摘要: 为从分子水平上探究西藏牦牛类群的遗传多样性、亲缘关系,本研究测定了日多牦牛、类乌齐牦牛、丁青牦牛、错那牦牛、隆子牦牛、仲巴牦牛、聂荣牦牛、申札牦牛等8个西藏牦牛类群共328头牦牛mt DNA D-loop区序列,分析其多态性,构建系统进化树。结果表明:本次测定的西藏牦牛mt DNA D-loop区序列长度为887-895 bp,共检测到135个变异位点,其中单态突变位点52个,简约信息位点83个。在328个个体中共检测出91种单倍型,平均单倍型多样性(Hd)、平均核苷酸多样性(π)分别为0.884、0.010 27,显示西藏牦牛具有丰富的遗传多样性。8个类群间平均遗传距离为0.011;日多牦牛与错那牦牛间遗传距离最小(0.006);类乌齐牦牛与隆子牦牛间遗传距离最大(0.015)。系统进化分析显示西藏牦牛可分为两大类,错那牦牛是较纯的牦牛类群,其它牦牛类群在进化过程中出现相互交流的情况。

摘要: 白血病抑制因子受体(LIFR)与白血病抑制因子(LIF)结合,在排卵、胚胎发育及胚胎附植等过程中起重要的调节作用,与哺乳动物生殖过程密切相关。为进一步研究白血病抑制因子受体(LIFR)基因在卵巢中的表达,本研究对牦牛LIFR基因进行克隆和序列分析,并利用RT-PCR技术研究其在繁殖周期卵巢中的表达情况。本研究克隆得到牦牛3 329 bp的LIFR基因c DNA序列,内含3 288 bp开放阅读框序列。与家牛的相应序列具有很高的同源性(99.5%),表明LIFR基因在进化过程中较为保守。实时定量RT-PCR检测LIFR基因在繁殖周期卵巢中的表达,结果显示卵巢中LIFR基因在妊娠期表达最强。表明LIFR基因在牦牛繁殖周期中具有不可忽视的作用。

摘要: 心脏作为血液循环最重要的器官在动物环境适应中发挥着重要的作用。心肌细胞是心脏主要的功能细胞，然而高海拔地区牦牛心肌细胞基因表达变化及细胞间通讯关系尚不清楚。为此，本研究以高海拔地区牦牛(青海祁连，海拔4 000 m)和低海拔地区牦牛(青海循化，海拔2 600 m)为研究对象，基于心脏组织10×单细胞转录组测序数据，对心肌细胞和心脏其他细胞进行细胞通讯及配体-靶基因调控预测，同时对高、低海拔牦牛心肌细胞差异表达基因进行功能注释分析，以期探究心肌细胞在牦牛适应高原环境过程中的作用。结果显示，牦牛心肌细胞与内皮细胞、上皮细胞的关联最强，心肌细胞-树突状细胞及心肌细胞-巨噬细胞两个“细胞对”中CD74＿COAP和CD74＿APP配受体表达量相对较高；配受体活力在TNF信号通路中相对较强；在免疫相关通路发挥重要作用的配体PTPRC、PECAM1、ITGB2、ANXA1、BDNF等对所有“细胞对”影响明显，且PI3K-Akt信号通路在配体-靶基因调控中潜力分值最高；高、低海拔牦牛心肌细胞中差异表达基因功能主要富集在代谢途径，其中氧化磷酸化、糖酵解代谢通路相关的基因表达明显增强。本研究结果提示，牦牛可通过加强心肌细胞与其他细胞之间的联系及调节免疫作用相关过程维持自身稳态；同时高海拔牦牛可通过增强心肌细胞有氧代谢和无氧代谢进而获取更多能量以适应高海拔严酷环境。

摘要: 地西泮结合抑制因子(Diazepam binding inhibitor, DBI)与酰基辅酶A具有高亲和力，在动物组织中广泛存在，与脂肪酸代谢、类固醇激素合成密切相关。为研究DBI基因的分子特征及该基因在乳腺发育中的作用，对牦牛DBI基因编码区进行克隆，进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR (Quantitative real-time PCR, qPCR)、蛋白免疫印迹技术(Western blotting, WB)和免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)方法对牦牛泌乳前期、泌乳期和干乳期的乳腺组织中DBI的相对表达量和表达部位进行研究。DBI序列分析显示：牦牛DBI基因编码区序列长264 bp，编码87个氨基酸残基，与牛的同源性高达99.62%;qPCR数据表明：牦牛泌乳前期乳腺组织中DBI基因的相对表达量显著高于泌乳期和干乳期(P <0.05);WB结果显示：牦牛泌乳前期乳腺组织中DBI蛋白的表达量最高，干乳期次之，泌乳期最低(P <0.05);IHC结果表明：不同发育时期的牦牛乳腺组织中DBI的表达部位并无明显差异，主要表达于乳腺腺泡上皮细胞、导管上皮细胞及小叶间质细胞。DBI在不同发育时期牦牛乳腺组织中的相对表达量具有明显差异(P <0.05)，揭示DBI可能参与牦牛乳腺发育的过程，这为进一步探究DBI基因在生物体中的作用提供相应的理论参考。

摘要: 为探讨牦牛肝脏生长过程中基因的表达特征,采用Illumina高通量测序平台(HiSeqTM2500)对1日龄组(LD)、15月龄组(LM)和5岁龄组(LY)的健康麦洼牦牛肝脏进行转录组测序,并以qRT-PCR验证差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)的表达量。结果显示,LD组、LM组和LY组中分别有325个、85个和84个表达水平高于其他两组的显著差异表达基因(P <0.05)。在其富集的GO条目和KEGG通路中,分别包含102个、104个和134个显著差异GO条目及19个、13个和19个显著差异KEGG通路(P <0.05)。其中占比最多的GO条目为氧化还原相关过程、发育过程和代谢过程,占比最多的KEGG通路为磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B (phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase, PI3K-Akt)信号通路、粘着斑和细胞外基质(extracellular matrix, ECM)受体相互作用。qRT-PCR差异验证结果显示,CYP7B1、PGFS2、CYP1A1、UGT2C1-1、UGT2C1L、HSD11B1、CYP2C19、UGT2C1-2基因的表达量变化与转录组测序结果相符。综上表明,本研究为进一步探讨不同生长阶段牦牛肝脏发育提供了有力的实验数据,可为深入理解牦牛肝脏生长发育过程提供参考与借鉴。