摘要: 【目的】建立一种针对实蝇幼虫快速鉴定的技术方法,并应用该技术以明确我国瓜果上主要实蝇类害虫的优势种。【方法】以我国瓜果蔬菜上危害最为严重的瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)、南亚果实蝇Bactrocera tau Walker和橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)为对象,基于3种实蝇种间存在线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ因子(mt COⅠ)基因的序列差异,利用3种限制性内切酶SapⅠ、BsmⅠ和SacⅠ酶切识别这些差异序列的特异性酶切位点,根据酶切后mtCOⅠ基因片段大小不同,对3种实蝇进行快速的鉴定识别,并进一步应用此技术对来自我国7省11市的7种瓜菜和2种水果上的21份实蝇幼虫样本进行鉴定。【结果】通过单独或组合酶切的方式建立了一套针对瓜实蝇、南亚果实蝇和橘小实蝇的PCR-RFLP快速分子鉴定技术,并将此方法应用于田间监测。田间鉴定结果表明,湖北、湖南、浙江等地区危害瓜菜的实蝇主要是南亚果实蝇,广东、广西、海南等地区瓜菜上的实蝇种类主要是瓜实蝇,且瓜实蝇和南亚果实蝇存在寄主重叠现象,云南危害火龙果和芒果等水果上的实蝇主要是橘小实蝇。【结论】本研究建立的瓜实蝇、南亚果实蝇和橘小实蝇的识别鉴定方法,因不受虫体、虫态的影响,且具有低成本、高效、快速、重复性好的特点,适用于田间瓜果上实蝇样本的快速诊断检测。依据田间鉴定结果,预测近年来瓜实蝇可能有逐渐向北扩散的趋势。

摘要: 本文概述了国内外主要瓜类实蝇的生物防治研究进展,概括了瓜实蝇Bactrocera cucurbitae和南亚果实蝇Bactrocera tau的主要自然天敌类群,论述了植物源提取物、性信息素、化学物质、诱集植物和不育技术在防治瓜类实蝇方面的应用,并讨论了生物防治存在的问题和今后持续控制瓜类实蝇方面的发展趋势。

摘要: 【目的】热激蛋白基因Hsps在生物体抗逆性过程中具有重要的作用,本文旨在通过阐释瓜实蝇Bactrocera cucurbitae (Coquillett)热激蛋白基因Hsp90在其对环境温度适应性及抗药性过程中的功能作用,为瓜实蝇综合治理提供理论基础。【方法】采用RACE-PCR技术克隆瓜实蝇的Hsp90基因cDNA序列,利用生物信息学工具分析序列特征,并通过实时定量PCR技术分析高温胁迫、阿维菌素诱导和抗性及敏感品系中该基因的表达情况。【结果】克隆获得的瓜实蝇Hsp90基因cDNA全长2 654 bp,命名为Bc-Hsp90,GenBank登录号为KP864677,含2 145 bp的开放阅读框,编码715个氨基酸蛋白,具有HSP90蛋白家族共有模式和1个基序标签,C-末端具有MEEVD基序,属于胞质型热激蛋白。系统发育分析显示,Bc-Hsp90基因高度保守。不同高温(32-40℃)胁迫处理1 h和2 h后,瓜实蝇成虫体内Bc-Hsp90的相对表达量均显著高于对照组(26℃),并在38℃和40℃表达量最高;阿维菌素长期筛选的RS品系,Bc-Hsp90表达量是对照SS品系的2.13倍,但RS品系以LC90剂量诱导后,Bc-Hsp_(90)表达量显著下调,随着恢复时间延长其表达量逐渐升高,96 h后恢复到对照水平。【结论】推测Bc-Hsp90在瓜实蝇耐热性和抗阿维菌素过程中可能起着重要作用。

摘要: 【目的】了解瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)对低温的耐受性,分析其不同发育阶段耐寒力差异。【方法】以不同发育阶段瓜实蝇为实验材料,分别测定并比较了过冷却点、水分、脂肪、甘油和糖类含量的变化情况。【结果】其不同龄期的过冷却点差异显著,5日龄蛹的过冷却点最低,为﹣17.04℃,1日龄幼虫的过冷却点最高,为﹣11.82℃,同一日龄的雌、雄成虫之间的过冷却点无显著差异;其幼虫期和蛹期虫体的含水量随着龄期的增长而下降,从1日龄幼虫79.64%下降到5日龄蛹65.31%,5日龄蛹的含水量显著低于其他龄期瓜实蝇,成虫期各龄期雌成虫含水量均显著高于雄成虫;5日龄幼虫脂肪含量最高,为32.90%,1日龄雄成虫和14日龄雄成虫脂肪含量最低,均为15%;幼虫期甘油含量随着龄期的增长而下降,从3.32μg/mg下降到1.12μg/mg,而蛹期逐渐上升,14日龄雌成虫甘油含量最高,为5.90μg/mg;1日龄幼虫总糖、海藻糖和糖原含量均最高,分别为7.51、0.94和1.93μg/mg,显著高于其他龄期瓜实蝇,蛹期糖类含量逐渐下降,而成虫期糖类含量随龄期增长而逐渐升高。【结论】本研究结果可为正确评估瓜实蝇的地理适应性和低温检疫处理提供依据。

摘要: 在温度2528℃、相对湿度70%75%和光照周期L∶D=14∶10条件下进行了人工大量饲养橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)和瓜实蝇B.cucurbitae(Coquillett)成虫人工饲料配方的筛选试验。结果显示,1∶2重量比例混合的蔗糖和啤酒酵母是饲养这2种果实蝇的最佳成虫人工饲料,用其饲养的单雌产卵量、产卵期和孵化率分别为424.16445.75粒,30.9031.87 d,74.60%75.40%。同时,对18种由不同配方配制成的幼虫人工饲料饲养橘小实蝇、瓜实蝇和南亚果实蝇B.tau(Walker)的效果进行了比较。结果表明,玉米和麦麸作为饲料的介质优于麦片和麦麸。橘小实蝇幼虫人工饲料的优化配方为:玉米+麦麸(125 g+25 g),蔗糖25 g,啤酒酵母25 g,对羟基苯甲酸甲酯0.9 g,1 mol/L盐酸4 mL,纸巾4 g,自来水300 mL;用其幼虫人工饲料饲养该虫的生物学参数包括子代孵化率、化蛹率、羽化率和平均蛹重分别为81.17%±0.05%,96.41%±0.02%,94.85%±0.01%与(19.40±0.08)mg。而瓜实蝇和南亚果实蝇幼虫人工饲料的优化配方为:玉米+麦麸(100 g+50 g),蔗糖30 g,啤酒酵母25 g,以及一定量的其他组分(同上);用其饲料饲养这2种果实蝇的相关参数:子代孵化率、化蛹率、羽化率和平均蛹重分别为78.50%±0.04%与76.96%±0.12%,95.73%±0.03%与94.69%±0.02%,94.57%±0.02%与95.82%±0.03%,(18.62±0.23)mg与(22.83±1.38)mg。试验证实,优化后的成、幼虫人工饲料具有饲养效果好、方法简便,配方材料来源广泛和价格低廉等优点,可用于室内人工大量饲养上述3种果实蝇属害虫。