摘要: 通过对甜菜夜蛾卵超低温冷冻过程中一系列影响因子的研究 ,建立了甜菜夜蛾卵在液氮中冷冻保存的方法。结果表明 ,利用 1 5%次氯酸钠处理卵壳 6min ,再用异丙醇处理 1 5sec和N 己烷处理 30sec可有效去除甜菜夜蛾卵的外卵壳和蜡质层 ,获得 95%以上的渗透化率和 60 %左右的存活率 ;渗透化卵经 2mol L乙二醇初步抗冻 30min和含 1 0 %BSA的 8 5mol L乙二醇脱水 5min ,约有 55%～ 60 %的卵存活和2 4 %的卵孵化 ;将抗冻处理后的卵投入液氮 ( - 1 96℃ )中 2 4h ,在 37℃下解冻 ,结果有 ( 1 6 3± 7 6) %的卵发育至黑头期 ,( 1 6± 1 1 ) %的卵孵化。

摘要: 研究了甜菜夜蛾雌蛾求偶行为和腺体中性信息素滴度时日变化的规律。结果表明 ,雌蛾求偶行为和性信息素滴度均呈明显的昼夜节律 ,且均在暗期的中后期达到高峰。比较而言 ,雌蛾的求偶活动期较短 ,在暗期中期开始 ,暗期结束后很快停止 ;但峰期较长 ,从中后期达到高峰后一直保持到暗期结束。而腺体内 4种性信息素组份从暗期前 0 .5h到下一个光期 4.5h均有产生 ;但峰期很短 ,暗期 6.5h显著增加达到高峰后 ,在 8.5h又迅速回落。日变化研究表明 ,甜菜夜蛾当日龄即可求偶 ,3日龄起进入求偶盛期 ,至 7日龄末有明显减退。 0～ 3日龄雌蛾的平均初始求偶时间逐日显著提前 ,以后则稳定在暗期 5h左右。不同日龄间性信息素滴度的变化较小

摘要: 【目的】甜菜夜蛾Spodoptera exigua细胞色素P450单加氧酶（cytochrome P450 monooxygenase, P450） CYP9A186通过F116V突变获得了对甲维盐和阿维菌素的代谢能力，并介导了对这两种杀虫剂的高水平抗性。本研究针对相同基因簇中旁系同源CYP9A40（野生型已具备代谢活性）的同源位点L118进行人工突变，探究该位点的功能保守性与抗性演化风险。【方法】通过人工定点突变构建了CYP9A40^L118V突变体，利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统进行了体外表达。利用超高效液相色谱-串联质谱（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS）技术测定了野生型CYP9A40、 CYP9A40^L118V突变体及CYP9A186^F116V突变体在体外代谢后阿维菌素和甲维盐的减少量，并比较了代谢活性的差异。利用分子对接模拟，分析了突变体功能变化的分子机制。【结果】野生型CYP9A40对阿维菌素和甲维盐的代谢活性[代谢速率分别为（5.22±0.02）和（0.90±0.05） pmol/（min·pmol P450）]与CYP9A186^F116V突变体的[代谢速率分别为（4.19±0.04）和（0.88±0.08） pmol/（min·pmol P450）]相当。而CYP9A40的L118V突变导致对阿维菌素的代谢速率降低了77.8%,同时完全丧失对甲维盐的代谢活性。分子对接模拟结果表明，CYP9A40的L118V突变破坏了CYP9A40催化口袋底部疏水环境，导致极性作用力和结合能显著下降，削弱了底物结合稳定性。【结论】甜菜夜蛾CYP9A40具有介导阿维菌素类药剂抗性的潜力，该P450蛋白的L118位点是维持对该类药剂代谢功能的关键保守位点，其侧链疏水特性与空间构象对底物结合稳定性不可或缺。该位点的功能约束性对靶向抑制剂开发具有指导意义。