡ基因,克隆到pMD18-T载体后测序。通过计算机软件分析该基因的多态性。将该目的基因克隆到pET-His表达载体上得到重组质粒pET-DerfⅡ。工程菌经IPTG诱导培养,表达DerfⅡ目的蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。重组DerfⅡ蛋白通过6His-tag蛋白纯化系统进行分离、纯化,并进行Western blot检测该重组蛋白与对粉尘螨过敏患者血清中IgE的反应性。结果表明,克隆的5株深圳地区的DerfⅡ基因与GenBank公布的DerfⅡ(AB195580.1)核苷酸序列同源性为96.8%99.3%,推导的氨基酸序列同源性为93.8%98.6%。表达纯化的5种重组DerfⅡ蛋白经Western blot检测,表明都具有良好的变应原性。