摘要: 按照我国现行诊断标准以及WHO—ECAMM技术要求，对北京口岸2018—2019年收集的可疑疟原虫感染者血样，制作厚薄血膜涂片并进行显微镜检，同时平行进行实时荧光定量PCR检测。结果显示，2018—2019年共收集227件输入性可疑样本，显微镜检结果为：恶性疟129件、间日疟12件、三日疟9件、卵型疟17件、混合感染10件、阴性50件，阳性率78.0%;实时荧光定量PCR结果为：恶性疟110件、间日疟6件、三日疟7件、卵型疟12件、混合感染6件、阴性86件，阳性率62.1%。显微镜检和实时荧光PCR总体一致性达到84.1%,但对于疟原虫感染密度低的血样标本以及混合感染样本，两种检测方法比较，总体阳性率差异明显（χ²=13.0,P<0.005）,显微镜检灵敏性高于实时荧光定量PCR检测；且依据WHO—ECAMM技术要求，须在10 min内准确判断阴阳性并确定型别，镜检具备更高的时效性。

摘要: 东南亚大湄公河区域(GMS)内的6个国家批准了2030年前在该地区实现完全消除疟疾的区域性疟疾消除计划,传播阻断疫苗(TBV)作为实现这一计划的有力武器面临着候选抗原数量不足的缺陷。本文研究了配子融合蛋白PvHAP2的传播阻断活性,以评估其作为TBV候选抗原的潜能。通过原核表达系统表达了PvHAP2的HAP2/GCS1结构域从而获得了重组蛋白,并用其免疫BALB/c雌性小鼠获得抗体。通过间接免疫荧光分析显示抗PvHAP2抗体仅与间日疟原虫雄性配子体反应。结果显示,在用临床分离株进行的标准膜饲实验(SMFA)中发现抗PvHAP2抗体能够抑制间日疟原虫卵囊在雌性按蚊宿主体内形成。相比较于对照组,用与抗PvHAP2抗体混合后的间日疟原虫患者血液饲喂按蚊后,按蚊感染率降低25%,平均卵囊数降低15.3%。但抑制效果不如杆状病毒表达蛋白免疫获得的抗血清明显,导致这一情况出现的原因需要进一步探讨。结果表明,HAP2有成为TBV候选抗原的潜质,但相较原核表达蛋白系统更为高效的蛋白表达系统值得深入的研究。

摘要: 为分析新型间日疟原虫红细胞结合蛋白（PvEBP）在中国中部地区（安徽）及周边国家边境地区（缅甸和越南）的遗传多样性和种群分布特征,提取31例中国（安徽）和22例缅甸（Laiza镇）间日疟原虫患者基因组DNA,经PCR扩增并测序,同时从GenBank中分别获取缅甸和越南地区相应基因序列共34例,进行PvEBP基因多态性和遗传分化分析。结果显示PvEBP核苷酸多态性和单倍型多样性在我国中部地区安徽较低（π=0.00051,Hd=0.634）,在缅甸和越南地区相对较高;三个流行区分离株中PvEBP-RII受到正向选择压力的影响（dN/dS>1）,突变集中在PvEBP-RII;不同群体间PvEBP基因的遗传分化程度较高;三个群体共享单倍体型较少,仅单倍型Hap₄同时出现在三个不同流行区。结果表明,中国（安徽）和周边国家（缅甸和越南）分离株PvEBP的基因多态性及分化程度因地理隔离差异较大,PvEBP-RII可作为间日疟原虫红内期候选疫苗的重要靶点。

摘要: 为探讨约氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6(Plasmodium yoelii Protein Phosphatase 6, PyPP6)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性,采用PCR扩增PP6优势抗原表位并克隆入pET32a(+)载体,诱导PyPP6重组蛋白(rPyPP6)表达与纯化,免疫小鼠获取抗-PyPP6免疫血清(anti-PyPP6)。采用ELISA和Western Blot方法检测anti-PyPP6血清效价和特异性,IFA检测PyPP6蛋白在约氏疟原虫各期定位,体内外实验检测anti-PyPP6血清对雄配子出丝、动合子形成和卵囊发育的影响。结果显示,成功诱导rPyPP6表达,anti-PyPP6血清抗体滴度为1:128000,PyPP6部分定位于约氏疟原虫质膜。与对照组相比,anti-PyPP6免疫血清1∶5倍稀释可显著抑制61.5%配子体出丝,动合子数目和动合子转化率分别降低了75%和19.7%,卵囊形成数量减少了35%。结果表明,PyPP6重组蛋白具有良好的免疫原性和抗原性,抗-PP6免疫血清具有显著的传播阻断效果。

摘要: 疟疾的实验室诊断对于临床治疗至关重要,诊断失误会造成患者误诊、漏诊甚至死亡。血涂片的染色镜检是疟疾实验室诊断的金标准。本研究旨在对感染人体的4种疟原虫:恶性疟原虫P.falciparum、间日疟原虫P.vivax、以及卵形疟原虫P.ovale和三日疟原虫P.malaiae在红细胞中的各期形态进行系统梳理,以提高形态诊断过程中的准确率。本文对2018年疑似疟疾样本的快速检测试剂条(RDT)和镜检形态学检测结果进行比较。结果发现,虽然RDT检测快速、易于操作,但镜检仍然是疟疾确诊的金标准。同时定期形态学培训及质控考核应该成为疟疾检测实验室的常规工作。