摘要: 目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养及纯化方法，并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统。方法 密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs，差速贴壁法不断纯化，流式细胞仪检测第3代BMSCs CD45、CD90和CD105表达;此外，用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs，倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率。结果 (1)密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性。(2)借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs，感染效率为84.1%。结论 利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs，基于BMSCs建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统。

摘要: 目的 通过RT-PCR扩增巴马小型猪GGTA1基因，分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为生产GGTA1基因沉默的广西巴马小型猪奠定基础。方法 根据NCBI上发布的猪ɑ-1,3半乳糖转移酶基因cDNA序列(AF221508)，设计合成一对含有HindⅢ和Bam HI酶切位点的特异性引物，以广西巴马小型猪肝脏组织总RNA为模板进行RT-PCR，所得目的片段经纯化、克隆、鉴定和测序；将目的基因与pEGFP-N1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-GGTA1，通过测序，双酶切鉴定。结果 所克隆的广西巴马小型猪GGTA1基因存在缺失第五外显子(81-116)的GGTA1序列,序列全长1 080 bp和未缺失第五外显子的GGTA1序列,全序列为1 116 bp。构建两个表达载体(缺失第五外显子pEGFP-GGTA1-1、未缺失第五外显子pEGFP-GGTA1-2)。结论 广西巴马小型猪GGTA1基因存在第五外显子缺失的现象，通过对GGTA1基因克隆序列进行分析以及构建两个真核表达载体，为后面在猪源PK-15细胞中对其进行表达鉴定以及巴马小型猪ɑ-1,3半乳糖转移酶基因的沉默实验奠定基础。

摘要: 目的 探讨家猪心血管三角的解剖结构，为建立动物模型提供形态学数据。方法 选购形态结构完整的家猪心脏50例，大体观测心大静脉和左冠状动脉及其分支的位置、数目、外径和角度。分析心血管三角的特点。结果 家猪心血管三角可分为相交、相伴和复合三种类型。在三角形中，前室间支与左旋支构成的角为97.0±15.4°，对应边长为46.24±15.30 mm;前室间支与心大静脉构成的角为29.7±10.3°,对应边长为23.50±8.02 mm;左旋支与心大静脉构成的角为54.9±16.4°，对应边长为36.30±13.94 mm。心血管三角内可有左室前支和对角支走行。结论 家猪心血管三角形态与人心相似，大小有显著差异。家猪可作为冠心病和冠状窦介入治疗的良好动物模型。

摘要: 目的 探讨体细胞克隆巴马小型猪的生理生化指标特性。方法 采用全自动血球计数仪和全自动生化仪，对体细胞克隆巴马小型猪血液的部分生理和生化指标进行测定和分析。结果 体细胞克隆巴马小型猪生理生化指标和同期普通巴马小型猪没有显著差异,与人类大部分指标接近。结论 体细胞克隆巴马小型猪和人类的生理生化特性有一定的相似性。

摘要: 目的 建立小型猪的体细胞核移植技术，为开展转基因小型猪动物模型研究提供技术支撑。方法 应用体细胞核移植技术，以小型猪胎儿成纤维细胞和枫泾猪耳成纤维细胞作为供体细胞进行体细胞核移植，并将两种重构胚混合后进行胚胎移植。结果 两种供体细胞在体外发育能力上无显著差异(P>0.05);电融合后进行化学激活能部分提高囊胚发育率，但差异不显著(P>0.05)。两种方法生产的小型猪和枫泾猪克隆胚胎混合后，经胚胎移植均能顺利产下4只健康后代。经微卫星亲缘关系鉴定，克隆猪100%与供体细胞相同，与代孕母猪无关。结论 建立的克隆平台能够用于克隆猪的生产。