摘要: [目的]明确蜂巢小甲虫Aethina tumida气味结合蛋白1 (odorant binding protein 1,OBP1)的表达模式,分析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的作用。[方法]基于蜂巢小甲虫转录组和基因组数据库扩增AtOBP1的cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR分析该基因在蜂巢小甲虫不同发育阶段(卵、幼虫、蛹和雌雄成虫)、羽化后第7天成虫不同组织(头、表皮、翅、足、脂肪体、肠道、马氏管、精巢和卵巢)以及羽化后不同日龄成虫头部的表达量;采用RNA干扰技术和Y型管行为选择实验,解析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的生物学功能。[结果]AtOBP1基因的cDNA(GenBank登录号:MT211982.1)包含6个外显子,其开放阅读框(ORF)长447 bp,编码148个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为15.9 kD和4.73,具有PBP_GOBP亚家族的保守结构域;AtOBP1蛋白是由6个α螺旋结构组成的二聚体,且有6个保守的半胱氨酸形成3个二硫键;系统发育进化树显示该蛋白与鞘翅目(Coleoptera)黄粉虫Tenebrio molitor的TmolOBP8聚在同一分支。RT-qPCR结果显示AtOBP1在蜂巢小甲虫蛹期及雄成虫期表达量较高,且在成虫头部和精巢中特异性高表达;AtOBP1在成虫头部的表达量随着日龄而逐渐升高,分别在羽化后第5和7天达到2个高峰,羽化后第8天降低。利用RNAi技术结合Y型管行为选择行为实验结果表明,沉默AtOBP1后,蜂巢小甲虫成虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的选择偏好性显著降低。[结论]蜂巢小甲虫AtOBP1属于Classical OBPs家族,AtOBP1要在蜂巢小甲虫成虫头部和精巢中高表达而且可能参与蜂巢小甲虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的识别过程。

摘要: 【目的】本研究旨在明确蜂巢小甲虫Aethina tumida气味结合蛋白1(odorant binding protein 1, OBP1)的表达模式，分析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的作用。【方法】基于蜂巢小甲虫转录组和基因组数据库扩增AtOBP1的cDNA全长序列，并进行生物信息学分析；利用RT-qPCR检测该基因在蜂巢小甲虫不同发育阶段(卵、幼虫、蛹和雌雄成虫)、羽化后第7天成虫不同组织(头、表皮、翅、足、脂肪体、肠道、马氏管、精巢和卵巢)以及羽化后不同日龄成虫头部的表达量；采用RNA干扰技术和Y型管行为选择实验，解析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的生物学功能。【结果】AtOBP1基因(GenBank登录号：MT211982.1)的cDNA全长序列包含6个外显子，其开放阅读框(ORF)长447 bp,编码148个氨基酸残基，预测分子量和等电点分别为15.9 kD和4.73,具有PBP＿GOBP亚家族的保守结构域；AtOBP1蛋白是由6个α螺旋组成的二聚体，且有6个保守的半胱氨酸形成3个二硫键；系统发育进化树显示该蛋白与鞘翅目(Coleoptera)黄粉虫Tenebrio molitor的TmOBP8聚在同一分支。RT-qPCR结果显示AtOBP1在蜂巢小甲虫蛹期及雄成虫期表达量较高，且在成虫头部和精巢中特异性高表达；AtOBP1在成虫头部的表达量随着日龄而逐渐升高，分别在羽化后第5和7天达到2个高峰，羽化后第8天降低。RNAi技术结合Y型管行为选择行为实验结果表明，沉默AtOBP1后，蜂巢小甲虫成虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的选择偏好性显著降低。【结论】蜂巢小甲虫AtOBP1属于Classical OBPs家族，AtOBP1主要在蜂巢小甲虫成虫头部和精巢中高表达而且可能参与蜂巢小甲虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的识别过程。

