摘要: 目的研究比较修饰后IGF-1基因对小鼠免疫机能及生长的影响,探索研制调控动物免疫和生长发育的新型安全高效的分子制剂。方法通过重叠PCR扩增技术克隆得到新型短链IGF-1基因,将其分别构建到原核表达载体pGEX-4T-1及真核表达载体VR1020中,得到重组质粒pGG,pGF,VRG和VRF,分别进行体外实验检测器表达活性;然后用壳聚糖和mPEG-PEI修饰得壳聚糖通过离子交联包裹重组质粒,将包裹后形成的纳米颗粒,按0.1mg质粒/只的剂量接种3周龄昆明小鼠。在免疫前及免疫后每隔一周采血,检测小鼠体重变化,血常规检测免疫细胞数量的变化,流式细胞分型技术检测CD4+/CD8+标记的T细胞,并且通过MTT实验检测上清对L-02细胞的增殖作用。结果发现免疫后14～42d之间,与对照组相比实验组VRI、VRG小鼠外周血中淋巴细胞、CD4+T细胞量明显升高(P<0.05);并且免疫后14～56d之间,与对照组相比,实验组VRI、VRG对小鼠生长的促进作用也非常显著(P<0.05);另外mPEG-PEI-CS和CS包裹VRI、VRG接种的实验组小鼠血清对L-02细胞具有明显的增殖作用。结论我们的研究首次证明在小鼠免疫后14～42d中,VRG/F与对照组相比,对L-02细胞具有明显的增殖作用(P<0.05)。这些结果说明了短链的IGF-1基因能够促进接种后小鼠的生长发育,提高其免疫功能,为进一步研究控制动物传染疾病安全高效的生物制剂奠定了基础。

摘要: 本文研究了赤子爱胜蚓在长春市城郊不同组合的粮食猪粪、饲料猪粪和玉米、水稻秸杆混合物中生长繁殖状况,结果发现赤子爱胜蚓的质量在0～30d大幅度增加,30～60d增加减缓,60～90d呈负增长趋势。赤子爱胜蚓产茧量在试验期间的总趋势是递增的。猪粪种类、秸杆种类和两者的混合比例差异对赤子爱胜蚓的质量变化产生重要影响。粮食猪粪和玉米秸杆混合物的质量比例大致在1:1时特别适宜赤子爱胜蚓生长和繁殖。赤子爱胜蚓在饲料猪粪和玉米秸杆混合物中的日增重倍数和日产茧量多于饲料猪粪和水稻秸杆混合物。本试验结论可为城郊猪粪和作物秸杆的大规模资源化利用提供参考。

摘要: 为了解四川地区近几年猪源沙门氏菌的耐药性变迁情况,本研究于2009—2014年间采集了四川省主要猪养殖场的肛拭子样本2660份,分离鉴定获得沙门氏菌151株,总分离率为5.68%,占主导的血清型为德尔卑沙门氏菌(60.26%)。采用微量肉汤稀释法测定分离菌株对13种抗菌药物的敏感性。药敏结果显示,沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、大观霉素、四环素、磺胺异噁唑、复方新诺明和恩诺沙星7种药物的耐药率最高,分别为94.7%、92.7%、93.4%、95.4%、91.4%、90.1%和86.8%,对头孢噻呋和多粘菌素E相对敏感。分析猪源沙门氏菌对不同抗菌药物的耐药性随年份的变迁情况,结果表明:2009—2014年猪源沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、大观霉素、四环素、磺胺异噁唑和复方新诺明6种药物的耐药率维持较高的平稳动态趋势,对头孢噻呋、庆大霉素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星和多粘菌素E这7种药物的耐药率呈上升趋势,尤其对头孢噻呋、多西环素、氟苯尼考和氧氟沙星的耐药率上升显著。6年间多重耐药菌株比例维持在较高水平(>60%)。研究表明,四川地区猪源沙门氏菌的耐药情况十分严重,亟需加强养殖业抗菌药物的合理应用以控制耐药性发展。

摘要: 于2012年10—12月在桃红岭国家级自然保护区采用随机样方法调查了梅花鹿和野猪的生境选择。结果表明:梅花鹿秋季频繁在高海拔(365.5 m±141.7 m)、坡度平缓(17.80°±12.68°)、阳坡、上坡位空间活动,选择高度为0.81 m±0.36 m的灌丛或草丛,灌木高度较高(4.70 m±1.68 m)、密度较小(7.56棵±4.55棵)的生境活动,对乔木直径、郁闭度和覆盖度3个生态因子表现为随机选择;野猪则选择灌林木生境,对其余的生态因子表现为随机选择。逐步判别分析结果显示,坡度、海拔和灌木密度3个变量导致了梅花鹿与野猪之间的生境分离(Wilk'sλ=0.801,x2=24.89,df=3,P<0.001),判别函数方程:F=0.653×坡度-0.546×海拔+0.840×灌木密度+0.144,正确判别率达82.4%。

摘要: 目的本试验克隆和构建了猪Ghrelin(GL)与类胰岛素生长因子-1(IGF-1)的融合基因及其表达载体,研究它们在体外HEK293细胞的表达,为探索新型高效的动物生长和免疫调节生物制剂奠定了基础。方法利用基因重叠延伸PCR技术分别获得了GL、短链IGF-1基因及其融合基因(GI),双酶切后插入到VR1020真核分泌型表达载体上,分别命名为VGL、VRI和VGI。用壳聚糖(Chitosan,CS)和mPEG-PEI-CS分子包裹VRI、VGH和VGI制备纳米颗粒,先后进行HEK293细胞转染表达实验。结果成功克隆了猪Ghrelin基因及其与IGF-1的融合基因,构建了它们的真核表达载体,并进行了纳米分子包装,在HEK293细胞获得高效表达。结论猪Ghrelin和IGF-1融合基因及其真核载体的成功构建和表达,为进一步研发安全有效的新型生物制剂、促进动物的生长发育和免疫机能提供了新途径。