摘要: 【目的】马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata是我国重要的检疫性害虫,对茄科植物危害严重。本研究旨在明确出现倒春寒短时低温对马铃薯甲虫种群增长的影响。【方法】马铃薯甲虫卵在8℃下分别处理1, 3和5 d,以27℃下饲养的卵作为对照,调查卵孵化率及孵化后幼虫的生长发育和成虫繁殖情况,用种群参数评估短时低温对马铃薯甲虫种群增长的影响。【结果】马铃薯甲虫卵经8℃短时低温处理后,随着低温胁迫天数的增加,卵期显著延长;3 d和5 d处理组中卵孵化率显著低于对照,1龄幼虫发育历期显著长于对照,但8℃低温处理对2, 3和4龄幼虫历期以及蛹期均无显著影响。马铃薯甲虫卵经8℃低温处理5 d后,1龄幼虫和成虫存活率显著低于对照,而其余各发育阶段的存活率在各处理组间均无显著差异。在8℃低温处理3 d时马铃薯甲虫的内禀增长率(r)、周限增长率(λ)、净增殖率(R_0)显著低于对照和低温处理1 d时,但平均世代时间(T)在各处理组间无显著差异。【结论】短时低温胁迫对马铃薯甲虫的生长发育有不利影响,延缓和降低了马铃薯甲虫种群增长。

摘要: 【目的】马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata是一种世界性检疫害虫,对温度胁迫具有极强的适应性,为进一步明确其对温度胁迫适应性的分子机制,研究了热激蛋白HSP60在马铃薯甲虫温度胁迫应答过程中的作用。【方法】采用RT-PCR及RACE技术克隆马铃薯甲虫热激蛋白HSP60基因的cDNA全长序列;利用生物信息学软件分析该基因及其编码蛋白质的序列特性;运用实时荧光定量PCR技术分析该基因在温度胁迫下的表达模式。【结果】克隆得到马铃薯甲虫热激蛋白HSP60基因,命名为Ld-HSP60(Gen Bank登录号:KC556801),其cDNA全长2 234 bp,开放阅读框(ORF)长1 731 bp,编码576个氨基酸,相对分子量约为61.27 kD,理论等电点为5.51,5'端非翻译区(UTR)长101 bp,3'UTR长402 bp。氨基酸序列中含有HSP60家族典型的特征序列。实时荧光定量PCR结果表明,低温胁迫(-10和0℃)下未检测到马铃薯甲虫雌雄成虫中Ld-HSP60的诱导表达;高温胁迫(38和44℃)诱导马铃薯甲虫雄成虫Ld-HSP60上调表达,随着胁迫温度的升高LdHSP60表达量呈现先升高后降低的趋势,38℃高温胁迫下表达量最高,胁迫时间越长Ld-HSP60表达量也越高。【结论】相比其他热激蛋白,HSP60对温度敏感性较低,推测HSP60可能在马铃薯甲虫雄成虫抵御高温胁迫中发挥作用。

摘要: 松墨天牛Monochamusaltern atusHope是传播松材线虫病的主要媒介,引诱剂是抑制松墨天牛种群数量的无公害调控有效方式之一。本研究通过在中国浙江富阳的林间试验测定了6种小蠹类引诱剂与1种天牛引诱剂不同组合联用对松墨天牛成虫以及其他蛀干害虫的诱捕效果。结果表明:横坑切梢小蠹Tomicus minor引诱剂3-carene-10-ol、云杉八齿小蠹Ips typographus引诱剂2-methyl-3-buten-2-ol、欧洲榆小蠹Scolytus multistriatus引诱剂4-methyl-3-heptanol和纵坑切梢小蠹T.piniperda引诱剂verbenol分别与松墨天牛引诱剂联用后,对松墨天牛的引诱效果无显著性差异(P<0.05)。西部松大小蠹Dendroctonus brevicomis引诱剂exo-brevicomin或黄杉大小蠹D.pseudotsugae引诱剂1-methylcyclohex-2-en-l-ol与松墨天牛引诱剂联用后对松墨天牛的诱捕效果有减弱的趋势。另外,与单独使用中国天牛引诱剂相比,小蠹类引诱剂与其联用后在诱捕其他蛀干害虫的种类和个体数量上均有所减少。